PT-67

سلسلة الخلايا PT-67 هي سلسلة خلايا تعبئة للفيروسات الرجعية الفئرانية تُستخدم عادةً لإنتاج ناقلات فيروسية رجعية لأغراض نقل الجينات. وقد اشتقت هذه السلسلة من خلايا NIH 3T3، وتُعبِّر PT-67 عن البروتينات الهيكلية الفيروسية وبروتينات الغلاف الضرورية لتجميع جسيمات الفيروسات الرجعية. والجدير بالذكر أنه تم تحسينه لإنتاج ناقلات مزيفة النوع باستخدام بروتين الغلاف لفيروس اللوكيميا الفئراني 10A1 (MLV)، مما يتيح دخول الخلايا باستخدام مستقبلات متعددة لبروتينات نقل الفوسفات، بما في ذلك مستقبل فيروس اللوكيميا لدى قرد الجيبون (Glvr-1 أو Pit-1) والمستقبل الأمفوتروبي Ram-1 (Pit-2).

تكمن الميزة الفريدة لخلايا التعبئة PT-67 في قدرة بروتين الغلاف 10A1 على استخدام كل من مستقبلات Glvr-1 وRam-1. وتوسع هذه الخصوصية المزدوجة للمستقبلات نطاق المضيفين للناقلات الفيروسية العكسية التي ينتجها PT-67 بشكل كبير، مما يجعلها مفيدة في نقل الجينات إلى أنواع متنوعة من الخلايا عبر الأنواع المختلفة، بما في ذلك الخلايا البشرية وخلايا الفئران والجرذان. على سبيل المثال، يمكن للناقلات الفيروسية العكسية ذات النمط الكاذب 10A1 أن تنقل بكفاءة خلايا NIH 3T3 الفئرانية والخلايا الليفية البشرية من خلال الاستفادة من هذه المستقبلات. ومع ذلك، فإن أنماط استخدام المستقبلات تختلف باختلاف الأنواع والأنسجة، كما لوحظ في الدراسات التي أظهرت أن الناقلات ذات النمط الزائف 10A1 تستخدم مستقبل Ram-1 بكفاءة، لكنها تظهر كفاءة متفاوتة مع مستقبل Glvr-1 في سلالات خلوية مختلفة من البشر والقوارض.

الناقلات الفيروسية العكسية المنتجة باستخدام خلايا PT-67 خالية من الفيروسات المساعدة، مما يضمن السلامة والكفاءة في تجارب نقل الجينات. وهذا يجعل PT-67 أداة قيّمة لتوصيل الجينات بشكل مستقر في التطبيقات التجريبية والعلاجية، لا سيما عندما يكون النقل عبر نطاق واسع من المضيفين مطلوبًا. وقد ساهم تطوير خلايا التعبئة PT-67 وتحسينها في إحراز تقدم في مجال العلاج الجيني، مما أتاح نقل الجينات العلاجية إلى الخلايا المستهدفة بخصوصية وكفاءة معززتين.

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان