Премини към съдържанието
HEK293-VEGFR2
Тъкан
Фетален бъбрек
Заболяване
Трансформиран/увековечен; нетуморогенен (на базата на HEK293)
Синоними
HEK293/VEGFR2

Документи

HEK293-VEGFR2

Cell line · Номер на продукта 305990

Забележка: Показаните цени за клетъчните линии са предназначени изключително за академични/нестопански клиенти. За търговски субекти цените...

€1,900.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

Изработва се по поръчка
1

01Обща информация

Описание

Забележка: Посочените цени за клетъчните линии са валидни единствено за академични/нестопански клиенти. За търговски субекти цената е приблизително 6 250 евро.
Ако представлявате търговски субект или не сте сигурни в коя категория попадате, моля свържете се с нас.


Клетките HEK293-VEGFR2 са човешки ембрионални бъбречни клетки 293 (HEK293), модифицирани да експресират стабилно човешкия рецептор 2 на васкуларния ендотелиален растежен фактор (VEGFR2/KDR/Flk-1) – рецепторна тирозин киназа, която служи като основен медиатор на VEGF-управляваната ангиогенна сигнализация. VEGFR2 се експресира предимно върху ендотелните клетки и играе съществена роля в съдовото развитие, пролиферацията, миграцията, пропускливостта и оцеляването на ендотелните клетки чрез активиране на надолу по веригата пътища, включително сигналните каскади от семействата MAPK/ERK, PI3K/AKT, PLCγ и SRC. Дисрегулираната VEGFR2 сигнализация допринася за туморната ангиогенеза, възпалителното съдово ремоделиране и патологичната неоваскуларизация, което прави рецептора основна мишена в терапията на онкологични и съдови заболявания.

Клетките HEK293-VEGFR2 се използват широко в изследванията на ангиогенезата и откриването на лекарства за характеризиране на моноклонални антитела, насочени към VEGFR2, инхибитори на тирозин киназа, лигандни капани, биспецифични антитела и антиангиогенни биологични продукти. Стабилната рекомбинантна експресионна система поддържа количествена оценка на свързването на VEGF лиганда, фосфорилирането на рецептора, активирането на сигнализацията надолу по веригата, интернализацията на рецептора и потентността на инхибитора. Тези клетки също се използват често в репортерни тестове, проучвания на свързването, базирани на проточна цитометрия, тестове за киназна активност и работни потоци за терапевтичен скрининг с висока производителност. Тъй като HEK293 клетките поддържат стабилна експресия на рекомбинантни протеини и ефективно размножаване, те осигуряват надеждна платформа за разработване на стандартизирани VEGFR2 тестове и механистични проучвания на сигнализацията.

Тъкан
Фетален бъбрек
Заболяване
Трансформиран/увековечен; нетуморогенен (на базата на HEK293)
Приложения
Разработване на антитела, насочени срещу VEGFR2 (аналози на рамуцирумаб); изследвания в областта на ангиогенезата; ADCC/CDC тестове; проточна цитометрия; скрининг на антиангиогенна терапия; изследвания в областта на онкологията и офталмологията
Синоними
  • HEK293/VEGFR2

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Женски
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Статус на ГМО
GMO-S1
Подробности относно статуса на ГМО
GMO-S1: This HEK293 cell line contains a VEGFR2 (KDR/FLK-1) expression construct for vascular endothelial growth factor receptor studies and anti-angiogenic therapy development. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Подобни на епител
Тип клетка
Епителни клетки
Време за удвояване
около 24–36 часа

04Идентификатори

Източник
HEK293-VEGFR2 (каталожен номер на Cytion 305990)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_D7C3

05Проява и предразположеност

Експресирани рецептори
VEGFR2

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
RPMI 1640, w: 2,0 mM стабилен глутамин, w: 2,0 g/L NaHCO3 (номер на статията в Cytion 820700a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS, 1 mM натриев пируват, 10 mM HEPES, 1% NEAA. Добавете Geneticin (G418-Sulfat), за да достигнете крайна концентрация от 1 mg/ml.
Реагент за дисоциация
Трипсин-EDTA
Пресаждане
За рутинни адхезивни клетъчни култури: Аспирирайте старата хранителна среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, за да отстраните останалата среда. След като аспирирате PBS, добавете подходящия обем разтвор на трипсин/EDTA в зависимост от размера на съда за култивиране (напр. 1 ml за колба Т25, 3 ml за колба Т75) и инкубирайте при стайна температура или 37 °C, докато клетките се отделят (5-10 минути). Наблюдавайте отделянето под микроскоп и при необходимост леко потупайте съда, за да освободите клетките. След като се отделят, добавете пълна среда, за да инактивирате трипсина/EDTA, внимателно ресуспендирайте клетките и прехвърлете аликвотна част от клетъчната суспензия в нов съд за култивиране, съдържащ прясна среда. Поставете съда в инкубатор, настроен на 37 °C с 5 %CO2, и сменяйте средата на всеки 2-3 дни.
Коефициент на разделяне
от 1 до 5
Плътност на засяването
2 до 4 x 104 клетки/cm2
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Възстановяване след размразяване

След размразяването разделете клетките в съотношение 1:2 до 1:3 в колби Т25 и оставете клетките да се възстановят от процеса на замразяване и да се слепнат за поне 24 часа.

За най-добро прикрепване и жизнеспособност след размразяване на клетките препоръчваме да се използват колби или плаки с колагеново покритие за първоначалното посяване след криовъзстановяването. Колагеновото покритие не е необходимо за последващо рутинно култивиране на клетките.

Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
Плод