PT-67

Клітинна лінія PT-67 — це мишача клітинна лінія-упаковщик ретровірусів, яка зазвичай використовується для виробництва ретровірусних векторів з метою доставки генів. Похідна від клітин NIH 3T3, лінія PT-67 експресує вірусні структурні білки та білки оболонки, необхідні для складання ретровірусних частинок. Варто зазначити, що вона оптимізована для виробництва векторів, псевдотипованих білком оболонки мишачого лейкемічного вірусу (MLV) 10A1, що забезпечує проникнення в клітини за допомогою декількох рецепторів фосфатно-транспортних білків, зокрема рецептора вірусу лейкемії гібона (Glvr-1 або Pit-1) та амфотропного рецептора Ram-1 (Pit-2).

Унікальна особливість клітин-пакувальників PT-67 полягає у здатності білка оболонки 10A1 використовувати як рецептори Glvr-1, так і Ram-1. Ця подвійна рецепторна специфічність значно розширює спектр клітин-господарів ретровірусних векторів, що продукуються PT-67, що робить їх привабливими для трансдукції різноманітних типів клітин різних видів, включаючи клітини людини, мишей та щурів. Наприклад, ретровірусні вектори, псевдотиповані 10A1, можуть ефективно трансдукувати мишачі клітини NIH 3T3 та людські фібробласти завдяки використанню цих рецепторів. Однак особливості використання рецепторів залежать від виду та типу тканини, що було підтверджено в дослідженнях, де вектори, псевдотиповані 10A1, ефективно використовують Ram-1, але демонструють різну ефективність щодо Glvr-1 у різних лініях клітин людини та гризунів.

Ретровірусні вектори, отримані з використанням клітин PT-67, не містять допоміжних вірусів, що забезпечує безпеку та ефективність експериментів з перенесення генів. Це робить PT-67 цінним інструментом для стабільної доставки генів у експериментальних та терапевтичних цілях, особливо там, де потрібна трансдукція з широким спектром хазяїв. Розробка та оптимізація пакувальних клітин PT-67 сприяли прогресу в генній терапії, уможлививши доставку терапевтичних генів у клітини-мішені з підвищеною специфічністю та ефективністю.

37°C, 5% _CO2, волога атмосфера.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

У Cytion ми відповідаємо за якість та життєздатність нашої продукції. Ми гарантуємо, що наші клітини будуть життєздатними на початку культивування протягом 60 днів після відвантаження з нашого заводу. Ми запевняємо, що всі матеріали відповідають специфікаціям, описаним у сертифікаті аналізу та/або паспорті продукту

Для отримання більш детальної інформації, будь ласка, зверніться до нашого <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Заяви про гарантію</a>