PT-67

Bunková línia PT-67 je myšia retrovírusová baliaca bunková línia, ktorá sa bežne používa na výrobu retrovírusových vektorov na účely génového prenosu. Bunková línia PT-67, odvodená z buniek NIH 3T3, exprimuje vírusové štrukturálne proteíny a proteíny obalu potrebné na zostavenie retrovírusových častíc. Je optimalizovaná najmä na produkciu vektorov pseudotypizovaných obalovým proteínom myšieho leukemického vírusu (MLV) 10A1, čo umožňuje vstup do buniek prostredníctvom viacerých receptorov fosfátových transportných proteínov, vrátane receptora gibonského leukemického vírusu (Glvr-1 alebo Pit-1) a amfotropného receptora Ram-1 (Pit-2).

Jedinečná vlastnosť baliacich buniek PT-67 spočíva v schopnosti obalového proteínu 10A1 využívať receptory Glvr-1 aj Ram-1. Táto špecifickosť voči dvom receptorom výrazne rozširuje spektrum hostiteľov retrovirových vektorov produkovaných systémom PT-67, čo ho predurčuje na transdukciu rôznych typov buniek naprieč druhmi, vrátane ľudských, myších a potkaních buniek. Napríklad retrovirálne vektory pseudotypizované 10A1 môžu efektívne transdukovat myšie bunky NIH 3T3 a ľudské fibroblasty využitím týchto receptorov. Vzory využívania receptorov sú však špecifické pre jednotlivé druhy a tkanivá, ako bolo pozorované v štúdiách, v ktorých pseudotypizované vektory 10A1 efektívne využívajú Ram-1, avšak vykazujú premenlivú účinnosť s Glvr-1 v rôznych ľudských a hlodavčích bunkových líniách.

Retrovirálne vektory vyrobené s využitím buniek PT-67 neobsahujú pomocné vírusy, čo zaručuje bezpečnosť a účinnosť pri experimentoch s génovým prenosom. Vďaka tomu sú bunky PT-67 cenným nástrojom pre stabilný génový prenos v experimentálnych a terapeutických aplikáciách, najmä tam, kde je žiaduca transdukcia so širokým spektrom hostiteľov. Vývoj a optimalizácia baliacich buniek PT-67 prispeli k pokroku v génovej terapii, čím umožnili dodávanie terapeutických génov do cieľových buniek s vyššou špecifickosťou a účinnosťou.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste

Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke