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SK-MEL-1
Tissu
Peau
Maladie
Mélanome
Site métastatique
Canal lymphatique thoracique
Synonymes
SK-Mel-1, SK Mel 1, SK-Mel 1, SK-Mel1, SKMEL-1, SkMEL-1, SKMEL1, SK 1

Documents

SK-MEL-1

Cell line · Référence du produit 300424

This cell line was established in 1966 by F. Oettgen and associates using cells from the thoracic duct of a patient. Pigment granules relating both to synthe...

€550.00hors taxes et frais de port

Personnalisation / Recommandations

En stock
Lot
Recommandé (lot le plus récent)
  • CoA
1

01Informations générales

Description
Cette lignée cellulaire a été établie en 1966 par F. Oettgen et ses collaborateurs à partir de cellules provenant du canal thoracique d'un patient. Des granules pigmentaires liés à la fois à la synthèse et à la phagocytose sont présents. D'après nos résultats de séquençage, de WB et de PCR, cette lignée cellulaire est porteuse d'une mutation BRAF V600E. Les cellules sont de type N-Ras sauvage.
Tissu
Peau
Maladie
Mélanome
Site métastatique
Canal lymphatique thoracique
Synonymes
  • SK-Mel-1
  • SK Mel 1
  • SK-Mel 1
  • SK-Mel1
  • SKMEL-1
  • SkMEL-1
  • SKMEL1
  • SK 1

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Homme
Propriétés de croissance
Suspension
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
Sphérique
Tumorigène
Oui, sur des souris nues. Forme des mélanomes malins pigmentés. Forme également des tumeurs dans la poche de la joue de hamsters traités à la cortisone

04Identifiants

Référence
SK-MEL-1 (numéro de catalogue Cytion 300424)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0068

05Expression et sensibilité

Expression des antigènes
Groupe sanguin A, Rh+. Des anticorps contre cette lignée ont été détectés chez 63 % des patients atteints de mélanome malin et chez 10 % des patients atteints d'autres maladies.
Isoenzymes
PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B,
Profil mutationnel
La mutation BRAF de type V600E a été déterminée par des méthodes basées sur l'ADN (séquençage, RT-PCR) et sur les protéines (Western Blot)
Produits
Mélanine

06Manipulation et culture

Milieu de culture
RPMI 1640, w : 2.1 mM Glutamine stable, w : 2.0 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820700a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 15 % de FBS inactivé à la chaleur
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Entretenez les cultures en ajoutant ou en remplaçant périodiquement le milieu. Démarrez les cultures avec une densité de 5 x 105 cellules/ml et maintenez la concentration cellulaire dans une fourchette comprise entre 3 x 105 et 1 x 106 cellules/ml pour une croissance optimale.
Densité de semis
1 à 2 x 105 cellules/mL
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Âge du donneur
29 ans
Origine ethnique
Caucasien