- Tessuto
- La pelle
- Malattia
- Melanoma
- Sito metastatico
- Dotto linfatico toracico
- Sinonimi
- SK-Mel-1, SK Mel 1, SK-Mel 1, SK-Mel1, SKMEL-1, SkMEL-1, SKMEL1, SK 1
Documenti
SK-MEL-1
Cell line · Codice prodotto 300424
This cell line was established in 1966 by F. Oettgen and associates using cells from the thoracic duct of a patient. Pigment granules relating both to synthe...
Personalizzazione / Suggerimenti
- SK-MEL-1Cell line€550.00
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01Informazioni generali
- Descrizione
- Questa linea cellulare è stata creata nel 1966 da F. Oettgen e collaboratori utilizzando cellule provenienti dal dotto toracico di un paziente. Sono presenti granuli di pigmento relativi sia alla sintesi che alla fagocitosi. Secondo i risultati del sequenziamento, del WB e della PCR, questa linea cellulare è portatrice di una mutazione BRAF V600E. Le cellule sono N-Ras wildtype.
- Tessuto
- La pelle
- Malattia
- Melanoma
- Sito metastatico
- Dotto linfatico toracico
- Sinonimi
- SK-Mel-1
- SK Mel 1
- SK-Mel 1
- SK-Mel1
- SKMEL-1
- SkMEL-1
- SKMEL1
- SK 1
02Classificazione
- Organismo
- Umano
- Sesso
- Maschio
- Proprietà di crescita
- Sospensione
- Livello di biosicurezza
- 1
03Caratteristiche
- Morfologia
- Sferico
- Tumorigenico
- Sì, in topi nudi. Forma melanomi pigmentati maligni. Forma anche tumori nella tasca della guancia di criceti trattati con cortisone
04Identificatori
- Riferimento bibliografico
- SK-MEL-1 (numero di catalogo Cytion 300424)
- Codice fiscale NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0068
05Espressione e suscettibilità
- Espressione dell'antigene
- Gruppo sanguigno A, Rh+. Gli anticorpi di questa linea sono stati rilevati nel 63% dei pazienti con melanoma maligno e nel 10% dei pazienti con altre malattie.
- Isoenzimi
- PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B,
- Profilo mutazionale
- La mutazione BRAF di tipo V600E è stata determinata con metodi basati sul DNA (sequenziamento, RT-PCR) e sulle proteine (Western Blot)
- Prodotti
- Melanina
06Manipolazione e coltura
- Terreno di coltura
- RPMI 1640, w: 2,1 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
- Atmosfera di incubazione
37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.
- Integratori
- Integrare il terreno di coltura con il 15% di FBS inattivata termicamente
- Reagente di dissociazione
- Accutase
- Subcoltura
- Mantenere le colture aggiungendo o sostituendo periodicamente il terreno. Avviare le colture con una densità di 5 x 105 cellule/ml e mantenere la concentrazione cellulare compresa tra 3 x 105 e 1 x 106 cellule/ml per una crescita ottimale.
- Densità di semina
- Da 1 a 2 x 105 cellule/mL
- Rinnovo dei fluidi
- da 2 a 3 volte alla settimana
- Scongelamento e coltura
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Controllo di qualità e crioconservazione
- Sterilità
La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.
Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.
- Terreno di coltura congelato
- Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
- Condizioni di conservazione
Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.
- Condizioni di spedizione
Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.
08Donatore
- Età dei donatori
- 29 anni
- Etnia
- Caucasico
09Aspetti legali e di sicurezza
- Misure di sicurezza
- Quando si prevede di conservare una crioviale in azoto liquido per un futuro scongelamento, è obbligatorio attenersi a rigorose misure di sicurezza. Guanti e indumenti protettivi appropriati sono essenziali e l'uso di una maschera facciale o di occhiali di sicurezza è richiesto durante il trasferimento dei campioni congelati da o verso il serbatoio di azoto liquido. Questo per ridurre il rischio di lesioni dovute a potenziali esplosioni di crioviali al momento della rimozione, che possono provocare la proiezione di frammenti taglienti.
- Garanzia
Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto
Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia
- È richiesto un accordo di trasferimento di materiale
- Sì
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