PT-67

PT-67 rakuliin on hiire retroviiruse pakkimisrakuliin, mida kasutatakse tavaliselt geenide edastamiseks mõeldud retroviirusvektorite tootmiseks. NIH 3T3 rakkudest tuletatud PT-67 ekspresseerib retroviirusosakeste kokkupanekuks vajalikke viiruslikke struktuurvalke ja ümbrisvalke. Eelkõige on see optimeeritud 10A1 hiire leukeemiaviiruse (MLV) ümbrisvalguga pseudotüüpitud vektorite tootmiseks, mis võimaldab rakkudesse sisenemist mitmete fosfaaditranspordivalgu retseptorite kaudu, sealhulgas gibboni ahvi leukeemiaviiruse retseptori (Glvr-1 või Pit-1) ja amfotroopse retseptori Ram-1 (Pit-2).

PT-67 pakkimisrakkude ainulaadne omadus seisneb 10A1 ümbrisvalgu võimes kasutada nii Glvr-1 kui ka Ram-1 retseptoreid. See kahe retseptori spetsiifilisus laiendab oluliselt PT-67 abil toodetud retroviirusvektorite peremeesrakkude valikut, muutes selle sobivaks mitmesuguste rakutüüpide transduktsiooniks erinevate liikide puhul, sealhulgas inimese, hiire ja roti rakkudes. Näiteks suudavad 10A1-pseudotüüpi retroviirusvektorid neid retseptoreid ära kasutades tõhusalt transdutseerida hiire NIH 3T3-rakke ja inimese fibroblaste. Siiski on retseptorite kasutamismustrid liigi- ja koespetsiifilised, nagu on täheldatud uuringutes, kus 10A1-pseudotüüpi vektorid kasutavad tõhusalt Ram-1-retseptorit, kuid näitavad erinevat tõhusust Glvr-1-retseptori puhul erinevates inim- ja näriliste rakuliinides.

PT-67 rakke kasutades toodetud retroviirusvektorid on abiviirusevabad, tagades ohutuse ja tõhususe geenisiirde katsetes. See teeb PT-67-st väärtusliku vahendi stabiilseks geenide edastamiseks eksperimentaalsetes ja terapeutilistes rakendustes, eriti juhul, kui soovitakse laia peremeesvalikuga transduktsiooni. PT-67 pakkimisrakkude arendamine ja optimeerimine on soodustanud edusamme geeniteraapias, võimaldades terapeutiliste geenide edastamist sihtrakkudesse suurema spetsiifilisuse ja tõhususega.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest