Μετάβαση στο περιεχόμενο
HEK293-VEGFR2
Ιστός
Εμβρυϊκός νεφρός
Ασθένεια
Μετασχηματισμένο/αθανατοποιημένο· μη ογκογόνο (υπόβαθρο HEK293)
Συνώνυμα
HEK293/VEGFR2

Έγγραφα

HEK293-VEGFR2

Cell line · Αριθμός προϊόντος 305990

Δήλωση αποποίησης ευθύνης: Οι τιμές που εμφανίζονται για τις κυτταρικές σειρές αφορούν αποκλειστικά πελάτες του ακαδημαϊκού τομέα ή μη κερδοσκοπικού χαρακτήρα. Για εμπορικές οντότητες, οι τιμές...

€1,900.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής

Προσαρμογή / Προτάσεις

Κατασκευάζεται κατόπιν παραγγελίας
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Σημείωση: Οι τιμές που εμφανίζονται για τις κυτταρικές σειρές ισχύουν αποκλειστικά για πελάτες του ακαδημαϊκού τομέα ή μη κερδοσκοπικού χαρακτήρα. Για εμπορικές οντότητες, η τιμή ανέρχεται σε περίπου 6.250 €.
Εάν εκπροσωπείτε εμπορική οντότητα ή δεν είστε σίγουροι για την κατηγορία στην οποία ανήκετε, παρακαλούμε επικοινωνήστε μαζί μας.


Τα κύτταρα HEK293-VEGFR2 είναι κύτταρα ανθρώπινου εμβρυϊκού νεφρού 293 (HEK293) που έχουν τροποποιηθεί γενετικά ώστε να εκφράζουν σταθερά τον ανθρώπινο υποδοχέα 2 του αγγειακού ενδοθηλιακού αυξητικού παράγοντα (VEGFR2/KDR/Flk-1), έναν υποδοχέα τυροσίνης κινάσης που λειτουργεί ως κύριος μεσολαβητής της αγγειογενετικής σηματοδότησης που καθοδηγείται από τον VEGF. Ο VEGFR2 εκφράζεται κυρίως στα ενδοθηλιακά κύτταρα και διαδραματίζει ουσιαστικό ρόλο στην αγγειακή ανάπτυξη, τον πολλαπλασιασμό, τη μετανάστευση, τη διαπερατότητα και την επιβίωση των ενδοθηλιακών κυττάρων μέσω της ενεργοποίησης κατάντη οδών, συμπεριλαμβανομένων των σηματοδοτικών καταρρακτών των οικογενειών MAPK/ERK, PI3K/AKT, PLCγ και SRC. Η δυσλειτουργική σηματοδότηση του VEGFR2 συμβάλλει στην αγγειογένεση των όγκων, στην φλεγμονώδη αγγειακή αναδιαμόρφωση και στην παθολογική νεοαγγείωση, καθιστώντας τον υποδοχέα σημαντικό στόχο στην ογκολογία και στη θεραπευτική αγωγή των αγγειακών παθήσεων.

Τα κύτταρα HEK293-VEGFR2 χρησιμοποιούνται ευρέως στην έρευνα για την αγγειογένεση και την ανακάλυψη φαρμάκων για τον χαρακτηρισμό μονοκλωνικών αντισωμάτων που στοχεύουν τον VEGFR2, αναστολέων τυροσίνης κινάσης, παγίδων προσδέτη, δισπεκτικών αντισωμάτων και αντι-αγγειογενετικών βιολογικών παραγόντων. Το σταθερό σύστημα ανασυνδυασμένης έκφρασης υποστηρίζει την ποσοτική αξιολόγηση της σύνδεσης του προσδέτη VEGF, της φωσφορυλίωσης του υποδοχέα, της ενεργοποίησης της κατάντη σηματοδότησης, της ενσωμάτωσης του υποδοχέα και της ισχύος του αναστολέα. Αυτά τα κύτταρα χρησιμοποιούνται επίσης συνήθως σε δοκιμασίες αναφοράς, μελέτες σύνδεσης με βάση την κυτταρομετρία ροής, δοκιμασίες δραστικότητας κινάσης και ροές εργασίας θεραπευτικού ελέγχου υψηλής απόδοσης. Επειδή τα κύτταρα HEK293 υποστηρίζουν ισχυρή έκφραση ανασυνδυασμένων πρωτεϊνών και αποτελεσματική πολλαπλασιασμό, παρέχουν μια αξιόπιστη πλατφόρμα για την ανάπτυξη τυποποιημένων δοκιμασιών VEGFR2 και μελετών μηχανιστικής σηματοδότησης.

