HEK293-VEGFR2

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Le cellule HEK293-VEGFR2 sono cellule renali embrionali umane 293 (HEK293) ingegnerizzate per esprimere in modo stabile il recettore 2 del fattore di crescita endoteliale vascolare umano (VEGFR2/KDR/Flk-1), una tirosin-chinasi recettoriale che funge da mediatore principale della segnalazione angiogenica guidata dal VEGF. Il VEGFR2 è espresso principalmente sulle cellule endoteliali e svolge un ruolo essenziale nello sviluppo vascolare, nella proliferazione, migrazione, permeabilità e sopravvivenza delle cellule endoteliali attraverso l'attivazione di vie a valle, tra cui le cascate di segnalazione delle famiglie MAPK/ERK, PI3K/AKT, PLCγ e SRC. La segnalazione del VEGFR2 disregolata contribuisce all'angiogenesi tumorale, al rimodellamento vascolare infiammatorio e alla neovascolarizzazione patologica, rendendo il recettore un bersaglio principale nelle terapie oncologiche e per le malattie vascolari.

Le cellule HEK293-VEGFR2 sono ampiamente utilizzate nella ricerca sull'angiogenesi e nella scoperta di farmaci per la caratterizzazione di anticorpi monoclonali mirati al VEGFR2, inibitori della tirosin-chinasi, trappole per ligandi, anticorpi bispecifici e prodotti biologici anti-angiogenici. Il sistema di espressione ricombinante stabile supporta la valutazione quantitativa del legame del ligando VEGF, della fosforilazione del recettore, dell'attivazione della segnalazione a valle, dell'internalizzazione del recettore e della potenza dell'inibitore. Queste cellule sono anche comunemente impiegate in saggi reporter, studi di legame basati sulla citometria a flusso, saggi di attività chinasi e flussi di lavoro di screening terapeutico ad alta produttività. Poiché le cellule HEK293 supportano una robusta espressione di proteine ricombinanti e una propagazione efficiente, forniscono una piattaforma affidabile per lo sviluppo di saggi VEGFR2 standardizzati e studi meccanicistici sulla segnalazione.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

Dopo lo scongelamento, dividere le cellule in un rapporto da 1:2 a 1:3 in fiasche T25 e lasciare che le cellule si riprendano dal processo di congelamento e aderiscano per almeno 24 ore.

Per ottenere una migliore adesione e vitalità dopo lo scongelamento delle cellule, si consiglia di utilizzare fiasche o piastre rivestite di collagene per la semina iniziale dopo il crio-recupero. Il rivestimento in collagene non è necessario per la successiva coltura di routine delle cellule.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia