PT-67

Η κυτταρική σειρά PT-67 είναι μια σειρά κυττάρων συσκευασίας ποντικού ρετροϊού που χρησιμοποιείται συνήθως για την παραγωγή ρετροϊικών φορέων με σκοπό τη μεταφορά γονιδίων. Προερχόμενη από κύτταρα NIH 3T3, η PT-67 εκφράζει ιικές δομικές πρωτεΐνες και πρωτεΐνες περιβλήματος που είναι απαραίτητες για τη συναρμολόγηση των ρετροϊικών σωματιδίων. Συγκεκριμένα, έχει βελτιστοποιηθεί για την παραγωγή φορέων ψευδοτυπισμένων με την πρωτεΐνη περιβλήματος του ιού της λευχαιμίας ποντικού 10A1 (MLV), η οποία επιτρέπει την είσοδο στα κύτταρα μέσω πολλαπλών υποδοχέων πρωτεϊνών μεταφοράς φωσφορικών, συμπεριλαμβανομένου του υποδοχέα του ιού της λευχαιμίας του γιββώνα (Glvr-1 ή Pit-1) και του αμφότροπου υποδοχέα Ram-1 (Pit-2).

Το μοναδικό χαρακτηριστικό των κυττάρων συσκευασίας PT-67 έγκειται στην ικανότητα της πρωτεΐνης περιβλήματος 10A1 να χρησιμοποιεί τόσο τον υποδοχέα Glvr-1 όσο και τον Ram-1. Αυτή η διπλή εξειδίκευση στους υποδοχείς διευρύνει σημαντικά το φάσμα των ξενιστών των ρετροϊικών φορέων που παράγονται από το PT-67, καθιστώντας το πλεονεκτικό για τη μεταγωγή ποικιλίας κυτταρικών τύπων σε διάφορα είδη, συμπεριλαμβανομένων ανθρώπινων, ποντικών και αρουραίων κυττάρων. Για παράδειγμα, οι ψευδοτυπικοί ρετροϊικοί φορείς 10A1 μπορούν να μεταδώσουν αποτελεσματικά σε ποντίκια κύτταρα NIH 3T3 και ανθρώπινους ινοβλάστες αξιοποιώντας αυτούς τους υποδοχείς. Ωστόσο, τα πρότυπα χρήσης των υποδοχέων εξαρτώνται από το είδος και τον ιστό, όπως παρατηρήθηκε σε μελέτες όπου οι ψευδοτυπικοί φορείς 10A1 χρησιμοποιούν αποτελεσματικά τον Ram-1, αλλά παρουσιάζουν μεταβλητή αποτελεσματικότητα με τον Glvr-1 σε διαφορετικές ανθρώπινες και τρωκτικών κυτταρικές σειρές.

Οι ρετροϊικοί φορείς που παράγονται με τη χρήση κυττάρων PT-67 είναι απαλλαγμένοι από βοηθητικούς ιούς, εξασφαλίζοντας ασφάλεια και αποτελεσματικότητα σε πειράματα μεταφοράς γονιδίων. Αυτό καθιστά το PT-67 ένα πολύτιμο εργαλείο για τη σταθερή μεταφορά γονιδίων σε πειραματικές και θεραπευτικές εφαρμογές, ιδιαίτερα όπου επιθυμείται μεταγωγή με ευρύ φάσμα ξενιστών. Η ανάπτυξη και η βελτιστοποίηση των κυττάρων συσκευασίας PT-67 έχουν διευκολύνει τις εξελίξεις στη γονιδιακή θεραπεία, επιτρέποντας τη μεταφορά θεραπευτικών γονιδίων σε κύτταρα-στόχους με αυξημένη ειδικότητα και αποτελεσματικότητα.

37°C, 5%_CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

Στην Cytion, υποστηρίζουμε την ποιότητα και τη βιωσιμότητα των προϊόντων μας. Εγγυόμαστε ότι τα κύτταρά μας θα είναι βιώσιμα κατά την έναρξη της καλλιέργειας για 60 ημέρες μετά την αποστολή από τις εγκαταστάσεις μας. Διαβεβαιώνουμε ότι όλα τα υλικά συμμορφώνονται με τις προδιαγραφές που περιγράφονται στο Πιστοποιητικό Ανάλυσης ή/και στο Φύλλο Προϊόντος

Για πλήρεις λεπτομέρειες, ανατρέξτε στην <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Δήλωση εγγύησης