Langsung ke isi
HEK293-VEGFR2
Tisu
Ginjal Janin
Penyakit
Telah diubah/diabadikan; tidak bersifat tumorigenik (latar belakang sel HEK293)
Sinonim
HEK293/VEGFR2

HEK293-VEGFR2

Cell line · Nomor produk 305990

Penafian: Harga yang ditampilkan untuk lini sel hanya berlaku bagi pelanggan dari kalangan akademis/nirlaba. Bagi entitas komersial, harganya...

€1,900.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim

Penyesuaian / Rekomendasi

Dibuat sesuai pesanan
1

01Informasi umum

Deskripsi

Pernyataan Penolakan: Harga yang ditampilkan untuk garis sel ini khusus berlaku bagi pelanggan akademis/nirlaba. Bagi entitas komersial, harganya sekitar €6.250.
Jika Anda mewakili entitas komersial atau tidak yakin kategori mana yang berlaku, silakan hubungi kami.


Sel HEK293-VEGFR2 adalah sel ginjal embrio manusia 293 (HEK293) yang direkayasa untuk secara stabil mengekspresikan reseptor faktor pertumbuhan endotel vaskular manusia 2 (VEGFR2/KDR/Flk-1), sebuah reseptor tirosin kinase yang berfungsi sebagai mediator utama sinyal angiogenik yang didorong oleh VEGF. VEGFR2 terutama diekspresikan pada sel endotel dan memainkan peran esensial dalam perkembangan vaskular, proliferasi sel endotel, migrasi, permeabilitas, dan kelangsungan hidup melalui aktivasi jalur hilir termasuk kaskade sinyal MAPK/ERK, PI3K/AKT, PLCγ, dan keluarga SRC. Sinyal VEGFR2 yang terganggu berkontribusi pada angiogenesis tumor, remodeling vaskular inflamasi, dan neovaskularisasi patologis, menjadikan reseptor ini sebagai target utama dalam terapi onkologi dan penyakit vaskular.

Sel HEK293-VEGFR2 secara luas digunakan dalam penelitian angiogenesis dan penemuan obat untuk karakterisasi antibodi monoklonal yang menargetkan VEGFR2, inhibitor tirosin kinase, perangkap ligan, antibodi bispesifik, dan biologik anti-angiogenik. Sistem ekspresi rekombinan yang stabil ini mendukung evaluasi kuantitatif terhadap ikatan ligan VEGF, fosforilasi reseptor, aktivasi sinyal hilir, internalisasi reseptor, dan potensi inhibitor. Sel-sel ini juga sering digunakan dalam uji pelapor, studi ikatan berbasis sitometri aliran, uji aktivitas kinase, dan alur kerja skrining terapeutik berkapasitas tinggi. Karena sel HEK293 mendukung ekspresi protein rekombinan yang kuat dan perbanyakan yang efisien, sel-sel ini menyediakan platform yang andal untuk pengembangan uji VEGFR2 yang terstandarisasi dan studi mekanisme sinyal.

Tisu
Ginjal Janin
Penyakit
Telah diubah/diabadikan; tidak bersifat tumorigenik (latar belakang sel HEK293)
Aplikasi
Pengembangan antibodi yang menargetkan VEGFR2 (analog ramucirumab); penelitian angiogenesis; uji ADCC/CDC; sitometri aliran; penyaringan terapi anti-angiogenik; penelitian onkologi dan oftalmologi
Sinonim
  • HEK293/VEGFR2

02Klasifikasi

Organisme
Manusia
Seks
Perempuan
Sifat-sifat pertumbuhan
Pengikut
Status GMO
GMO-S1
Rincian status GMO
GMO-S1: This HEK293 cell line contains a VEGFR2 (KDR/FLK-1) expression construct for vascular endothelial growth factor receptor studies and anti-angiogenic therapy development. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Tingkat keamanan hayati
1

03Karakteristik

Morfologi
Seperti epitel
Jenis sel
Sel epitel
Waktu penggandaan
sekitar 24–36 jam

04Pengidentifikasi

Referensi
HEK293-VEGFR2 (Nomor katalog Cytion 305990)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_D7C3

05Ekspresi dan kerentanan

Reseptor yang diekspresikan
VEGFR2

06Penanganan dan budidaya

Media kultur
RPMI 1640, w: 2,0 mM Glutamin stabil, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Nomor artikel Cytion 820700a)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Lengkapi media dengan 10% FBS, 1 mM natrium piruvat, 10 mM HEPES, 1% NEAA. Tambahkan Geneticin (G418-Sulfat) untuk mencapai konsentrasi akhir 1 mg / mL.
Reagen disosiasi
Tripsin-EDTA
Perbanyakan sel
Untuk kultur sel yang melekat secara rutin: Aspirasi media kultur lama dari sel yang melekat, dan cuci dengan PBS untuk menghilangkan media yang tersisa. Setelah menyedot PBS, tambahkan volume larutan Trypsin/EDTA yang sesuai berdasarkan ukuran bejana kultur (misalnya, 1 ml untuk labu T25, 3 ml untuk labu T75) dan inkubasi pada suhu kamar atau 37 ° C hingga sel terlepas (5-10 menit). Pantau pelepasan di bawah mikroskop, dan ketuk bejana dengan lembut jika perlu untuk melepaskan sel. Setelah terlepas, tambahkan media lengkap untuk menonaktifkan Trypsin/EDTA, resuspensi sel dengan hati-hati, dan pindahkan alikuot suspensi sel ke dalam bejana kultur baru yang berisi media segar. Tempatkan bejana dalam inkubator yang diatur pada suhu 37°C dengan 5%CO2, dan ganti medium setiap 2-3 hari.
Rasio pemisahan
1 sampai 5
Kepadatan penanaman
2 hingga 4 x 10⁴ sel/cm²
Pergantian cairan
2 hingga 3 kali per minggu
Pemulihan pasca-pencairan

Setelah pencairan, pisahkan sel dengan rasio 1:2 hingga 1:3 dalam labu T25 dan biarkan sel pulih dari proses pembekuan dan melekat setidaknya selama 24 jam.

Untuk perlekatan dan viabilitas terbaik setelah pencairan sel, kami sarankan untuk menggunakan labu atau pelat yang dilapisi kolagen untuk penyemaian awal setelah pemulihan krio. Lapisan kolagen tidak diperlukan untuk kultur rutin sel selanjutnya.

Pencairan dan pembiakan
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

08Donatur

Usia donor
Janin