Ιστός
Εμβρυϊκός νεφρός
Ασθένεια
Μετασχηματισμένο/αθανατοποιημένο· μη ογκογόνο (υπόβαθρο HEK293)
Εφαρμογές
Ανάπτυξη αντισωμάτων που στοχεύουν τον VEGFR2 (ανάλογα του ραμουσιρουμάμπ); έρευνα στην αγγειογένεση; δοκιμασίες ADCC/CDC; κυτταρομετρία ροής; διαλογή αντι-αγγειογενετικών θεραπειών; έρευνα στους τομείς της ογκολογίας και της οφθαλμολογίας
Συνώνυμα
  • HEK293/VEGFR2

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Άνθρωπος
Σεξ
Γυναίκα
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Κατάσταση όσον αφορά τους ΓΤΟ
GMO-S1
Λεπτομέρειες σχετικά με την κατάσταση των ΓΤΟ
GMO-S1: This HEK293 cell line contains a VEGFR2 (KDR/FLK-1) expression construct for vascular endothelial growth factor receptor studies and anti-angiogenic therapy development. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Επιθηλιοειδής
Τύπος κυττάρου
Επιθηλιακά κύτταρα
Χρόνος διπλασιασμού
περίπου 24-36 ώρες

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
HEK293-VEGFR2 (αριθμός καταλόγου Cytion 305990)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9606
Κελλοσαύρος
CVCL_D7C3

05Έκφραση και ευαισθησία

Υποδοχείς που εκφράζονται
VEGFR2

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
RPMI 1640, w: 2,0 mM σταθερής γλουταμίνης, w: 2,0 g/L NaHCO3 (αριθμός άρθρου Cytion 820700a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS, 1 mM πυρουβικό νάτριο, 10 mM HEPES, 1% NEAA. Προσθέστε Geneticin (G418-Sulfat) για να επιτευχθεί τελική συγκέντρωση 1 mg/mL.
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Τρυψίνη-EDTA
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Για συνήθη καλλιέργεια προσκολλημένων κυττάρων: Αναρροφήστε το παλιό μέσο καλλιέργειας από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS για να απομακρύνετε τυχόν εναπομείναν μέσο. Αφού αναρροφήσετε το PBS, προσθέστε τον κατάλληλο όγκο διαλύματος Trypsin/EDTA με βάση το μέγεθος του δοχείου καλλιέργειας (π.χ. 1 ml για φιάλη T25, 3 ml για φιάλη T75) και επωάστε σε θερμοκρασία δωματίου ή 37°C έως ότου αποκολληθούν τα κύτταρα (5-10 λεπτά). Παρακολουθήστε την αποκόλληση στο μικροσκόπιο και χτυπήστε απαλά το δοχείο εάν είναι απαραίτητο για να απελευθερώσετε τα κύτταρα. Αφού αποκολληθούν, προσθέστε πλήρες μέσο για να αδρανοποιήσετε την Τρυψίνη/EDTA, ανασυσσωματώστε απαλά τα κύτταρα και μεταφέρετε μια εκατοστιαία ποσότητα του εναιωρήματος των κυττάρων σε ένα νέο δοχείο καλλιέργειας που περιέχει φρέσκο μέσο. Τοποθετήστε το δοχείο σε επωαστήρα ρυθμισμένο στους 37°C με 5%CO2 και αλλάζετε το μέσο κάθε 2-3 ημέρες.
Αναλογία διαχωρισμού
1 έως 5
Πυκνότητα σποράς
2 έως 4 x 104 κύτταρα/cm2
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Ανάκαμψη μετά την απόψυξη

Μετά την απόψυξη, χωρίστε τα κύτταρα σε αναλογία 1:2 έως 1:3 σε φιάλες Τ25 και αφήστε τα κύτταρα να ανακάμψουν από τη διαδικασία κατάψυξης και να προσκολληθούν για τουλάχιστον 24 ώρες.

Για καλύτερη προσκόλληση και βιωσιμότητα μετά την απόψυξη των κυττάρων, συνιστούμε τη χρήση φιαλών ή πλακών με επικάλυψη κολλαγόνου για την αρχική σπορά μετά την κρυοανάκτηση. Η επίστρωση κολλαγόνου δεν απαιτείται για την επακόλουθη συνήθη καλλιέργεια των κυττάρων.

Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Ηλικία δωρητή
Έμβρυο