NOMO-1

A linhagem celular NOMO-1 é derivada de uma paciente de 31 anos diagnosticada com leucemia monocítica aguda (LMA-M5a). Essa linhagem celular apresenta características promonocíticas, o que a torna um modelo robusto para o estudo da leucemia monocítica e da diferenciação. As células NOMO-1 demonstram responsividade a agentes indutores de diferenciação, como os ésteres de forbol (por exemplo, 12-o-tetradecanoil forbol-13-acetato ou TPA), levando à sua maturação em células semelhantes a macrófagos. Após a diferenciação, as células apresentam aumento na expressão de marcadores como a fibronectina e na secreção das interleucinas IL-1α e IL-1β, que são essenciais para a resposta imunológica e as vias da inflamação.

Essas células também desempenham um papel fundamental no estudo dos sistemas de coagulação e fibrinólise. As células NOMO-1 secretam o fator tecidual (TF), o ativador do plasminogênio (PA) e o inibidor do ativador do plasminogênio (PAI), sendo que os níveis de secreção são modulados por indutores de diferenciação. O tratamento com TPA aumenta a produção de TF e PA, particularmente do PA do tipo uroquinase (uPA), ao mesmo tempo em que aumenta a secreção de PAI, sugerindo a relevância das células NOMO-1 na compreensão dos mecanismos de hemostasia e trombose na leucemia.

Geneticamente, as células NOMO-1 apresentam a translocação t(9;11)(p22;q23), resultando no gene de fusão MLL-AF9, que é uma característica marcante de certos subtipos de LMA. Essa translocação impulsiona a leucemogênese ao desregular programas de expressão gênica associados à diferenciação e proliferação hematopoiéticas. A presença dessa translocação torna o NOMO-1 uma ferramenta essencial para a investigação de leucemias com rearranjo do MLL e para a avaliação de terapias direcionadas.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.