Skip to content
PT-67
Tissue
เอ็มบริโอ
Synonyms
RetroPack PT67, PT-67

Documents

PT-67

Cell line · Product number 305483

The PT-67 cell line is a murine retrovirus packaging cell line commonly used for the production of retroviral vectors for gene delivery purposes. Derived ...

€550.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

สายเซลล์ PT-67 เป็นสายเซลล์บรรจุเรโทรไวรัสของหนู ซึ่งมักใช้สำหรับการผลิตเวกเตอร์เรโทรไวรัสเพื่อวัตถุประสงค์ในการส่งยีน สายเซลล์ PT-67 ที่พัฒนาจากเซลล์ NIH 3T3 จะแสดงออกโปรตีนโครงสร้างไวรัสและโปรตีนหุ้มที่จำเป็นสำหรับการประกอบอนุภาคเรโทรไวรัส ที่น่าสังเกตคือ สายเซลล์นี้ได้รับการปรับให้เหมาะสมสำหรับการผลิตเวกเตอร์ที่ถูกสร้างแบบจำลองด้วยโปรตีนหุ้มของไวรัสลูคีเมียหนู 10A1 (MLV) ซึ่งช่วยให้สามารถเข้าสู่เซลล์ได้ผ่านตัวรับโปรตีนขนส่งฟอสเฟตหลายชนิด รวมถึงตัวรับไวรัสลูคีเมียของลิงกิบอน (Glvr-1 หรือ Pit-1) และตัวรับแอมฟโทรปิก Ram-1 (Pit-2).

คุณสมบัติพิเศษของเซลล์บรรจุ PT-67 อยู่ที่ความสามารถของโปรตีนหุ้ม 10A1 ในการใช้ทั้งตัวรับ Glvr-1 และ Ram-1 ความจำเพาะต่อตัวรับคู่แบบนี้ช่วยขยายช่วงโฮสต์ของเวกเตอร์เรโทรไวรัสที่ผลิตโดย PT-67 อย่างมีนัยสำคัญ ทำให้มีข้อได้เปรียบในการถ่ายทอดยีนไปยังเซลล์ประเภทต่าง ๆ ข้ามสายพันธุ์ รวมถึงเซลล์มนุษย์ เซลล์หนู และเซลล์หนูแรท ตัวอย่างเช่น เวกเตอร์เรโทรไวรัสแบบ 10A1-pseudotyped สามารถถ่ายทอดยีนเข้าสู่เซลล์ NIH 3T3 ของหนูและไฟโบรบลาสต์ของมนุษย์ได้อย่างมีประสิทธิภาพ โดยอาศัยตัวรับเหล่านี้ อย่างไรก็ตาม รูปแบบการใช้งานตัวรับมีความเฉพาะเจาะจงต่อชนิดสัตว์และเนื้อเยื่อ ดังที่สังเกตเห็นในการศึกษาที่พบว่าเวกเตอร์แบบพเซวโดไทป์ 10A1 ใช้ตัวรับ Ram-1 ได้อย่างมีประสิทธิภาพ แต่แสดงประสิทธิภาพที่แตกต่างกันเมื่อใช้กับตัวรับ Glvr-1 ในสายเซลล์มนุษย์และสัตว์ฟันแทะต่าง ๆ

เวกเตอร์เรโทรไวรัสที่ผลิตโดยใช้เซลล์ PT-67 ไม่มีไวรัสช่วย (helper virus-free) ซึ่งรับประกันความปลอดภัยและประสิทธิภาพในการทดลองการถ่ายโอนยีน สิ่งนี้ทำให้ PT-67 เป็นเครื่องมือที่มีค่าสำหรับการส่งยีนอย่างเสถียรในแอปพลิเคชันการทดลองและการรักษา โดยเฉพาะอย่างยิ่งในกรณีที่ต้องการการถ่ายโอนยีนที่มีช่วงโฮสต์กว้าง การพัฒนาและการปรับปรุงเซลล์บรรจุ PT-67 ได้ส่งเสริมความก้าวหน้าในด้านการรักษาด้วยยีน ทำให้สามารถส่งยีนรักษาเข้าสู่เซลล์เป้าหมายได้ด้วยความเฉพาะเจาะจงและประสิทธิภาพที่เพิ่มขึ้น

Tissue
เอ็มบริโอ
Synonyms
  • RetroPack PT67
  • PT-67

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Male
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This murine NIH-3T3-derived packaging cell line (PT-67) contains a circularly permuted clone of the 10A1 retrovirus delivered via B6 plasmid transfection, supporting production of amphotropic retroviral particles. The inserts are stably present. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
2

03Characteristics

Morphology
ไฟโบรบลาสต์
Cell type
ไฟโบรบลาสต์

04Identifiers

Citation
PT-67 (หมายเลขในแคตตาล็อก Cytion 305483)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_9093

05Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 4 มิลลิโมลาร์ แอล-กลูตามีน, w: 3.7 กรัม/ลิตร NaHCO3, w: 1.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต (หมายเลขบทความ Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Seeding density
2–4 × 10⁴/cm²
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

07Donor

Donor age
ไม่ระบุ