Langsung ke isi
SK-MEL-1
Tisu
Kulit
Penyakit
Melanoma
Lokasi metastasis
Saluran getah bening toraks
Sinonim
SK-Mel-1, SK Mel 1, SK-Mel 1, SK-Mel1, SKMEL-1, SkMEL-1, SKMEL1, SK 1

SK-MEL-1

Cell line · Nomor produk 300424

This cell line was established in 1966 by F. Oettgen and associates using cells from the thoracic duct of a patient. Pigment granules relating both to synthe...

€550.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim
Tersedia
Lot
Direkomendasikan (stok terbaru)
  • CoA
1

01Informasi umum

Deskripsi
Garis sel ini didirikan pada tahun 1966 oleh F. Oettgen dan rekannya dengan menggunakan sel dari saluran toraks pasien. Butiran pigmen yang berkaitan dengan sintesis dan fagositosis hadir. Menurut hasil pengurutan, WB dan PCR kami, garis sel ini membawa mutasi BRAF V600E. Sel adalah tipe liar N-Ras.
Tisu
Kulit
Penyakit
Melanoma
Lokasi metastasis
Saluran getah bening toraks
Sinonim
  • SK-Mel-1
  • SK Mel 1
  • SK-Mel 1
  • SK-Mel1
  • SKMEL-1
  • SkMEL-1
  • SKMEL1
  • SK 1

02Klasifikasi

Organisme
Manusia
Seks
Laki-laki
Sifat-sifat pertumbuhan
Penangguhan
Tingkat keamanan hayati
1

03Karakteristik

Morfologi
Bulat
Tumorigenik
Ya, pada tikus telanjang. Membentuk melanoma ganas berpigmen. Juga membentuk tumor di kantong pipi hamster yang diberi kortison

04Pengidentifikasi

Referensi
SK-MEL-1 (Nomor katalog Cytion 300424)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0068

05Ekspresi dan kerentanan

Ekspresi antigen
Golongan Darah A, Rh+. Antibodi terhadap garis ini terdeteksi pada 63% pasien dengan melanoma maligna dan pada 10% pasien dengan penyakit lain.
Isoenzim
PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B,
Profil mutasi
Mutasi BRAF tipe V600E ditentukan dengan metode berbasis DNA (sekuensing, RT-PCR) dan metode berbasis protein (Western Blot)
Produk
Melanin

06Penanganan dan budidaya

Media kultur
RPMI 1640, w: 2,1 mM Glutamin stabil, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Nomor artikel Cytion 820700a)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Lengkapi media dengan 15% FBS yang dinonaktifkan dengan panas
Reagen disosiasi
Accutase
Perbanyakan sel
Pertahankan kultur dengan secara berkala menambahkan atau mengganti medium. Mulailah kultur dengan kepadatan 5 x 10⁵ sel/ml dan jaga konsentrasi sel dalam rentang 3 x 10⁵ hingga 1 x 10⁶ sel/ml untuk pertumbuhan optimal.
Kepadatan penanaman
1 hingga 2 x 10⁵ sel/mL
Pergantian cairan
2 hingga 3 kali per minggu
Pencairan dan pembiakan
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

08Donatur

Usia donor
29 tahun
Etnis
Kaukasia