PT-67

Baris sel PT-67 adalah baris sel pengemas retrovirus murin yang umum digunakan untuk produksi vektor retrovirus guna tujuan pengantaran gen. Berasal dari sel NIH 3T3, PT-67 mengekspresikan protein struktural virus dan protein selubung yang diperlukan untuk perakitan partikel retrovirus. Yang perlu diperhatikan, garis sel ini dioptimalkan untuk memproduksi vektor yang dipseudotipe dengan protein selubung virus leukemia tikus (MLV) 10A1, yang memungkinkan masuknya vektor ke dalam sel melalui berbagai reseptor protein pengangkut fosfat, termasuk reseptor virus leukemia kera gibbon (Glvr-1 atau Pit-1) dan reseptor amfotropik Ram-1 (Pit-2).

Ciri unik sel pengemas PT-67 terletak pada kemampuan protein selubung 10A1 untuk memanfaatkan reseptor Glvr-1 dan Ram-1. Spesifisitas reseptor ganda ini secara signifikan memperluas rentang inang vektor retrovirus yang dihasilkan oleh PT-67, sehingga menguntungkan untuk mentransduksi berbagai jenis sel lintas spesies, termasuk sel manusia, tikus, dan tikus laboratorium. Misalnya, vektor retroviral pseudotipe 10A1 dapat secara efisien mentransduksi sel NIH 3T3 murine dan fibroblas manusia dengan memanfaatkan reseptor-reseptor ini. Namun, pola penggunaan reseptor bersifat spesifik spesies dan jaringan, sebagaimana diamati dalam studi di mana vektor pseudotipe 10A1 secara efisien menggunakan Ram-1 tetapi menunjukkan efisiensi yang bervariasi dengan Glvr-1 pada berbagai garis sel manusia dan hewan pengerat.

Vektor retrovirus yang diproduksi menggunakan sel PT-67 bebas dari virus pembantu, sehingga menjamin keamanan dan efisiensi dalam eksperimen transfer gen. Hal ini menjadikan PT-67 sebagai alat yang berharga untuk pengiriman gen yang stabil dalam aplikasi eksperimental dan terapeutik, terutama di mana transduksi dengan rentang inang yang luas diinginkan. Pengembangan dan optimasi sel pengemas PT-67 telah memfasilitasi kemajuan dalam terapi gen, memungkinkan pengiriman gen terapeutik ke sel target dengan spesifisitas dan efisiensi yang ditingkatkan.

37°C, 5%_CO2, atmosfer yang dilembabkan.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

Di Cytion, kami mendukung kualitas dan kelangsungan hidup produk kami. Kami menjamin bahwa sel kami akan dapat bertahan hidup pada awal kultur selama 60 hari setelah pengiriman dari fasilitas kami. Kami menjamin bahwa semua bahan sesuai dengan spesifikasi yang dijelaskan dalam Sertifikat Analisis dan / atau Lembar Produk

Untuk detail lengkap, silakan merujuk ke <a href=""/Siapa-kami-Garansi/Garansi/"" hreflang=""x-default"">Pernyataan Jaminan kami