Přejít na obsah
SK-MEL-1
Tkáň
Kůže
Nemoc
Melanom
Místo metastázy
Hrudní lymfatický kanál
Synonyma
SK-Mel-1, SK Mel 1, SK-Mel 1, SK-Mel1, SKMEL-1, SkMEL-1, SKMEL1, SK 1

Dokumenty

SK-MEL-1

Cell line · Číslo výrobku 300424

This cell line was established in 1966 by F. Oettgen and associates using cells from the thoracic duct of a patient. Pigment granules relating both to synthe...

€550.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis
Tuto buněčnou linii vytvořil v roce 1966 F. Oettgen a jeho spolupracovníci na základě buněk z hrudního kanálu pacienta. Jsou přítomna pigmentová granula související se syntézou i fagocytózou. Podle našich výsledků sekvenování, WB a PCR nese tato buněčná linie mutaci BRAF V600E. Buňky jsou divokého typu N-Ras.
Tkáň
Kůže
Nemoc
Melanom
Místo metastázy
Hrudní lymfatický kanál
Synonyma
  • SK-Mel-1
  • SK Mel 1
  • SK-Mel 1
  • SK-Mel1
  • SKMEL-1
  • SkMEL-1
  • SKMEL1
  • SK 1

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Odpružení
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Sférické
Tumorogenní
Ano, na nahých myších. Tvoří pigmentované maligní melanomy. Tvoří také nádory v lícním vaku křečků léčených kortizonem

04Identifikátory

Citace
SK-MEL-1 (katalogové číslo Cytion 300424)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0068

05Exprese a náchylnost

Exprese antigenu
Krevní skupina A, Rh+. Protilátky proti této linii byly zjištěny u 63 % pacientů s maligním melanomem a u 10 % pacientů s jinými chorobami.
Isoenzymy
PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B,
Mutační profil
Mutace V600E typu BRAF byla stanovena metodami založenými na DNA (sekvenování, RT-PCR) a metodami založenými na proteinech (Western Blot)
Produkty
Melanin

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
RPMI 1640, w: 2,1 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 15 % tepelně inaktivovaného FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Kultury udržujte pravidelným přidáváním nebo výměnou média. Zahajte kultury s hustotou 5 x 105 buněk/ml a pro optimální růst udržujte koncentraci buněk v rozmezí 3 x 105 až 1 x 106 buněk/ml.
Hustota výsevu
1 až 2 x 105 buněk/ml
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
29 let
Etnická příslušnost
Kavkazský