
- Audinys
- Vaisiaus inkstai
- Liga
- Transformuotas/imortalizuotas; nesukelia navikų (HEK293 fonas)
- Sinonimai
- HEK293/VEGFR2
Dokumentai
HEK293-VEGFR2
Cell line · Prekės numeris 305990
Atsakomybės apribojimas: Nurodytos ląstelių linijų kainos galioja tik akademiniams ir pelno nesiekiančioms organizacijoms. Komerciniams subjektams kainos...
Pritaikymas / Rekomendacijos
- HEK293-VEGFR2Cell line€1,900.00
01Bendra informacija
- Aprašymas
Atsakomybės apribojimas: Nurodytos ląstelių linijų kainos taikomos tik akademiniams ir nekomerciniams klientams. Komercinėms įmonėms kaina yra apie 6 250 EUR.
Jei atstovaujate komercinei įmonei arba nesate tikri, kuri kategorija jums taikoma, prašome susisiekti su mumis.
HEK293-VEGFR2 ląstelės yra žmogaus embrioninės inkstų 293 (HEK293) ląstelės, modifikuotos taip, kad stabiliai ekspresuotų žmogaus kraujagyslių endotelio augimo faktoriaus receptorių 2 (VEGFR2/KDR/Flk-1) – receptoriaus tirozino kinazę, kuri veikia kaip pagrindinis VEGF reguliuojamo angiogeninio signalizavimo mediatorius. VEGFR2 iš esmės ekspresuojamas endotelio ląstelėse ir atlieka esminį vaidmenį kraujagyslių vystymuisi, endotelio ląstelių proliferacijai, migracijai, pralaidumui ir išlikimui, aktyvuodamas pasroviui esančius signalizacijos kelius, įskaitant MAPK/ERK, PI3K/AKT, PLCγ ir SRC šeimos signalizacijos kaskadas. Sutrikusi VEGFR2 signalizacija prisideda prie naviko angiogenezės, uždegiminio kraujagyslių pertvarkymo ir patologinės neovaskuliarizacijos, todėl šis receptorius yra pagrindinis taikinys onkologijos ir kraujagyslių ligų terapijoje.
HEK293-VEGFR2 ląstelės plačiai naudojamos angiogenezės tyrimuose ir vaistų atradimuose, siekiant charakterizuoti į VEGFR2 nukreiptus monokloninius antikūnus, tirozino kinazės inhibitorius, ligandų gaudykles, bispecifinius antikūnus ir antiangiogeninius biologinius preparatus. Stabili rekombinantinė ekspresijos sistema leidžia kiekybiškai įvertinti VEGF ligando prisijungimą, receptoriaus fosforilinimą, pasroviui einančių signalų aktyvaciją, receptoriaus internalizaciją ir inhibitorių stiprumą. Šios ląstelės taip pat dažnai naudojamos reporterinių tyrimų, srauto citometrijos pagrįstų prisijungimo tyrimų, kinazės aktyvumo tyrimų ir didelio našumo terapinių atrankos procesų metu. Kadangi HEK293 ląstelės užtikrina patikimą rekombinantinių baltymų ekspresiją ir veiksmingą dauginimąsi, jos sudaro patikimą platformą standartizuotų VEGFR2 tyrimų kūrimui ir mechanistiniams signalizacijos tyrimams.
