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SK-MEL-1
Tissue
Pele
Disease
Melanoma
Metastatic site
Duto linfático torácico
Synonyms
SK-Mel-1, SK Mel 1, SK-Mel 1, SK-Mel1, SKMEL-1, SkMEL-1, SKMEL1, SK 1

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SK-MEL-1

Cell line · Product number 300424

This cell line was established in 1966 by F. Oettgen and associates using cells from the thoracic duct of a patient. Pigment granules relating both to synthe...

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description
Essa linhagem celular foi estabelecida em 1966 por F. Oettgen e colaboradores, utilizando células do ducto torácico de um paciente. Estão presentes grânulos de pigmento relacionados tanto à síntese quanto à fagocitose. De acordo com nossos resultados de sequenciamento, WB e PCR, essa linhagem celular apresenta uma mutação BRAF V600E. As células são do tipo selvagem para N-Ras.
Tissue
Pele
Disease
Melanoma
Metastatic site
Duto linfático torácico
Synonyms
  • SK-Mel-1
  • SK Mel 1
  • SK-Mel 1
  • SK-Mel1
  • SKMEL-1
  • SkMEL-1
  • SKMEL1
  • SK 1

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Suspension
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Esférico
Tumourigenic
Sim, em camundongos nude. Provoca melanomas malignos pigmentados. Também provoca tumores na bolsa bucal de hamsters tratados com cortisona

04Identifiers

Citation
SK-MEL-1 (número de catálogo da Cytion 300424)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0068

05Expression and susceptibility

Antigen expression
Tipo sanguíneo A, Rh+. Foram detectados anticorpos contra essa linhagem em 63% dos pacientes com melanoma maligno e em 10% dos pacientes com outras doenças.
Isoenzymes
PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B,
Mutational profile
A mutação no gene BRAF do tipo V600E foi determinada por meio de métodos baseados em DNA (sequenciamento, RT-PCR) e métodos baseados em proteínas (Western Blot)
Products
Melanina

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, contendo 2,1 mM de glutamina estável e 2,0 g/L de NaHCO₃ (número de artigo da Cytion: 820700a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

Supplements
Adicione ao meio 15% de FBS inativado por calor
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Mantenha as culturas adicionando ou substituindo periodicamente o meio. Inicie as culturas com uma densidade de 5 x 10⁵ células/ml e mantenha a concentração celular dentro do intervalo de 3 x 10⁵ a 1 x 10⁶ células/ml para um crescimento ideal.
Seeding density
1 a 2 × 10⁵ células/mL
Fluid renewal
2 a 3 vezes por semana
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Freeze medium
Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
Storage conditions

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

Shipping conditions

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

08Donor

Donor age
29 anos
Ethnicity
caucasiano