
- Tissu
- Rein fœtal
- Maladie
- Transformé/immortalisé ; non tumorigène (lignée HEK293)
- Synonymes
- HEK293/VEGFR2
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HEK293-VEGFR2
Cell line · Référence du produit 305990
Avertissement : les prix indiqués pour les lignées cellulaires s'adressent exclusivement aux clients du secteur universitaire ou à but non lucratif. Pour les entités commerciales, les prix...
Personnalisation / Recommandations
- HEK293-VEGFR2Cell line€1,900.00
01Informations générales
- Description
Avertissement : les prix indiqués pour les lignées cellulaires s'adressent exclusivement aux clients du secteur universitaire ou à but non lucratif. Pour les entités commerciales, le prix est d'environ 6 250 €.
Si vous représentez une entité commerciale ou si vous ne savez pas à quelle catégorie vous appartenez, veuillez nous contacter.
Les cellules HEK293-VEGFR2 sont des cellules rénales embryonnaires humaines 293 (HEK293) modifiées pour exprimer de manière stable le récepteur 2 du facteur de croissance endothélial vasculaire humain (VEGFR2/KDR/Flk-1), une tyrosine kinase réceptrice qui sert de médiateur principal de la signalisation angiogénique induite par le VEGF. Le VEGFR2 est principalement exprimé sur les cellules endothéliales et joue un rôle essentiel dans le développement vasculaire, la prolifération, la migration, la perméabilité et la survie des cellules endothéliales grâce à l'activation de voies en aval, notamment les cascades de signalisation des familles MAPK/ERK, PI3K/AKT, PLCγ et SRC. Une dérégulation de la signalisation du VEGFR2 contribue à l'angiogenèse tumorale, au remodelage vasculaire inflammatoire et à la néovascularisation pathologique, faisant de ce récepteur une cible majeure dans les traitements oncologiques et des maladies vasculaires.
Les cellules HEK293-VEGFR2 sont largement utilisées dans la recherche sur l'angiogenèse et la découverte de médicaments pour la caractérisation d'anticorps monoclonaux ciblant le VEGFR2, d'inhibiteurs de tyrosine kinase, de pièges à ligands, d'anticorps bispécifiques et de produits biologiques anti-angiogéniques. Le système d'expression recombinant stable permet l'évaluation quantitative de la liaison du ligand VEGF, de la phosphorylation du récepteur, de l'activation de la signalisation en aval, de l'internalisation du récepteur et de la puissance des inhibiteurs. Ces cellules sont également couramment utilisées dans les tests de reporter, les études de liaison par cytométrie en flux, les tests d'activité kinase et les workflows de criblage thérapeutique à haut débit. Comme les cellules HEK293 permettent une expression robuste de protéines recombinantes et une propagation efficace, elles constituent une plateforme fiable pour le développement de tests VEGFR2 standardisés et les études mécanistiques de la signalisation.
- Tissu
- Rein fœtal
- Maladie
- Transformé/immortalisé ; non tumorigène (lignée HEK293)
- Applications
- Développement d'anticorps ciblant le VEGFR2 (analogues du ramucirumab) ; recherche sur l'angiogenèse ; tests ADCC/CDC ; cytométrie en flux ; criblage de traitements anti-angiogéniques ; recherche en oncologie et en ophtalmologie
- Synonymes
- HEK293/VEGFR2
02Classification
- Organisme
- Humain
- Sexe
- Femme
- Propriétés de croissance
- Adepte
- Statut OGM
- GMO-S1
- Informations détaillées sur le statut OGM
- GMO-S1: This HEK293 cell line contains a VEGFR2 (KDR/FLK-1) expression construct for vascular endothelial growth factor receptor studies and anti-angiogenic therapy development. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Niveau de biosécurité
- 1
03Caractéristiques
- Morphologie
- De type épithélial
- Type de cellule
- Cellules épithéliales
- Temps de doublement
- environ 24 à 36 heures
04Identifiants
- Référence
- HEK293-VEGFR2 (référence Cytion 305990)
- Numéro d'identification fiscale NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_D7C3
05Expression et sensibilité
- Récepteurs exprimés
- VEGFR2
06Manipulation et culture
- Milieu de culture
- RPMI 1640, w : 2.0 mM Glutamine stable, w : 2.0 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820700a)
- Atmosphère d'incubation
37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.
- Compléments alimentaires
- Compléter le milieu avec 10 % de FBS, 1 mM de pyruvate de sodium, 10 mM de HEPES, 1 % de NEAA. Ajouter de la généticine (G418-Sulfat) pour obtenir une concentration finale de 1 mg/ml.
- Réactif de dissociation
- Trypsine-EDTA
- Repiquage
- Pour la culture de routine de cellules adhérentes : Aspirer l'ancien milieu de culture des cellules adhérentes et les laver avec du PBS pour éliminer tout milieu restant. Après avoir aspiré le PBS, ajouter le volume approprié de solution de Trypsine/EDTA en fonction de la taille du récipient de culture (par exemple, 1 ml pour un flacon T25, 3 ml pour un flacon T75) et incuber à température ambiante ou à 37°C jusqu'à ce que les cellules se détachent (5-10 minutes). Surveiller le détachement au microscope et tapoter doucement le récipient si nécessaire pour libérer les cellules. Une fois les cellules détachées, ajouter du milieu complet pour inactiver la trypsine/EDTA, remettre doucement les cellules en suspension et transférer une aliquote de la suspension cellulaire dans un nouveau récipient de culture contenant du milieu frais. Placer le récipient dans un incubateur réglé à 37°C avec 5% deCO2, et changer le milieu tous les 2-3 jours.
- Rapport de fractionnement
- 1 à 5
- Densité de semis
- 2 à 4 x 104 cellules/cm2
- Renouvellement des fluides
- 2 à 3 fois par semaine
- Récupération après le dégel
Après décongélation, diviser les cellules dans un rapport de 1:2 à 1:3 dans des flacons T25 et laisser les cellules se remettre du processus de congélation et adhérer pendant au moins 24 heures.
Pour un meilleur attachement et une meilleure viabilité après la décongélation des cellules, nous recommandons d'utiliser des flacons ou des plaques recouverts de collagène pour l'ensemencement initial après la cryo-récupération. L'enrobage de collagène n'est pas nécessaire pour la culture de routine ultérieure des cellules.
- Décongélation et mise en culture
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Contrôle qualité et cryoconservation
- Stérilité
La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.
Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.
- Milieu de congélation
- Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
- Conditions de stockage
Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.
- Conditions de livraison
Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.
08Donateur
- Âge du donneur
- Fœtus
09Aspects juridiques et sécurité
- Consignes de sécurité
- Lorsque l'on envisage de stocker un cryovial dans l'azote liquide en vue d'une décongélation ultérieure, il est obligatoire de respecter des mesures de sécurité rigoureuses. Des gants et des vêtements de protection appropriés sont indispensables, et l'utilisation d'un masque facial ou de lunettes de sécurité est requise pendant le transfert des échantillons congelés vers ou depuis le réservoir d'azote liquide. Ceci afin de réduire le risque de blessures dues à l'explosion potentielle des cryoviaux lors de leur retrait, qui peut entraîner la projection de fragments tranchants.
- Garantie
Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit
Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie
- Les accords conclus avec des tiers s'appliquent
- Oui






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