Prejsť na obsah
SK-MEL-1
Tkanivo
Koža
Choroba
Melanóm
Miesto metastáz
Hrudný lymfatický kanál
Synonymá
SK-Mel-1, SK Mel 1, SK-Mel 1, SK-Mel1, SKMEL-1, SkMEL-1, SKMEL1, SK 1

Dokumenty

SK-MEL-1

Cell line · Číslo výrobku 300424

This cell line was established in 1966 by F. Oettgen and associates using cells from the thoracic duct of a patient. Pigment granules relating both to synthe...

€550.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis
Túto bunkovú líniu vytvoril v roku 1966 F. Oettgen a jeho spolupracovníci s použitím buniek z hrudného kanála pacienta. Prítomné sú pigmentové granule súvisiace so syntézou aj fagocytózou. Podľa našich výsledkov sekvenovania, WB a PCR nesie táto bunková línia mutáciu BRAF V600E. Bunky sú divokého typu N-Ras.
Tkanivo
Koža
Choroba
Melanóm
Miesto metastáz
Hrudný lymfatický kanál
Synonymá
  • SK-Mel-1
  • SK Mel 1
  • SK-Mel 1
  • SK-Mel1
  • SKMEL-1
  • SkMEL-1
  • SKMEL1
  • SK 1

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Zavesenie
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Sférické
Tumorigenický
Áno, na nahých myšiach. Vytvára pigmentované malígne melanómy. Tvorí tiež nádory v lícnom vrecku škrečkov liečených kortizónom

04Identifikátory

Citácia
SK-MEL-1 (katalógové číslo Cytion 300424)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0068

05Prejav a náchylnosť

Expresia antigénu
Krvná skupina A, Rh+. Protilátky proti tejto línii boli zistené u 63 % pacientov s malígnym melanómom a u 10 % pacientov s inými ochoreniami.
Izoenzýmy
PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B,
Mutčný profil
Mutácia typu V600E BRAF bola stanovená metódami založenými na DNA (sekvenovanie, RT-PCR) a metódami založenými na proteínoch (Western Blot)
Produkty
Melanín

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
RPMI 1640, w: 2,1 mM stabilný glutamín, w: 2,0 g/L NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 15 % tepelne inaktivovaného FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Kultúry udržiavajte pravidelným pridávaním alebo výmenou média. Kultúry začnite s hustotou 5 x 105 buniek/ml a pre optimálny rast udržujte koncentráciu buniek v rozmedzí 3 x 105 až 1 x 106 buniek/ml.
Hustota výsevu
1 až 2 x 105 buniek/ml
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
29 rokov
Etnická príslušnosť
Kaukazský