PT-67

קו התאים PT-67 הוא קו תאים עוטפים לרטרו-וירוס עכברי, הנמצא בשימוש נפוץ לייצור וקטורים רטרו-וירוסיים למטרות העברת גנים. קו התאים PT-67, שמקורו בתאי NIH 3T3, מבטא חלבוני מבנה ויראליים וחלבוני מעטפת הנחוצים להרכבת חלקיקים רטרו-וירוסיים. יש לציין כי קו תאים זה מותאם לייצור וקטורים בעלי פסאודוטיפ של חלבון המעטפת של נגיף לוקמיה עכברי 10A1 (MLV), המאפשר כניסה לתאים באמצעות קולטנים מרובים של חלבוני הובלת פוספט, לרבות קולטן נגיף לוקמיה של קוף הגיבון (Glvr-1 או Pit-1) והקולטן האמפוטרופי Ram-1 (Pit-2).

המאפיין הייחודי של תאי האריזה PT-67 טמון ביכולתו של חלבון המעטפת 10A1 לנצל הן את קולטני Glvr-1 והן את קולטני Ram-1. ספציפיות כפולה זו לקולטנים מרחיבה באופן משמעותי את טווח המארחים של וקטורים רטרו-ויראליים המיוצרים על ידי PT-67, מה שהופך אותו ליתרון בהעברת גנים למגוון סוגי תאים בין מינים, כולל תאי אדם, עכבר וחולדה. לדוגמה, הווקטורים הרטרו-ויראליים בעלי הפסאודוטיפ 10A1 יכולים להעביר ביעילות תאי NIH 3T3 של עכברים ופיברובלסטים אנושיים על ידי ניצול קולטנים אלה. עם זאת, דפוסי השימוש בקולטנים הם ספציפיים למין ולרקמה, כפי שנצפה במחקרים שבהם וקטורים מסוג 10A1 עם פסאודוטיפ עושים שימוש יעיל ב-Ram-1 אך מפגינים יעילות משתנה עם Glvr-1 בקווי תאים שונים של בני אדם ומכרסמים.

וקטורים רטרו-ויראליים המיוצרים באמצעות תאי PT-67 נקיים מווירוסי עזר, מה שמבטיח בטיחות ויעילות בניסויי העברת גנים. דבר זה הופך את PT-67 לכלי בעל ערך להעברת גנים יציבה ביישומים ניסיוניים וטיפוליים, במיוחד כאשר נדרשת העברה לטווח רחב של מארחים. הפיתוח והאופטימיזציה של תאי האריזה PT-67 סייעו לקידום הטיפול הגנטי, ומאפשרים העברת גנים טיפוליים לתאי היעד עם ספציפיות ויעילות משופרות.

37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.

לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו