Przejdź do treści
SK-MEL-1
Chusteczka
Skóra
Choroba
Czerniak
Miejsce przerzutów
Przewód limfatyczny klatki piersiowej
Synonimy
SK-Mel-1, SK Mel 1, SK-Mel 1, SK-Mel1, SKMEL-1, SkMEL-1, SKMEL1, SK 1

Dokumenty

SK-MEL-1

Cell line · Numer produktu 300424

This cell line was established in 1966 by F. Oettgen and associates using cells from the thoracic duct of a patient. Pigment granules relating both to synthe...

€550.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis
Ta linia komórkowa została utworzona w 1966 r. przez F. Oettgena i współpracowników przy użyciu komórek z przewodu piersiowego pacjenta. Obecne są granulki pigmentu związane zarówno z syntezą, jak i fagocytozą. Zgodnie z naszymi wynikami sekwencjonowania, WB i PCR ta linia komórkowa jest nosicielem mutacji BRAF V600E. Komórki są typu dzikiego N-Ras.
Chusteczka
Skóra
Choroba
Czerniak
Miejsce przerzutów
Przewód limfatyczny klatki piersiowej
Synonimy
  • SK-Mel-1
  • SK Mel 1
  • SK-Mel 1
  • SK-Mel1
  • SKMEL-1
  • SkMEL-1
  • SKMEL1
  • SK 1

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zawieszenie
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Kulisty
Nowotworotwórczy
Tak, u nagich myszy. Tworzy barwnikowe czerniaki złośliwe. Tworzy również guzy w worku policzkowym chomików leczonych kortyzonem

04Identyfikatory

Źródło
SK-MEL-1 (numer katalogowy Cytion 300424)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0068

05Ekspresja i podatność

Ekspresja antygenu
Grupa krwi A, Rh+. Przeciwciała przeciwko tej linii wykryto u 63% pacjentów z czerniakiem złośliwym i u 10% pacjentów z innymi chorobami.
Izoenzymy
PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B,
Profil mutacji
Mutację BRAF typu V600E określono metodami opartymi na DNA (sekwencjonowanie, RT-PCR) i metodami opartymi na białkach (Western Blot)
Produkty
Melanina

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,1 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże o 15% FBS inaktywowanego termicznie
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Kultury należy utrzymywać poprzez okresowe dodawanie lub wymianę pożywki. Kultury należy rozpocząć od gęstości 5 x 105 komórek/ml i utrzymywać stężenie komórek w zakresie od 3 x 105 do 1 x 106 komórek/ml, aby zapewnić optymalny wzrost.
Gęstość wysiewu
1 do 2 x 105 komórek/ml
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
29 lat
Pochodzenie etniczne
Kaukaski