NOMO-1

NOMO-1-solulinja on peräisin 31-vuotiaalta naispotilaalta, jolla oli diagnosoitu akuutti monosyyttinen leukemia (AML-M5a). Tällä solulinjalla on promonosyyttisiä ominaisuuksia, minkä ansiosta se on luotettava malli monosyyttisen leukemian ja erilaistumisen tutkimiseen. NOMO-1-solut reagoivat erilaistumista indusoiviin aineisiin, kuten forbolestereihin (esim. 12-o-tetradekanoiliforbol-13-asetaatti eli TPA), minkä seurauksena ne kypsyvät makrofagien kaltaisiksi soluiksi. Eriytyessään solut ilmentävät entistä enemmän merkkiaineita, kuten fibronektiiniä, ja erittävät interleukiineja IL-1α ja IL-1β, jotka ovat keskeisiä immuunivasteen ja tulehdusreittien kannalta.

Nämä solut ovat myös keskeisessä asemassa hyytymis- ja fibrinolyysijärjestelmien tutkimuksessa. NOMO-1-solut erittävät kudostekijää (TF), plasminogeeniaktivaattoria (PA) ja plasminogeeniaktivaattorin estäjää (PAI), ja erittymistasoja säätelevät erilaistumista indusoivat aineet. TPA-hoito tehostaa TF:n ja PA:n tuotantoa, erityisesti urokinasityyppisen PA:n (uPA), ja lisää samalla PAI:n erittymistä, mikä viittaa NOMO-1-solujen merkitykseen leukemian hemostaasi- ja tromboosimekanismien ymmärtämisessä.

Geneettisesti NOMO-1-soluissa esiintyy t(9;11)(p22;q23)-translokaatio, joka johtaa MLL-AF9-fuusiogeenin syntyyn; tämä on tiettyjen AML-alatyyppien tunnusmerkki. Tämä translokaatio edistää leukemogeneesiä häiritsemällä hematopoieettiseen erilaistumiseen ja proliferaatioon liittyviä geeniekspressio-ohjelmia. Tämän translokaation läsnäolo tekee NOMO-1:stä keskeisen työkalun MLL-järjestelymuutoksia sisältävien leukemioiden tutkimuksessa ja kohdennettujen hoitojen arvioinnissa.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa