
- Chusteczka
- Nerka płodu
- Choroba
- Zmodyfikowane/unieśmiertelnione; nie wywołujące nowotworów (na tle komórek HEK293)
- Synonimy
- HEK293/VEGFR2
Dokumenty
HEK293-VEGFR2
Cell line · Numer produktu 305990
Zastrzeżenie: Podane ceny linii komórkowych dotyczą wyłącznie klientów akademickich i organizacji non-profit. W przypadku podmiotów komercyjnych ceny...
Dostosowanie / Zalecenia
- HEK293-VEGFR2Cell line€1,900.00
01Informacje ogólne
- Opis
Zastrzeżenie: Podane ceny linii komórkowych dotyczą wyłącznie klientów akademickich lub organizacji non-profit. Dla podmiotów komercyjnych cena wynosi około 6 250 euro.
Jeśli reprezentujesz podmiot komercyjny lub nie masz pewności, która kategoria ma zastosowanie, prosimy o kontakt.
Komórki HEK293-VEGFR2 to komórki ludzkiej embrionalnej nerki 293 (HEK293) zmodyfikowane genetycznie w celu stabilnej ekspresji ludzkiego receptora 2 czynnika wzrostu śródbłonka naczyniowego (VEGFR2/KDR/Flk-1), receptora kinazy tyrozynowej, który pełni rolę głównego mediatora sygnalizacji angiogenicznej stymulowanej przez VEGF. VEGFR2 jest wyrażany głównie na komórkach śródbłonka i odgrywa istotną rolę w rozwoju naczyń, proliferacji komórek śródbłonka, migracji, przepuszczalności i przeżywalności poprzez aktywację szlaków niższego rzędu, w tym kaskad sygnałowych rodzin MAPK/ERK, PI3K/AKT, PLCγ i SRC. Zaburzenia sygnalizacji VEGFR2 przyczyniają się do angiogenezy nowotworowej, zapalnej przebudowy naczyń i patologicznej neowaskularyzacji, co czyni ten receptor głównym celem w terapii onkologicznej i chorób naczyniowych.
Komórki HEK293-VEGFR2 są szeroko stosowane w badaniach nad angiogenezą i odkrywaniu leków do charakteryzowania przeciwciał monoklonalnych skierowanych przeciwko VEGFR2, inhibitorów kinazy tyrozynowej, pułapek ligandowych, przeciwciał bispecyficznych oraz leków biologicznych o działaniu antyangiogennym. Stabilny system ekspresji rekombinowanej umożliwia ilościową ocenę wiązania liganda VEGF, fosforylacji receptora, aktywacji sygnalizacji niższego rzędu, internalizacji receptora oraz siły działania inhibitorów. Komórki te są również powszechnie stosowane w testach reporterowych, badaniach wiązania opartych na cytometrii przepływowej, testach aktywności kinaz oraz procesach wysokoprzepustowego przesiewania terapeutycznego. Ponieważ komórki HEK293 umożliwiają solidną ekspresję białek rekombinowanych oraz wydajne namnażanie, stanowią one niezawodną platformę do opracowywania standardowych testów VEGFR2 oraz badań mechanizmów sygnalizacji.
- Chusteczka
- Nerka płodu
- Choroba
- Zmodyfikowane/unieśmiertelnione; nie wywołujące nowotworów (na tle komórek HEK293)
- Zastosowania
- Opracowywanie przeciwciał skierowanych przeciwko VEGFR2 (analogi ramucirumabu); badania nad angiogenezą; testy ADCC/CDC; cytometria przepływowa; badania przesiewowe terapii antyangiogennych; badania w dziedzinie onkologii i okulistyki
- Synonimy
- HEK293/VEGFR2
02Klasyfikacja
- Organizm
- Człowiek
- Seks
- Kobieta
- Właściwości związane ze wzrostem
- Zwolennik
- Status GMO
- GMO-S1
- Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
- GMO-S1: This HEK293 cell line contains a VEGFR2 (KDR/FLK-1) expression construct for vascular endothelial growth factor receptor studies and anti-angiogenic therapy development. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Poziom bezpieczeństwa biologicznego
- 1
03Cechy charakterystyczne
- Morfologia
- Podobny do nabłonka
- Typ komórki
- Komórki nabłonkowe
- Czas podwojenia
- ok. 24–36 godzin
04Identyfikatory
- Źródło
- HEK293-VEGFR2 (numer katalogowy Cytion 305990)
- Numer identyfikacji podatkowej NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_D7C3
05Ekspresja i podatność
- Receptory ulegające ekspresji
- VEGFR2
06Postępowanie i hodowla
- Pożywka hodowlana
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
- Atmosfera inkubacyjna
37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.
