الانتقال إلى المحتوى
SK-MEL-1
الأنسجة
البشرة
المرض
الورم الميلانيني
موقع الانتشار
القناة اللمفاوية الصدرية
المرادفات
SK-Mel-1, SK Mel 1, SK-Mel 1, SK-Mel1, SKMEL-1, SkMEL-1, SKMEL1, SK 1

المستندات

SK-MEL-1

Cell line · رقم المنتج 300424

This cell line was established in 1966 by F. Oettgen and associates using cells from the thoracic duct of a patient. Pigment granules relating both to synthe...

€550.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف
تم تأسيس هذا الخط الخلوي في عام 1966 على يد ف. أوتجن وزملائه باستخدام خلايا من القناة الصدرية لأحد المرضى. توجد حبيبات صبغية تتعلق بكل من التخليق والبلعمة. وفقاً لنتائج التسلسل، ونتائج WB و PCR، فإن هذا الخط الخلوي يحمل طفرة BRAF V600E. الخلايا من النوع البري N-Ras.
الأنسجة
البشرة
المرض
الورم الميلانيني
موقع الانتشار
القناة اللمفاوية الصدرية
المرادفات
  • SK-Mel-1
  • SK Mel 1
  • SK-Mel 1
  • SK-Mel1
  • SKMEL-1
  • SkMEL-1
  • SKMEL1
  • SK 1

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
ذكر
خصائص النمو
التعليق
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
كروي
مُسبِّب للأورام
نعم، في الفئران العارية. يُكوِّن أورام ميلانينية خبيثة مصطبغة. وتشكل أيضاً أوراماً في كيس الخد لدى الهامستر المعالج بالكورتيزون

04المعرّفات

المرجع
SK-MEL-1 (الرقم الكتالوجي لسيتيون 300424)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_0068

05التعبير والقابلية للإصابة

التعبير عن المستضد
فصيلة الدم A، Rh+. تم اكتشاف الأجسام المضادة لهذا الخط في 63% من المرضى المصابين بالورم الميلانيني الخبيث وفي 10% من المرضى المصابين بأمراض أخرى.
الإيزوزيمات
خ ع م 3، 1، خ ع م 1، خ ع م 1، خ ع م 1، خ ع م 1، خ ع م 1، خ ع م 1، خ ع 6، خ ع 6، خ ع 6، خ ع
الأنماط الطفريّة
تم تحديد طفرة BRAF من النوع V600E بالطرق القائمة على الحمض النووي (التسلسل، والتفاعل البوليمتري التكراري التسلسلي (RT-PCR) والطرق القائمة على البروتين (لطخة ويسترن بلوت)
المنتجات
الميلانين

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
RPMI 1640، ث: 2.1 مللي مولار جلوتامين مستقر، ث: 2.0 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820700a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
دعم الوسط ب 15٪ من FBS المعطل بالحرارة
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
حافظ على الثقافات عن طريق إضافة أو استبدال الوسط بشكل دوري. ابدأ الثقافات بكثافة 5 × 105 خلية/مل وحافظ على تركيز الخلايا في نطاق 3 × 105 إلى 1 × 106 خلية/مل لتحقيق النمو الأمثل.
كثافة البذر
1 إلى 2 × 105 خلية/مل
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
29 سنة
الأصل العرقي
قوقازي