PT-67

Die PT-67-Zelllinie ist eine murine Retrovirus-Verpackungszelllinie, die häufig zur Herstellung retroviraler Vektoren für die Genübertragung verwendet wird. Die aus NIH-3T3-Zellen abgeleitete PT-67-Zelllinie exprimiert virale Strukturproteine und Hüllproteine, die für den Aufbau retroviraler Partikel erforderlich sind. Insbesondere ist sie für die Herstellung von Vektoren optimiert, die mit dem Hüllprotein des murinen Leukämievirus 10A1 (MLV) pseudotypisiert sind, was den Eintritt in Zellen über verschiedene Phosphat-Transportprotein-Rezeptoren ermöglicht, darunter den Rezeptor des Gibbon-Leukämievirus (Glvr-1 oder Pit-1) und den amphotropen Rezeptor Ram-1 (Pit-2).

Die Besonderheit der PT-67-Verpackungszellen liegt in der Fähigkeit des 10A1-Hüllproteins, sowohl Glvr-1- als auch Ram-1-Rezeptoren zu nutzen. Diese doppelte Rezeptorspezifität erweitert das Wirtsspektrum der von PT-67 produzierten retroviralen Vektoren erheblich und macht sie damit vorteilhaft für die Transduktion einer Vielzahl von Zelltypen verschiedener Spezies, darunter menschliche, Maus- und Rattenzellen. So können beispielsweise die 10A1-pseudotypisierten retroviralen Vektoren durch die Nutzung dieser Rezeptoren murine NIH-3T3-Zellen und menschliche Fibroblasten effizient transduzieren. Die Nutzungsmuster der Rezeptoren sind jedoch artspezifisch und gewebespezifisch, wie in Studien beobachtet wurde, in denen 10A1-pseudotypisierte Vektoren Ram-1 effizient nutzen, bei Glvr-1 jedoch in verschiedenen menschlichen und Nagetierzelllinien eine variable Effizienz aufweisen.

Mit PT-67-Zellen hergestellte retrovirale Vektoren sind frei von Helferviren, was Sicherheit und Effizienz bei Gentransfer-Experimenten gewährleistet. Dies macht PT-67 zu einem wertvollen Werkzeug für den stabilen Gentransfer in experimentellen und therapeutischen Anwendungen, insbesondere dort, wo eine Transduktion mit breitem Wirtsspektrum gewünscht ist. Die Entwicklung und Optimierung von PT-67-Verpackungszellen hat Fortschritte in der Gentherapie ermöglicht und erlaubt den Transfer therapeutischer Gene in Zielzellen mit erhöhter Spezifität und Effizienz.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung