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CTX TNA2
Gewebe
Gehirn, Frontallappen

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CTX TNA2

Cell line · Artikelnummer 305333

CTX TNA2 is a rat astrocyte cell line that was established from primary cultures of cortical astrocytes. It is often used to study central nervous system ...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

CTX TNA2 ist eine Astrozyten-Zelllinie der Ratte, die aus Primärkulturen kortikaler Astrozyten hervorgegangen ist. Sie wird häufig zur Untersuchung der Funktionen des Zentralnervensystems (ZNS) verwendet, insbesondere in Bezug auf Glia-Biologie, Neurotoxizität und Neuroprotektion. Astrozyten spielen eine entscheidende Rolle bei der Aufrechterhaltung der Homöostase des ZNS, indem sie die Neuronen strukturell und metabolisch unterstützen und Reaktionen auf Verletzungen und oxidativen Stress vermitteln.

In verschiedenen Studien wurden CTX-TNA2-Zellen zur Modellierung von Neurotoxizität eingesetzt, insbesondere im Zusammenhang mit Exzitotoxizität, die durch Substanzen wie Glutamat ausgelöst wird. So löst die Exposition gegenüber Glutamat in CTX-TNA2-Zellen Apoptose und Autophagie durch Mechanismen aus, an denen reaktive Sauerstoffspezies (ROS) und der Glykogensynthase-Kinase-3β (GSK-3β)-Stoffwechselweg beteiligt sind. Diese Wege sind von zentraler Bedeutung für die Reaktion der Zellen auf oxidativen Stress und mitochondriale Dysfunktion, insbesondere nach traumatischen Hirnverletzungen oder anderen neurodegenerativen Zuständen. Darüber hinaus haben neuroprotektive Wirkstoffe wie Resveratrol und Cannabidiol (CBD) gezeigt, dass sie die ROS-Bildung reduzieren und die durch Glutamat ausgelöste Autophagie und Apoptose in diesen Astrozyten hemmen.

Die CTX-TNA2-Zelllinie hat sich als wertvolles In-vitro-Modell erwiesen, um nicht nur die grundlegenden Astrozytenfunktionen zu untersuchen, sondern auch das therapeutische Potenzial von Antioxidantien und neuroprotektiven Substanzen unter den Bedingungen von ZNS-Verletzungen und -Krankheiten.

Gewebe
Gehirn, Frontallappen

02Klassifizierung

Organismus
Ratte
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
2

03Merkmale

Morphologie
Fibroblasten
Zelltyp
Astrozyten

04Bezeichner

Quellenangabe
CTX TNA2 (Cytion-Katalognummer 305333)
NCBI-Steuer-ID
10116
Cellosaurus
CVCL_3670

05Expression und Anfälligkeit

Viren
Transformant: Simian-Virus 40 (SV40)

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir 50 % Basalmedium + 40 % FBS + 10 % DMSO oder CM-1 (Cytion-Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektiva und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und den kryoinduzierten Stress zu verringern.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Rasse / Unterart
Sprague Dawley
Alter des Spenders
1 Tag