Mine otse sisu juurde
HEK293-VEGFR2
Kude
Loote neerud
Haigus
Muundatud/immortaliseeritud; ei põhjusta kasvajate teket (HEK293-taust)
Sünonüümid
HEK293/VEGFR2

Dokumendid

HEK293-VEGFR2

Cell line · Toote number 305990

Vastutusest loobumine: Rakuliinide juures näidatud hinnad kehtivad ainult akadeemilistele ja mittetulunduslikele klientidele. Äriühingute puhul on hinnad...

€1,900.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Tellimusel valmistatud
1

01Üldine teave

Kirjeldus

Vastutuse välistamine: Rakuliinide juures näidatud hinnad kehtivad ainult akadeemilistele ja mittetulunduslikele klientidele. Äriühingute puhul on hind umbes 6250 eurot.
Kui esindate äriühingut või ei ole kindel, milline kategooria teie puhul kehtib, palun võtke meiega ühendust.


HEK293-VEGFR2 rakud on inimese embrüonaalsed neeru 293 (HEK293) rakud, mis on geneetiliselt muundatud stabiilselt ekspresseerima inimese vaskulaarset endoteeli kasvufaktori retseptorit 2 (VEGFR2/KDR/Flk-1), retseptori türosiinkinaasi, mis toimib VEGF-i poolt juhitava angiogeense signaalimise peamise vahendajana. VEGFR2 ekspresseerub peamiselt endoteelrakkudes ja mängib olulist rolli veresoonte arengus, endoteelrakkude proliferatsioonis, rändes, läbilaskvuses ja ellujäämises, aktiveerides allavoolu signaaliteid, sealhulgas MAPK/ERK, PI3K/AKT, PLCγ ja SRC perekonna signaalikaskadeid. VEGFR2 signaalimise häired soodustavad tuumori angiogeneesi, põletikulist veresoonte ümberkujundamist ja patoloogilist neovaskularisatsiooni, mistõttu on retseptor oluline sihtmärk onkoloogias ja veresoonkonna haiguste ravis.

HEK293-VEGFR2 rakke kasutatakse laialdaselt angiogeneesi uurimisel ja ravimite väljatöötamisel VEGFR2-le suunatud monoklonaalsete antikehade, türosiinkinaasi inhibiitorite, ligandi püüdurite, bispetsiifiliste antikehade ja antiangiogeensete bioloogiliste ravimite iseloomustamiseks. Stabiilne rekombinantne ekspressioonisüsteem toetab VEGF-ligandi seondumise, retseptori fosforüleerimise, allavoolu signaalimise aktiveerimise, retseptori internaliseerimise ja inhibiitori potentsi kvantitatiivset hindamist. Neid rakke kasutatakse ka sageli reporteranalüüsides, voolutsütomeetrial põhinevates seondumisuuringutes, kinaasi aktiivsuse analüüsides ja suure läbilaskevõimega terapeutilistes sõelumisprotsessides. Kuna HEK293-rakud toetavad tugevat rekombinantse valgu ekspressiooni ja tõhusat paljunemist, pakuvad nad usaldusväärset platvormi standardiseeritud VEGFR2-analüüside arendamiseks ja signaalimismehhanismide uuringuteks.

Kude
Loote neerud
Haigus
Muundatud/immortaliseeritud; ei põhjusta kasvajate teket (HEK293-taust)
Rakendused
VEGFR2-le suunatud antikehade arendamine (ramucirumabi analoogid); angiogeneesi uurimine; ADCC/CDC-analüüsid; voolutsütomeetria; antiangiogeense ravi sõelumine; onkoloogia- ja oftalmoloogiauuringud
Sünonüümid
  • HEK293/VEGFR2

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-S1
GMO-staatuse üksikasjad
GMO-S1: This HEK293 cell line contains a VEGFR2 (KDR/FLK-1) expression construct for vascular endothelial growth factor receptor studies and anti-angiogenic therapy development. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Rakutüüp
Epiteelirakud
Kahekordistumisaeg
u. 24–36 tundi

04Tunnused

Viide
HEK293-VEGFR2 (Cytioni katalooginumber 305990)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_D7C3

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Ekspresseeritud retseptorid
VEGFR2

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendage keskkonda 10% FBS-iga, 1 mM naatriumpüruvaadiga, 10 mM HEPES-iga, 1% NEAA-ga. Lisage geneetilistiini (G418-Sulfat), et saavutada lõplik kontsentratsioon 1 mg/ml.
Dissotsiatsioonireaktiiv
Trypsin-EDTA
Kultuuri edasikasvatamine
Rutiinseks adherentseks rakukultuuriks: Aspireerige adhereeruvatelt rakkudelt vana kultuurkeskkond ja peske neid PBS-ga, et eemaldada allesjäänud keskkond. Pärast PBS-i aspiratsiooni lisage sobiv kogus trüpsiini/EDTA lahust vastavalt kasvatusanuma suurusele (nt 1 ml T25 kolvi puhul, 3 ml T75 kolvi puhul) ja inkubeerige toatemperatuuril või 37 °C, kuni rakud eralduvad (5-10 minutit). Jälgige rakkude eraldumist mikroskoobi all ja koputage vajadusel õrnalt anumat, et rakud eralduksid. Kui rakud on eraldunud, lisage trüpsiini/EDTA inaktiveerimiseks täielikku söötmeainet, suspenseerige rakud ettevaatlikult uuesti ja kandke rakususpensiooni alikvoot uude, värsket söötmeainet sisaldavasse kasvatusanumasse. Asetage anum inkubaatorisse, mille temperatuur on 37 °C ja 5%CO2, ning vahetage söötme iga 2-3 päeva tagant.
Jagamissuhe
1–5
Külvitihedus
2 kuni 4 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist

Pärast sulatamist jagage rakud 1:2 kuni 1:3 T25 kolvidesse ja laske rakkudel taastuda külmutamisprotsessist ning lasta neil vähemalt 24 tunni jooksul kokku kleepuda.

Parima kinnitumise ja elujõulisuse saavutamiseks pärast rakkude sulatamist soovitame kasutada kollageeniga kaetud kolbisid või plaate, et pärast külmutamist algselt külvata. Kollageeniga katmine ei ole vajalik rakkude hilisemaks rutiinseks kasvatamiseks.

Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
Loote