Mine otse sisu juurde
CTX TNA2
Kude
Aju, frontaallülid

Dokumendid

CTX TNA2

Cell line · Toote number 305333

CTX TNA2 is a rat astrocyte cell line that was established from primary cultures of cortical astrocytes. It is often used to study central nervous system ...

€550.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

CTX TNA2 on roti astrotsüütide rakuliin, mis on loodud kortikaalsete astrotsüütide primaarkultuuridest. Seda kasutatakse sageli kesknärvisüsteemi (KNS) funktsioonide uurimiseks, eriti seoses gliabioloogia, neurotoksilisuse ja neuroprotektsiooniga. Astrotsüütidel on kriitiline roll kesknärvisüsteemi homöostaasi säilitamisel, neuronite struktuurilise ja metaboolse toe pakkumisel ning vigastustele ja oksüdatiivsele stressile reageerimise vahendamisel.

Erinevates uuringutes on CTX TNA2 rakke kasutatud neurotoksilisuse modelleerimiseks, eriti seoses eksitotoksilisusega, mida põhjustavad sellised ained nagu glutamaat. Näiteks käivitab glutamaadiga kokkupuude CTX TNA2 rakkudes apoptoosi ja autofaagiat mehhanismide kaudu, mis hõlmavad reaktiivseid hapnikuliike (ROS) ja glükogeeni süntaasi kinaasi-3β (GSK-3β) rada. Need teed on keskse tähtsusega rakkude reageerimisel oksüdatiivsele stressile ja mitokondriaalse düsfunktsioonile, eriti pärast traumaatilist ajukahjustust või muid neurodegeneratiivseid haigusi. Lisaks on näidatud, et neuroprotektiivsed ained, nagu resveratrool ja kannabidiool (CBD), vähendavad ROSi teket ja pärsivad glutamaadi poolt põhjustatud autofaagiat ja apoptoosi nendes astrotsüütides.

CTX TNA2 rakuliin on osutunud väärtuslikuks in vitro mudeliks mitte ainult astrotsüütide põhifunktsiooni, vaid ka antioksüdantide ja neuroprotektiivsete ühendite terapeutilise potentsiaali uurimiseks kesknärvisüsteemi kahjustuste ja haiguste tingimustes.

Kude
Aju, frontaallülid

02Klassifikatsioon

Organism
Rott
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
2

03Omadused

Morfoloogia
Fibroblastide
Rakutüüp
Astrotsüüdid

04Tunnused

Viide
CTX TNA2 (Cytioni katalooginumber 305333)
NCBI maksukood
10116
Cellosaurus
CVCL_3670

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Viirused
Transformant: simian virus 40 (SV40)

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüokonserveerimissöötmena kasutame 50% põhikeskkonda + 40% FBS + 10% DMSO ehk CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüoostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Tõug / alamliik
Sprague Dawley
Doonori vanus
1 päev