- Suplementy
- Uzupełnić pożywkę 10% FBS, 1 mM pirogronianu sodu, 10 mM HEPES, 1% NEAA. Dodać Geneticin (G418-Sulfat), aby osiągnąć końcowe stężenie 1 mg/ml.
- Odczynnik dysocjacyjny
- Trypsyna-EDTA
- Hodowla komórek w subkulturze
- W przypadku rutynowej hodowli komórek przylegających: Odessać starą pożywkę z przylegających komórek i przemyć je PBS w celu usunięcia pozostałości pożywki. Po odessaniu PBS, dodać odpowiednią objętość roztworu Trypsyna/EDTA w zależności od wielkości naczynia hodowlanego (np. 1 ml dla kolby T25, 3 ml dla kolby T75) i inkubować w temperaturze pokojowej lub 37°C do momentu odłączenia się komórek (5-10 minut). Monitoruj oderwanie pod mikroskopem i delikatnie postukaj w naczynie, jeśli to konieczne, aby uwolnić komórki. Po odłączeniu dodać pełną pożywkę w celu inaktywacji trypsyny/EDTA, delikatnie ponownie zawiesić komórki i przenieść porcję zawiesiny komórek do nowego naczynia hodowlanego zawierającego świeżą pożywkę. Umieść naczynie w inkubatorze ustawionym na 37°C z 5%CO2 i zmieniaj pożywkę co 2-3 dni.
- Współczynnik podziału
- od 1 do 5
- Gęstość wysiewu
- 2 do 4 x 104 komórek/cm2
- Odnawianie płynów
- 2 do 3 razy w tygodniu
- Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
Po rozmrożeniu podziel komórki w stosunku od 1:2 do 1:3 na kolby T25 i pozwól komórkom na regenerację po procesie zamrażania i przyleganie przez co najmniej 24 godziny.
Aby uzyskać najlepsze przyleganie i żywotność po rozmrożeniu komórek, zalecamy użycie kolb lub płytek pokrytych kolagenem do początkowego wysiewu po krioregeneracji. Powłoka kolagenowa nie jest wymagana do późniejszej rutynowej hodowli komórek.
- Rozmrażanie i hodowla
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kontrola jakości i kriokonserwacja
- Bezpłodność
Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.
Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.
- Pożywka do zamrażania
- Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
- Warunki przechowywania
W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.
- Warunki wysyłki
Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.
08Darczyńca
- Wiek dawcy
- Płód
09Kwestie prawne i bezpieczeństwo
- Środki bezpieczeństwa
- Planując przechowywanie kriofiolek w ciekłym azocie w celu ich późniejszego rozmrożenia, należy bezwzględnie przestrzegać rygorystycznych środków bezpieczeństwa. Niezbędne są odpowiednie rękawice i odzież ochronna, a podczas przenoszenia zamrożonych próbek do lub ze zbiornika z ciekłym azotem wymagane jest stosowanie maski lub okularów ochronnych. Ma to na celu zmniejszenie ryzyka obrażeń spowodowanych potencjalnymi eksplozjami kriowialu podczas wyjmowania, które mogą skutkować wyrzuceniem ostrych fragmentów.
- Gwarancja
W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu
Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym
- Obowiązują umowy z podmiotami zewnętrznymi
- Tak






.jpg)
