Премини към съдържанието
SK-MEL-1
Тъкан
Кожа
Заболяване
Меланома
Място на метастазите
Торакален лимфен канал
Синоними
SK-Mel-1, SK Mel 1, SK-Mel 1, SK-Mel1, SKMEL-1, SkMEL-1, SKMEL1, SK 1

Документи

SK-MEL-1

Cell line · Номер на продукта 300424

This cell line was established in 1966 by F. Oettgen and associates using cells from the thoracic duct of a patient. Pigment granules relating both to synthe...

€550.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание
Тази клетъчна линия е създадена през 1966 г. от F. Oettgen и сътрудници, като са използвани клетки от гръдния канал на пациент. Налице са пигментни гранули, свързани както със синтеза, така и с фагоцитозата. Според нашите резултати от секвенирането, WB и PCR тази клетъчна линия носи мутация BRAF V600E. Клетките са от див тип N-Ras.
Тъкан
Кожа
Заболяване
Меланома
Място на метастазите
Торакален лимфен канал
Синоними
  • SK-Mel-1
  • SK Mel 1
  • SK-Mel 1
  • SK-Mel1
  • SKMEL-1
  • SkMEL-1
  • SKMEL1
  • SK 1

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Мъж
Свойства, свързани с растежа
Окачване
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Сферични
Туморогенен
Да, при голи мишки. Образува пигментирани малигнени меланоми. Образува тумори и в бузите на третирани с кортизон хамстери

04Идентификатори

Източник
SK-MEL-1 (каталожен номер 300424 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_0068

05Проява и предразположеност

Експресия на антигена
Кръвна група А, Rh+. Антитела към тази линия са открити при 63% от пациентите с малигнен меланом и при 10% от пациентите с други заболявания.
Изоензими
PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B,
Мутационен профил
Мутацията на BRAF тип V600E е определена чрез ДНК методи (секвениране, RT-PCR) и протеинови методи (Western Blot)
Продукти
Меланин

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
RPMI 1640, w: 2,1 mM стабилен глутамин, w: 2,0 g/L NaHCO3 (номер на статията в Cytion 820700a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 15 % топлинно инактивиран FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Поддържайте културите, като периодично добавяте или подменяте средата. Започнете културите с плътност 5 x 105 клетки/ml и поддържайте концентрацията на клетките в диапазона от 3 x 105 до 1 x 106 клетки/ml за оптимален растеж.
Плътност на засяването
1 до 2 x 105 клетки/мл
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
29 години
Етническа принадлежност
Кавказки