PT-67

Dòng tế bào PT-67 là một dòng tế bào đóng gói retrovirus chuột thường được sử dụng để sản xuất các vectơ retrovirus nhằm mục đích chuyển gen. Được phân lập từ tế bào NIH 3T3, PT-67 biểu hiện các protein cấu trúc và protein vỏ virus cần thiết cho quá trình lắp ráp các hạt retrovirus. Đáng chú ý, dòng tế bào này được tối ưu hóa để sản xuất các vectơ được giả hình bằng protein vỏ của virus bạch cầu chuột 10A1 (MLV), cho phép xâm nhập vào tế bào thông qua nhiều thụ thể protein vận chuyển phosphate, bao gồm thụ thể virus bạch cầu khỉ gibbon (Glvr-1 hoặc Pit-1) và thụ thể amphotropic Ram-1 (Pit-2).

Đặc điểm độc đáo của các tế bào đóng gói PT-67 nằm ở khả năng của protein vỏ 10A1 trong việc sử dụng cả hai thụ thể Glvr-1 và Ram-1. Đặc tính thụ thể kép này mở rộng đáng kể phạm vi vật chủ của các vectơ retrovirus do PT-67 sản xuất, mang lại lợi thế trong việc truyền gen vào nhiều loại tế bào khác nhau giữa các loài, bao gồm tế bào người, chuột và chuột cống. Ví dụ, các vectơ retrovirus giả hình 10A1 có thể truyền gen hiệu quả vào các tế bào NIH 3T3 của chuột và các tế bào sợi của người bằng cách tận dụng các thụ thể này. Tuy nhiên, mô hình sử dụng thụ thể mang tính đặc hiệu theo loài và mô, như đã quan sát trong các nghiên cứu nơi các vectơ được giả hình bằng 10A1 sử dụng Ram-1 hiệu quả nhưng cho hiệu suất thay đổi khi tương tác với Glvr-1 trên các dòng tế bào người và gặm nhấm khác nhau.

Các vectơ retrovirus được sản xuất bằng tế bào PT-67 không chứa virus trợ giúp, đảm bảo an toàn và hiệu quả trong các thí nghiệm chuyển gen. Điều này khiến PT-67 trở thành một công cụ quý giá để truyền gen ổn định trong các ứng dụng thí nghiệm và điều trị, đặc biệt là khi cần truyền gen trên phạm vi vật chủ rộng. Việc phát triển và tối ưu hóa các tế bào đóng gói PT-67 đã thúc đẩy những tiến bộ trong liệu pháp gen, cho phép chuyển các gen điều trị vào các tế bào đích với độ đặc hiệu và hiệu quả được nâng cao.

37°C, 5%_CO₂, môi trường ẩm.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

Tại Cytion, chúng tôi cam kết về chất lượng và khả năng sống của các sản phẩm của mình. Chúng tôi đảm bảo rằng các tế bào của chúng tôi sẽ có khả năng sống tại thời điểm bắt đầu nuôi cấy trong 60 ngày kể từ khi vận chuyển từ cơ sở của chúng tôi. Chúng tôi cam kết rằng tất cả các vật liệu tuân thủ các thông số kỹ thuật được mô tả trong Giấy chứng nhận phân tích và/hoặc Tài liệu sản phẩm.

Để biết chi tiết đầy đủ, vui lòng tham khảo <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Tuyên bố Bảo hành.