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CTX TNA2
Tecido
Cérebro, lobo frontal

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CTX TNA2

Cell line · Número do produto 305333

CTX TNA2 is a rat astrocyte cell line that was established from primary cultures of cortical astrocytes. It is often used to study central nervous system ...

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01Informações gerais

Descrição

CTX TNA2 é uma linha celular de astrócitos de rato que foi estabelecida a partir de culturas primárias de astrócitos corticais. É frequentemente utilizada para estudar as funções do sistema nervoso central (SNC), particularmente em relação à biologia glial, neurotoxicidade e neuroprotecção. Os astrócitos desempenham um papel fundamental na manutenção da homeostase do SNC, fornecendo apoio estrutural e metabólico aos neurónios e mediando as respostas a lesões e ao stress oxidativo.

Em vários estudos, as células CTX TNA2 têm sido utilizadas para modelar a neurotoxicidade, especialmente a excitotoxicidade induzida por agentes como o glutamato. Por exemplo, a exposição ao glutamato nas células CTX TNA2 desencadeia a apoptose e a autofagia através de mecanismos que envolvem espécies reactivas de oxigénio (ROS) e a via da glicogénio sintase quinase-3β (GSK-3β). Estas vias são fundamentais para a resposta das células ao stress oxidativo e à disfunção mitocondrial, particularmente após uma lesão cerebral traumática ou outras condições neurodegenerativas. Além disso, foi demonstrado que agentes neuroprotectores como o resveratrol e o canabidiol (CBD) reduzem a produção de ROS e inibem a autofagia e a apoptose induzidas pelo glutamato nestes astrócitos.

A linha celular CTX TNA2 provou ser um modelo in vitro valioso para estudar não só a função básica dos astrócitos, mas também o potencial terapêutico dos compostos antioxidantes e neuroprotectores em condições de lesão e doença do SNC.

Tecido
Cérebro, lobo frontal

02Classificação

Organismo
Rato
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
2

03Características

Morfologia
Fibroblastos
Tipo de célula
Astrócitos

04Identificadores

Referência
CTX TNA2 (número de catálogo da Cytion 305333)
Número de identificação fiscal do NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_3670

05Expressão e suscetibilidade

Vírus
Transformante: Vírus símio 40 (SV40)

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM, com: 4,5 g/L de glucose, com: 4 mM de L-Glutamina, com: 3,7 g/L de NaHCO3, com: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo Cytion 820300a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos 50% de meio basal + 40% de FBS + 10% de DMSO, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Raça / subespécie
Sprague Dawley
Idade do dador
1 dia