Mine otse sisu juurde

Meedia ja reagendid

40 tooted

Insulin, Human recombinant, Solution (5 mg/ml)

Volume: 5 ml Storage: +2°C to +8°C Sterility: Sterile-filtered Insulin Human Recombinant Solution is a chemically defined supplement commonly used for the cultivation of mammalian cell lines, including Chinese Hamster Ovary (CHO) cells. This cell culture–grade solution contains recombinant human insulin expressed in Saccharomyces cerevisiae, ensuring high purity and consistent performance in research applications. Application and Benefits Insulin is routinely added to serum-free and chemically defined media to promote cell growth and productivity. As a key regulatory hormone, insulin supports cellular uptake, utilization, and storage of glucose, amino acids, and fatty acids. It also inhibits the breakdown of glycogen, proteins, and lipids, thereby contributing to improved cell viability and metabolic stability in culture systems. The chemically defined formulation supports reproducibility and minimizes variability in sensitive cell culture workflows. Biological Properties and Usage Insulin is a two-chain polypeptide hormone naturally produced by the β-cells of the pancreatic islets. It has a molecular weight of approximately 5,800 Da. The α- and β-chains are linked by two interchain disulfide bonds, and the α-chain contains one intrachain disulfide bond. For cell culture applications, the solution should be handled under aseptic conditions and stored at +2°C to +8°C to maintain stability and performance. For research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures. Not for use in humans or animals.

€109.00

ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Insulin-Transferrin-Selenium (ITS), Solution 100x

Volume: 10 ml Storage: +2°C to +8°C Sterility: Sterile-filtered Insulin-Transferrin-Selenium (ITS) Solution (100x) is a chemically defined supplement designed for a wide range of cell culture applications. It is most commonly used as an additive to basal cell culture media to support cell growth under reduced-serum or serum-free conditions. Application and Benefits Our ITS supplement provides essential components required for the optimal performance of serum-free media. By supplementing conventional nutrient media with ITS, the fetal bovine serum (FBS) requirement for the routine maintenance of many cell lines can be significantly reduced. This helps minimize variability associated with serum use while maintaining consistent cell growth and viability. Insulin supports cellular uptake and metabolism of key nutrients, transferrin facilitates iron transport, and selenium contributes to antioxidant defense and enzymatic activity. Together, these components promote balanced cell metabolism and improved reproducibility in defined culture systems. Formulation and Usage Insulin-Transferrin-Selenium (ITS) is supplied as a 100x concentrated solution in Earle's Balanced Salt Solution (EBSS) without phenol red. For standard applications, dilute 1:100 into the appropriate basal medium to achieve the recommended working concentration. Store at +2°C to +8°C and handle under aseptic conditions to maintain product stability and sterility. For research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures. Not for use in humans or animals.

€59.00

ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Cytion Mammary epithelial growth medium, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes and vials, REF 850185

Rinnapiirkonna epiteelirakkude kasvatuskeskkond

Rinnapiirkonna epiteelirakkude kasvukeskkond on seerumivaba keskkond inimese rinnapiirkonna epiteelirakkude kultiveerimiseks. Pakume seda keskkonda 500 ml baaskeskkonnana, kas eraldi või koos lisanditega, kas üksikute komponentidena või eelnevalt segatud lisandiseguna. Eraldi komponentide kasutamine võimaldab üksikuid tegureid kohandada või välja jätta, samas kui lisandisegu lisatakse ühe toiminguga. Kasutamiseks on vaja lisandeid ning eraldi lisandikomponente on saadaval ka eraldi.

€280.00

ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

McCoys 5A keskmise koostisega (modifitseeritud) keskkond: glükoos 3,0 g/l, glutamiin stabiilne, naatriumpüruvaat 2,0 mM, NaHCO₃ 2,2 g/l

