- Kude
- Nahk
- Haigus
- Melanoom
- Metastaaside asukoht
- Rinna lümfitee
- Sünonüümid
- SK-Mel-1, SK Mel 1, SK-Mel 1, SK-Mel1, SKMEL-1, SkMEL-1, SKMEL1, SK 1
Dokumendid
SK-MEL-1
Cell line · Toote number 300424
This cell line was established in 1966 by F. Oettgen and associates using cells from the thoracic duct of a patient. Pigment granules relating both to synthe...
Kohandamine / Soovitused
- SK-MEL-1Cell line€550.00
Soovitatav (värskeim partii)
01Üldine teave
- Kirjeldus
- See rakuliin loodi 1966. aastal F. Oettgeni ja kaaslaste poolt, kasutades ühe patsiendi rindkere rakke. Esinevad nii sünteesi kui ka fagotsütoosiga seotud pigmentgraanulid. Meie sekveneerimise, WB ja PCR tulemuste kohaselt kannab see rakuliin BRAF V600E mutatsiooni. Rakud on N-Ras metsikut tüüpi.
- Kude
- Nahk
- Haigus
- Melanoom
- Metastaaside asukoht
- Rinna lümfitee
- Sünonüümid
- SK-Mel-1
- SK Mel 1
- SK-Mel 1
- SK-Mel1
- SKMEL-1
- SkMEL-1
- SKMEL1
- SK 1
02Klassifikatsioon
- Organism
- Inimene
- Sugu
- Mees
- Kasvuvõime
- Vedrustus
- Bioloogilise ohutuse tase
- 1
03Omadused
- Morfoloogia
- Sfääriline
- Tuumorigeenne
- Jah, alasti hiirtel. Moodustab pigmenteerunud pahaloomulisi melanoomi. Moodustab kasvajad ka kortisooniga ravitud hamstritel põsepõskedes
04Tunnused
- Viide
- SK-MEL-1 (Cytioni katalooginumber 300424)
- NCBI maksukood
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0068
05Avaldumine ja vastuvõtlikkus
- Antigeeni ekspressioon
- Veregrupp A, Rh+. Antikehad selle liini suhtes tuvastati 63%-l pahaloomulise melanoomiga patsientidest ja 10%-l teiste haigustega patsientidest.
- Isoensüümid
- PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B,
- Mutatsiooniprofiil
- V600E tüüpi BRAF-mutatsioon määrati DNA-põhiste meetodite (sekveneerimine, RT-PCR) ja valgu-põhiste meetodite (Western Blot) abil
- Tooted
- Melaniin
06Käsitlemine ja kasvatamine
- Kasvatuskeskkond
- RPMI 1640, w: 2,1 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
- Inkubatsiooni keskkond
37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.
- Toidulisandid
- Täiendatakse keskkonda 15% soojusinaktiveeritud FBS-iga
- Dissotsiatsioonireaktiiv
- Accutase
- Kultuuri edasikasvatamine
- Säilitage kultuure, lisades või asendades perioodiliselt kasvukeskkonda. Alustage kultuuride kasvatamist tihedusega 5 x 105 rakku/ml ja hoidke rakkude kontsentratsioon vahemikus 3 x 105 kuni 1 x 106 rakku/ml optimaalse kasvu tagamiseks.
- Külvitihedus
- 1 kuni 2 x 105 rakku/ml
- Vedeliku vahetus
- 2 kuni 3 korda nädalas
- Sulatamine ja kasvatamine
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine
- Viljatus
Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.
Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.
- Külmutuskeskkond
- Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
- Säilitamistingimused
Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.
- Tarne- ja kohaletoimetamistingimused
Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
08Annetaja
- Doonori vanus
- 29 aastat
- Etniline kuuluvus
- Kaukaasia
09Õiguslikud ja ohutusalased küsimused
- Ohutusnõuded
- Kui plaanitakse krüoviaalide säilitamist vedelas lämmastikus tulevase sulatamise eesmärgil, on kohustuslik järgida rangeid ohutusmeetmeid. Asjakohased kaitsekindad ja -riietus on hädavajalikud ning külmutatud proovide vedela lämmastiku mahutisse või mahutist väljaviimisel tuleb kasutada näomaski või kaitseprille. See on vajalik selleks, et vähendada vigastuste ohtu, mis tuleneb võimalikest krüoviaalide plahvatustest eemaldamisel, mille tagajärjel võivad välja paiskuda teravad killud.
- Garantii
Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele
Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest
- Vajalik on materjalide üleandmise leping
- Jah
.jpg)
