Skip to content
SK-MEL-1
Tissue
ผิวหนัง
Disease
เมลาโนมา
Metastatic site
ท่อน้ำเหลืองทรวงอก
Synonyms
SK-Mel-1, SK Mel 1, SK-Mel 1, SK-Mel1, SKMEL-1, SkMEL-1, SKMEL1, SK 1

Documents

SK-MEL-1

Cell line · Product number 300424

This cell line was established in 1966 by F. Oettgen and associates using cells from the thoracic duct of a patient. Pigment granules relating both to synthe...

€550.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description
เซลล์ไลน์นี้ถูกสร้างขึ้นในปี 1966 โดย F. Oettgen และคณะ โดยใช้เซลล์จากท่อน้ำเหลืองส่วนอกของผู้ป่วย พบเม็ดสีที่เกี่ยวข้องทั้งกับการสังเคราะห์และการฟาโกไซโตซิส จากการเรียงลำดับพันธุกรรม ผล WB และ PCR พบว่าเซลล์ไลน์นี้มีกลายพันธุ์ BRAF V600E เซลล์เป็นชนิด N-Ras wildtype
Tissue
ผิวหนัง
Disease
เมลาโนมา
Metastatic site
ท่อน้ำเหลืองทรวงอก
Synonyms
  • SK-Mel-1
  • SK Mel 1
  • SK-Mel 1
  • SK-Mel1
  • SKMEL-1
  • SkMEL-1
  • SKMEL1
  • SK 1

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Suspension
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ทรงกลม
Tumourigenic
ใช่ ในหนูที่ไม่มีขน สามารถก่อให้เกิดมะเร็งเมลาโนมาชนิดมีสีได้ นอกจากนี้ยังก่อให้เกิดเนื้องอกในกระพุ้งแก้มของหนูแฮมสเตอร์ที่ได้รับการรักษาด้วยคอร์ติโซน

04Identifiers

Citation
SK-MEL-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300424)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0068

05Expression and susceptibility

Antigen expression
กรุ๊ปเลือด A, Rh+ พบแอนติบอดีต่อเส้นนี้ในผู้ป่วยที่เป็นมะเร็งผิวหนังชนิดเมลาโนมา 63% และในผู้ป่วยที่เป็นโรคอื่น ๆ 10%
Isoenzymes
PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B,
Mutational profile
การกลายพันธุ์ของ BRAF ประเภท V600E ถูกกำหนดโดยวิธีการที่ใช้ DNA (การหาลำดับ, RT-PCR) และวิธีการที่ใช้โปรตีน (Western Blot)
Products
เมลานิน

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.1 mM กลูตามีนเสถียร, w: 2.0 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS ที่ทำให้ไม่มีความสามารถในการติดเชื้อด้วยความร้อน 15%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
รักษาวัฒนธรรมโดยการเติมหรือเปลี่ยนอาหารเลี้ยงเชื้อเป็นระยะๆ เริ่มต้นวัฒนธรรมด้วยความหนาแน่น 5 x 105 เซลล์/มล. และรักษาความเข้มข้นของเซลล์ให้อยู่ในช่วง 3 x 105 ถึง 1 x 106 เซลล์/มล. เพื่อการเจริญเติบโตที่ดีที่สุด
Seeding density
1 ถึง 2 x 10⁵ เซลล์/มิลลิลิตร
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
29 ปี
Ethnicity
คอเคเชียน