McCoy's 5A Medium on väga soovitatav ja spetsialiseeritud kasvukeskkond, mis on loodud viiruste kasvu ja paljunemise soodustamiseks primaarrakkude kultuurides. See on pälvinud märkimisväärset tunnustust oma erakordse tõhususe poolest mitmesugustes bioloogilistes uurimisrakendustes. Üks McCoy's 5A keskkonna silmapaistev rakendus on selle kasutamine inimese käärsoolekartsinoomi rakuliinide kasvatamisel. Täpsemalt on seda kasutatud leutsiinirikkaid kordusi sisaldava G-valgu-seotud retseptori (LGR5) uurimisel ja selle rolli uurimisel käärsoolevähi metastaaside tekkes. Seda keskkonda on tõhusalt kasutatud mitmete käärsoolekartsinoomi rakuliinide, sealhulgas HCT116, RKO, FET, CBS, HCT116b ja TENN, kasvatamisel, võimaldades teadlastel süveneda käärsoolevähi metastaaside aluseks olevatesse mehhanismidesse. Lisaks rakendamisele vähiuuringutes on McCoy 5A-keskkond osutunud asendamatuks osteoblastide uurimisel. Teadlased, kes uurivad kaltsiumivaese hüdroksüapatiidi ioonireaktiivsust standardsetes rakukultuurikeskkondades, on kasutanud seda keskkonda osteoblastide kasvatamiseks. See rakendus on aidanud paremini mõista osteoblastide ja kaltsiumivaese hüdroksüapatiidi vahelisi vastasmõjusid, aidates kaasa edusammudele luu-uuringute valdkonnas. McCoy 5A-keskkond töötati hoolikalt välja, muutes Basal Medium Eagle’is leiduvaid aminohappeid, et pakkuda maksavähi rakkudele optimaalset toetust. See rikastatud koostis muudab selle sobivaks mitmesuguste väljakujunenud rakuliinide, aga ka primaarrakkude jaoks, suurendades veelgi selle mitmekülgsust ja rakendatavust erinevates uurimiskeskkondades. McCoy 5A keskkonna biokeemilised ja füsioloogilised mõjud ulatuvad kaugemale maksavähi rakkudest. Seda on edukalt kasutatud luuüdi, naha, igeme, neeru, omentumi, neerupealise, kopsu, põrna, roti embrüo ja muude rakutüüpide esmaste kultuuride kasvu toetamiseks. See lai kasutusala tõendab McCoy 5A keskkonna laialdast kasulikkust erinevate rakutüüpide kasvu toetamisel ja säilitamisel põhjalike bioloogiliste uuringute jaoks. Koostis See McCoy 5A keskkond (modifitseeritud) sisaldab 3,0 g/l glükoosi, stabiilset glutamiini, 2,0 mM naatriumpüruvaati ja 2,2 g/l NaHCO3. Kvaliteedikontroll • pH = 7,2 ± 0,02 temperatuuril 20–25 °C. • Iga partii on kontrollitud steriilsuse ning mükoplasma ja bakterite puudumise suhtes. Säilitamine • Hoida pimedas külmikus temperatuuril +2–+8 °C. Külmutamine ja soojendamine temperatuurini +37 °C halvendavad toote kvaliteeti. • Ärge kuumutage keskkonda üle 37 °C ega kasutage kontrollimatuid soojusallikaid (nt mikrolaineahju). • Kui kasutatakse ainult osa keskkonnast, võtke see kogus pudelist välja ja soojendage seda toatemperatuuril. • Kõigi keskkondade, välja arvatud põhikeskkonna, kõlblikkusaeg on 6–8 nädalat alates avamiskuupäevast. Koostis Komponendid mg/l Anorgaanilised sooladKaltsiumkloriid x 2H₂O132,00 Magneesiumsulfaat97,67 Kaaliumkloriid400,00 Naatriumkloriid6 460,00 Dinatriumvesinikfosfaat (veevaba)504,00 Muud koostisosadD(+)-glükoos (veevaba)3 000,00 Glutatioon (redutseeritud)0,50 Lihapepton600,00 Fenoolpunase naatriumsool11,00 AminohappedL-alaniin13,36 L-arginiin x HCl42,14 L-asparagiin x H₂O45,03 L-asparagiinhape19,97 L-tsüsteiin x HCl x H₂O31,75 L-glutamiin (stabiilne)219,15 L-glutamiinhape22,07 Glütsiin7,51 L-histidiin x HCl x H₂O20,96 L-hüdroksüproliin19,67 L-isoleutsiin39,36 L-leutsiin39,36 L-lüsiin x HCl36,54 L-metioniin14,92 L-fenüülalaniin16,52 L-proliin17,27 L-seriin26,28 L-treoniin17,87 L-trüptofaan3,06 L-türosiini dinaatriumsool26,10 L-valiin17,57 Vitamiinidp-aminobensoehape1,00 Askorbiinhape0,56 D(+)-biotiin0,20 D-kaltsiumpantotenaat0,20 Koliinkloriid5,00 Foolhape10,00 müo-inositool36,00 Nikotiinamiid0,50 Nikotiinhape0,50 Püridoksaal-HCl0,50 Püridoksiin-HCl0,50 Riboflaviin0,20 Tiamiin-HCl0,20 B12-vitamiin2,00

