PT-67

Buněčná linie PT-67 je myší retrovirová balicí buněčná linie běžně používaná k výrobě retrovirových vektorů pro účely genového přenosu. Linie PT-67, odvozená z buněk NIH 3T3, exprimuje virové strukturální proteiny a obalové proteiny nezbytné pro sestavení retrovirových částic. Je zejména optimalizována pro produkci vektorů pseudotypizovaných obalovým proteinem myšího leukemického viru (MLV) 10A1, což umožňuje vstup do buněk prostřednictvím různých receptorů pro transport fosfátů, včetně receptoru pro leukemický virus gibonů (Glvr-1 nebo Pit-1) a amfotropního receptoru Ram-1 (Pit-2).

Jedinečná vlastnost balicích buněk PT-67 spočívá ve schopnosti obalového proteinu 10A1 využívat jak receptory Glvr-1, tak Ram-1. Tato specifita pro dva receptory významně rozšiřuje spektrum hostitelských buněk retrovirových vektorů produkovaných PT-67, což je výhodné pro transdukci různých typů buněk napříč druhy, včetně lidských, myších a potkaních buněk. Například retrovirové vektory pseudotypované 10A1 mohou díky využití těchto receptorů účinně transdukovat myší buňky NIH 3T3 a lidské fibroblasty. Vzory využití receptorů jsou však specifické pro jednotlivé druhy a tkáně, jak bylo pozorováno ve studiích, v nichž vektory pseudotypované 10A1 účinně využívají Ram-1, avšak vykazují proměnlivou účinnost s Glvr-1 v různých lidských a hlodavčích buněčných liniích.

Retrovirové vektory produkované pomocí buněk PT-67 neobsahují pomocné viry, což zajišťuje bezpečnost a účinnost při experimentech s genovým přenosem. Díky tomu jsou buňky PT-67 cenným nástrojem pro stabilní dodávání genů v experimentálních a terapeutických aplikacích, zejména tam, kde je žádoucí transdukce s širokým spektrem hostitelů. Vývoj a optimalizace balicích buněk PT-67 usnadnily pokrok v genové terapii a umožnily dodávání terapeutických genů do cílových buněk s vyšší specificitou a účinností.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení