PT-67

PT-67細胞株は、遺伝子導入用のレトロウイルスベクターの作製に一般的に使用される、マウスレトロウイルスパッケージング細胞株です。NIH 3T3細胞から作製されたPT-67は、レトロウイルス粒子の組み立てに必要なウイルスの構造タンパク質およびエンベロープタンパク質を発現します。 特に、この細胞株は、10A1マウス白血病ウイルス（MLV）のエンベロープタンパク質で偽型化されたベクターの生産に最適化されており、これにより、ギボン白血病ウイルス受容体（Glvr-1またはPit-1）や汎トロピック受容体Ram-1 （Pit-2）を含む複数のリン酸輸送タンパク質受容体を介して細胞内へ侵入することが可能になります。

PT-67 パッケージング細胞のユニークな特徴は、10A1 エンベロープタンパク質が Glvr-1 および Ram-1 受容体の両方を利用できる点にあります。 この二重の受容体特異性により、PT-67 によって産生されるレトロウイルスベクターの宿主範囲が大幅に拡大し、ヒト、マウス、ラットの細胞など、種を超えたさまざまな細胞タイプへの導入に有利となります。 例えば、10A1 偽型レトロウイルスベクターは、これらの受容体を活用することで、マウス NIH 3T3 細胞やヒト線維芽細胞を効率的に形質導入することができます。 しかし、受容体の利用パターンは種や組織によって異なり、10A1 偽型ベクターが Ram-1 を効率的に利用する一方で、さまざまなヒトおよび齧歯類の細胞株において Glvr-1 に対する効率にばらつきが見られることが、研究で観察されています。

PT-67 細胞を用いて作製されたレトロウイルスベクターは、ヘルパーウイルスを含まないため、遺伝子導入実験における安全性と効率が確保されます。これにより、PT-67 は、特に幅広い宿主範囲でのトランスダクションが求められる実験および治療用途において、安定した遺伝子導入のための貴重なツールとなっています。 PT-67パッキング細胞の開発と最適化は、遺伝子治療の進歩を促進し、標的細胞への治療用遺伝子の導入において、特異性と効率の向上を実現している。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。