€30.00

ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Keskmine 199, sisaldab: 2,7 mM stabiilset glutamiini, sisaldab: 2,2 g/l NaHCO₃, sisaldab: EBSS

Medium 199 on mitmekülgne ja laialdaselt kasutatav rakukultuurikeskkonna, mis on spetsiaalselt välja töötatud primaarsete eksplantaatide kasvatamiseks. See terviklik keskkond ühendab endas olulisi vitamiine, aminohappeid ja muid tegureid, pakkudes täielikult määratletud toitainete allikat mitmesugustele rakutüüpidele. See sobib eriti hästi mittetransformeeritud rakkudele, mistõttu on see hindamatu abivahend bioloogilistes uuringutes. Keskkonna 199 rakendusvõimalused on selles valdkonnas laiaulatuslikud. Sellega on võimalik tõhusalt säilitada kumulus-ootsüütide kompleksi (COC) ja toetada ootsüütide in vitro küpsemist. Lisaks kasutatakse seda aspiratsioonitorude loputamiseks saksa holsteini lehmade munarakkude kogumisel. Veelgi enam, Medium 199 on suurepärane kasvukeskkond rottidelt saadud südame endoteelrakkude kasvatamiseks. Need rakendused näitavad Medium 199 mitmekülgsust ja kohanemisvõimet erinevate eksperimentaalsete vajadustega. Ajalugu Keskkonna 199 väljatöötamine 1950. aastatel tähistas olulist edasiminekut koekultuurikeskkonna valdkonnas. Enne selle kasutuselevõttu tuginesid paljud kultuurikeskkonnad loomset päritolu toodetele ja koekstraktidele. Morgan ja tema kolleegid aga pöörasid selle valdkonna pea peale, töötades välja täielikult määratletud toitainete allika rakukultuuridele. Erinevaid vitamiinide, aminohapete ja muude tegurite kombinatsioone hõlmavate katsete käigus avastasid nad Medium 199 erakordsed kasvu soodustavad omadused. Kvaliteedikontroll • pH = 7,2 ± 0,02 temperatuuril 20–25 °C. • Iga partii on kontrollitud steriilsuse ning mükoplasma ja bakterite puudumise suhtes. Säilitamine • Hoida pimedas külmikus temperatuuril +2–+8 °C. Külmutamine ja soojendamine temperatuurini +37 °C vähendavad toote kvaliteeti. • Ärge kuumutage keskkonda üle 37 °C ega kasutage kontrollimatuid soojusallikaid (nt mikrolaineahju). • Kui kasutatakse vaid osa keskkonnast, võtke see kogus pudelist välja ja soojendage seda toatemperatuuril. • Kõigi keskkondade, välja arvatud põhikeskkonna, kõlblikkusaeg on 8 nädalat alates tootmiskuupäevast. Koostis Koostisosad mg/l Anorgaanilised soolad Kaltsiumkloriid x 2H₂O 264,92 Raud(III)nitraat x 9H₂O 0,72 Magneesiumsulfaat 97,67 Kaaliumkloriid 400,00 Na-atsetaat x 3H₂O 82,95 Naatriumkloriid 6 800,00 Na-divesinikfosfaat x H₂O 140,00 Muud koostisosad Adeniinsulfaat 10,00 AMP 0,20 ATP 1,00 Kolesterool 0,20 2'-desoksüriboos 0,50 D(+)-glükoos, veevaba 1,000,00 Glutatioon (red.) 0,05 Guaaniin x HCl 0,30 Hüpoksantiin 0,30 Fenoolpunane 10,00 D-riboos 0,50 Tümiin 0,30 Tween 80 4,90 Urasüül 0,30 Ksantiin 0,30 NaHCO₃ 2 200,00 Aminohapped L-alaniin 25,00 L-arginiin x HCl 70,00 L-asparagiinhape 30,00 L-tsüsteiin x HCl x H₂O 0,10 L-tsüstiin 20,00 Stabiilne L-glutamiin 149,00 L-glutamiinhape 67,00 Glütsiin 50,00 L-histidiin x HCl x H₂O 21,88 L-hüdroksüproliin 10,00 L-isoleutsiin 20,00 L-leutsiin 60,00 L-lüsiin x HCl 70,00 L-metioniin 15,00 L-fenüülalaniin 25,00 L-proliin 40,00 L-seriin 25,00 L-treoniin 30,00 L-trüptofaan 10,00 L-türosiin 40,00 L-valiin 25,00 Vitamiinid 4-aminobensoehape 0,05 Askorbiinhape 0,05 D(+)-biotiin 0,01 Kaltsiferool 0,10 D-kaltsiumpantotenaat 0,01 Koliinkloriid 0,50 Foolhape 0,01 müo-inositool 0,05 Menadioon 0,01 Nikotiinhape 0,025 Nikotiinamiid 0,025 Püridoksaal x HCl 0,025 Püridoksol x HCl 0,025 Riboflaviin 0,01 DL-α-tokoferoolfosfaadi dinaatriumsool 0,01 Tiamiin x HCl 0,01 A-vitamiini atsetaat 0,14

