Gå til innholdet
SK-MEL-1
Vev
Hud
Sykdom
Melanom
Metastaseområde
Lymfekanal i thorax
Synonymer
SK-Mel-1, SK Mel 1, SK-Mel 1, SK-Mel1, SKMEL-1, SkMEL-1, SKMEL1, SK 1

Dokumenter

SK-MEL-1

Cell line · Produktnummer 300424

This cell line was established in 1966 by F. Oettgen and associates using cells from the thoracic duct of a patient. Pigment granules relating both to synthe...

€550.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse
Denne cellelinjen ble etablert i 1966 av F. Oettgen og medarbeidere ved hjelp av celler fra thoraxkanalen til en pasient. Pigmentgranuler knyttet både til syntese og fagocytose er til stede. I henhold til våre sekvenserings-, WB- og PCR-resultater bærer denne cellelinjen en BRAF V600E-mutasjon. Cellene er N-Ras villtype.
Vev
Hud
Sykdom
Melanom
Metastaseområde
Lymfekanal i thorax
Synonymer
  • SK-Mel-1
  • SK Mel 1
  • SK-Mel 1
  • SK-Mel1
  • SKMEL-1
  • SkMEL-1
  • SKMEL1
  • SK 1

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Oppheng
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Sfærisk
Tumorinduserende
Ja, i nakne mus. Danner pigmenterte maligne melanomer. Danner også svulster i kinnposen hos kortisonbehandlede hamstere

04Identifikatorer

Kildehenvisning
SK-MEL-1 (Cytion-katalognummer 300424)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0068

05Uttrykk og mottakelighet

Antigenuttrykk
Blodtype A, Rh+. Antistoff mot denne linjen ble påvist hos 63 % av pasientene med malignt melanom og hos 10 % av pasientene med andre sykdommer.
Isoenzymer
PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B,
Mutasjonsprofil
V600E-type BRAF-mutasjon ble bestemt ved hjelp av DNA-baserte metoder (sekvensering, RT-PCR) og proteinbaserte metoder (Western Blot)
Produkter
Melanin

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,1 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820700a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Tilsett 15 % varmeinaktivert FBS i mediet
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Oppretthold kulturene ved å tilsette eller skifte ut mediet med jevne mellomrom. Start kulturene med en tetthet på 5 x 105 celler/ml og hold cellekonsentrasjonen innenfor området 3 x 105 til 1 x 106 celler/ml for optimal vekst.
Såtetthet
1 til 2 x 105 celler/ml
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
29 år
Etnisitet
Kaukasisk