Gå direkte til indholdet
SK-MEL-1
Væv
Hud
Sygdom
Modermærkekræft
Metastasested
Lymfekanal i brystkassen
Synonymer
SK-Mel-1, SK Mel 1, SK-Mel 1, SK-Mel1, SKMEL-1, SkMEL-1, SKMEL1, SK 1

Dokumenter

SK-MEL-1

Cell line · Varenummer 300424

This cell line was established in 1966 by F. Oettgen and associates using cells from the thoracic duct of a patient. Pigment granules relating both to synthe...

€550.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse
Denne cellelinje blev etableret i 1966 af F. Oettgen og medarbejdere ved hjælp af celler fra thoraxkanalen fra en patient. Pigmentgranulater, der er relateret til både syntese og fagocytose, er til stede. Ifølge vores sekventerings-, WB- og PCR-resultater bærer denne cellelinje en BRAF V600E-mutation. Cellerne er N-Ras-vildtype.
Væv
Hud
Sygdom
Modermærkekræft
Metastasested
Lymfekanal i brystkassen
Synonymer
  • SK-Mel-1
  • SK Mel 1
  • SK-Mel 1
  • SK-Mel1
  • SKMEL-1
  • SkMEL-1
  • SKMEL1
  • SK 1

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Affjedring
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Sfærisk
Tumorfremkaldende
Yeees, i nøgne mus. Danner pigmenterede maligne melanomer. Danner også tumorer i kindposen hos kortisonbehandlede hamstere

04Identifikatorer

Kildehenvisning
SK-MEL-1 (Cytion katalognummer 300424)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0068

05Udtryk og modtagelighed

Antigenudtryk
Blodtype A, Rh+. Antistof mod denne linje blev påvist hos 63 % af patienterne med malignt melanom og hos 10 % af patienterne med andre sygdomme.
Isoenzymer
PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B,
Mutationsprofil
V600E-type BRAF-mutation blev bestemt ved hjælp af DNA-baserede metoder (sekventering, RT-PCR) og proteinbaserede metoder (Western Blot)
Produkter
Melanin

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,1 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Supplér mediet med 15 % varmeinaktiveret FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Vedligehold kulturerne ved regelmæssigt at tilføje eller udskifte mediet. Start kulturerne med en tæthed på 5 x 105 celler/ml og hold cellekoncentrationen inden for området 3 x 105 til 1 x 106 celler/ml for optimal vækst.
Såtæthed
1 til 2 x 105 celler/ml
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
29 år
Etnisk tilhørsforhold
Kaukasisk