€40.00

ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Cytion Melanocyte growth medium, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes and vials, REF 850155

Melanotsüütide kasvukeskkond

Melanotsüütide kasvukeskkond on seerumivaba keskkond inimese epidermise melanotsüütide kasvatamiseks. Täielik keskkond sisaldab L-glutamiini, veise hüpofüüsi ekstrakti (BPE), inimese rekombinantse bFGF-i, hüdrokortisooni, inimese rekombinantse insuliini ja PMA-d. Pakume keskkonda 500 ml baaskeskkonnana, eraldi või koos lisanditega, kas üksikute komponentidena või eelnevalt segatud lisandiseguna. Üksikute komponentide kasutamine võimaldab üksikuid tegureid kohandada või välja jätta, samas kui lisandisegu lisatakse ühe toiminguga. Kasutamiseks on vaja lisandeid ning mõlemat lisandevormi on saadaval ka eraldi.

€270.00

ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Cytion Microvascular endothelial cell growth medium, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes and vials, REF 850013

Mikrovaskulaarsete endoteelirakkude kasvukeskkond

Mikrovaskulaarsete endoteelirakkude kasvukeskkonda kasutatakse inimese mikrovaskulaarsete endoteelirakkude, näiteks nahapõhimikust, kopsust või südamest pärit rakkude kultiveerimiseks. Täielik kasvukeskkond sisaldab loote vasikaserumit, L-glutamiini, ECGS/H-d (hepariiniga endoteelirakkude kasvu lisandit), EGF-i ja hüdrokortisooni. Määratletud rekombinantseid kasvufaktoreid, sealhulgas VEGF-i, kasutamiseks valige Advanced mikrovaskulaarsete endoteelirakkude kasvukeskkond. Pakume keskkonda 500 ml baaskeskkonnana, eraldi või koos lisanditega, kas üksikute komponentidena või eelnevalt segatud lisandiseguna. Eraldi komponendid võimaldavad üksikuid kasvufaktoreid kohandada või välja jätta, samas kui lisandisegu lisatakse ühe sammuga. Põhikeskkond on saadaval ka fenoolpunavaba versioonina samades pakendites, mis välistab interferentsi fluorestsents- ja kolorimeetriliste mõõtmistega ning fenoolpunase nõrga östrogeenilaadse toime. Kasutamiseks on vaja lisandeid, ja mõlemat lisandivormi on saadaval ka eraldi. Pärast lisandite lisamist sisaldab valmis keskkond 5 % FCS-i (25 ml 500 ml baaskeskkonna kohta).