- Audinys
- Vaisiaus inkstai
- Liga
- Transformuotas/imortalizuotas; nesukelia navikų (HEK293 fonas)
- Paraiškos
- VEGFR2 taikinį turinčių antikūnų kūrimas (ramucirumabo analogai); angiogenezės tyrimai; ADCC/CDC tyrimai; srauto citometrija; antiangiogeninės terapijos atranka; onkologijos ir oftalmologijos tyrimai
- Sinonimai
- HEK293/VEGFR2
02Klasifikacija
- Organizmas
- Žmogus
- Seksas
- Moteris
- Augimo savybės
- Prisijungęs
- GMO statusas
- GMO-S1
- Išsami informacija apie GMO statusą
- GMO-S1: This HEK293 cell line contains a VEGFR2 (KDR/FLK-1) expression construct for vascular endothelial growth factor receptor studies and anti-angiogenic therapy development. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biologinio saugumo lygis
- 1
03Charakteristikos
- Morfologija
- Į epitelį panašus
- Ląstelių tipas
- Epitelio ląstelės
- Laikas, per kurį skaičius padvigubėja
- maždaug 24–36 valandos
04Identifikatoriai
- Nuoroda
- HEK293-VEGFR2 (Cytion katalogo numeris 305990)
- NCBI mokesčių identifikavimo kodas
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_D7C3
05Išraiška ir jautrumas
- Išreikšti receptoriai
- VEGFR2
06Laikymas ir auginimas
- Maitinamoji terpė
- RPMI 1640, š: 2,0 mM stabilus glutaminas, š: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820700a)
- Inkubacijos aplinka
37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.
- Maisto papildai
- Papildykite terpę 10 % FBS, 1 mM natrio piruvatu, 10 mM HEPES, 1 % NEAA. Pridėkite geneticino (G418-Sulfat), kad galutinė koncentracija būtų 1 mg/ml.
- Disociacijos reagentas
- Trypsino ir EDTA
- Subkultūrinis auginimas
- Įprastinėms adherentinėms ląstelių kultūroms: Kad pašalintumėte visą likusią terpę, iš adherentinių ląstelių išsiurbkite seną terpę ir nuplaukite jas PBS. Išsiurbę PBS, įpilkite reikiamą kiekį tripsino ir EDTA tirpalo, atsižvelgiant į kultūros indo dydį (pvz., 1 ml T25 kolbai, 3 ml T75 kolbai), ir inkubuokite kambario arba 37 °C temperatūroje, kol ląstelės atsiskirs (5-10 min.). Stebėkite atsiskyrimą per mikroskopą ir, jei reikia, švelniai palieskite indą, kad ląstelės išsilaisvintų. Kai ląstelės atsiskiria, įpilkite pilną terpę, kad būtų inaktyvuotas tripsinas/EDTA, atsargiai reuspenduokite ląsteles ir perkelkite alikvotą ląstelių suspensijos į naują auginimo indą su šviežia terpe. Įstatykite indą į inkubatorių, kuriame nustatyta 37 °C temperatūra ir 5 %CO2, o terpę keiskite kas 2-3 dienas.
- Skaidymo santykis
- 1–5
- Sėjos tankis
- 2–4 x 104 ląstelės/cm2
- Skysčių atnaujinimas
- 2-3 kartus per savaitę
- Atkūrimas po atšilimo
Po atšildymo padalykite ląsteles santykiu 1:2-1:3 į T25 kolbas ir leiskite ląstelėms atsigauti po užšaldymo proceso bei sukibti bent 24 valandas.
Kad ląstelės geriausiai prisitvirtintų ir būtų gyvybingos po atšildymo, rekomenduojame naudoti kolagenu dengtas kolbas arba plokšteles pradiniam pasėjimui po atšildymo. Vėliau įprastai auginant ląsteles kolagenu dengti nereikia.
- Atšildymas ir auginimas
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas
- Sterilumas
Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.
Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.
- Šaldymo terpė
- Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
- Laikymo sąlygos
Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.
- Pristatymo sąlygos
Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.
08Donoras
- Donoro amžius
- Vaisius
09Teisiniai ir saugos klausimai
- Saugos priemonės
- Planuojant saugoti kriovaistinę skystame azote, kad ateityje ją būtų galima atšildyti, būtina laikytis griežtų saugos priemonių. Būtina mūvėti tinkamas apsaugines pirštines ir drabužius, o perkeliant užšaldytus mėginius į skystojo azoto talpyklą arba iš jos būtina naudoti veido kaukę arba apsauginius akinius. Taip siekiama sumažinti sužeidimų riziką dėl galimo kriokomponentų sprogimo išėmimo metu, kai gali išsiveržti aštrūs fragmentai.
- Garantija
" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas
Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime
- Taikomos susitarimai su trečiosiomis šalimis
- Taip






.jpg)