€180.00

ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

NCI-H295R rakkude kasvatuskeskkond

Tutvuge täiustatud NCI-H295R rakukasvukeskkonnaga – asjatundlikult koostatud toitainelahusega, mis on spetsiaalselt välja töötatud imetajate rakuliinide, sealhulgas spetsialiseeritud NCI-H295R-rakkude kasvu soodustamiseks ja säilitamiseks. See kasvukeskkond paistab silma oma unikaalse Dulbecco modifitseeritud Eagle’i keskkonna (DMEM) ja Ham’i F-12 (toitainete segu F-12) seguga täpses 1:1 suhtes, mis on rikastatud oluliste lisanditega, et rahuldada rakukultuuri keerukaid vajadusi. Täiustatud koostis tagab parema rakukultuuri tulemuslikkuse • Täiendatud baaskoostis: Baaskeskkond on juba rikkalik, ühendades DMEM-i kõrgeid aminohappe- ja vitamiinikontsentratsioone Ham's F-12 mitmekesiste toitainetega. Sellele võimsale segule oleme lisanud 5% loote veise seerumit (FBS), mis pakub olulisi kasvufaktoreid, hormoone ja valke. • Kohandatud lisandid: Lisaks FBS-ile on see keskkond rikastatud oluliste lisanditega, sealhulgas insuliini, transferriini, veise seerumalbumiini, seleenhappega ja linoleenhappega. Need lisandid rahuldavad spetsiifilisi rakulisi vajadusi, soodustades rakkude kasvu, ainevahetust ja üldist tervist. • L-glutamiini lisamine: L-glutamiini sisaldus suurendab veelgi keskkonna tõhusust, toetades olulisi ainevahetusprotsesse ja soodustades tugevat rakkude paljunemist. Optimeeritud rakukultuuriks • pH-kontrollitud keskkond: Bikarbonaatpuhversüsteemi ja fenoolpunase indikaatori abil tagab keskkond stabiilse pH-taseme. See on optimeeritud 5% CO₂ sisaldusega keskkonnale, võimaldades täpset pH-taseme jälgimist ja reguleerimist. • Kvaliteet ja puhtus: Iga põhikeskkonna partii läbib ranged steriilsuse, mükoplasma ja bakterite testid, mis tagavad keskkonna terviklikkuse. pH-taset reguleeriva keskkonna puhul võite olla kindel selle ühtlases kvaliteedis ja toimivuses. Käsitsemine ja ladustamine Säilitage keskkonna kvaliteet, hoides seda külmikus temperatuuril +2 °C kuni +8 °C, valguse eest kaitstult. Vältige äärmuslikke tingimusi, nagu külmumine või ülekuumenemine, et säilitada keskkonna tõhusus. Osalise kasutamise korral soojendage vajalik kogus õrnalt toatemperatuuril, tagades, et keskkond jõuab sobivasse seisundisse ilma selle koostisosi kahjustamata. Kõlblikkusaeg NCI-H295R rakukasvukeskkonnal on tootmiskuupäevast alates 8-nädalane kõlblikkusaeg, mistõttu on see usaldusväärne valik teie rakukultuuri vajadusteks, tagades teie teadustöö elujõulisuse ja produktiivsuse.

€150.00

ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Non-essential Amino Acids (100x)

Volume: 100 ml Storage: +2°C to +8°C Sterility: Sterile-filtered MEM Non-Essential Amino Acids (100x) is a sterile supplement designed to enhance cell growth and viability in mammalian cell culture systems. The formulation corresponds to a 100x concentrate of the non-essential amino acids found in standard Minimum Essential Medium (MEM), allowing for direct supplementation of basal media with minimal preparation. Application and Benefits This supplement provides an additional amino acid pool for rapidly proliferating cells or for cell lines that have lost the capacity to synthesize non-essential amino acids de novo. By alleviating the metabolic burden of biosynthesis, it supports improved growth kinetics, prolonged viability, and greater experimental consistency—especially in nutrient-sensitive or high-density cultures. Composition and Use The solution includes glycine, L-alanine, L-asparagine, L-aspartic acid, L-glutamic acid, L-proline, and L-serine. It is compatible with MEM and most other standard media. To use, dilute 1:100 into the final culture medium. This product is sterile-filtered and ready to use without additional handling steps. For research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures. Not for use in humans or animals.

€30.00

ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Cytion Osteoblast growth medium, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes, REF 850057

Osteoblastide kasvukeskkond

Osteoblastide kasvukeskkonda kasutatakse inimese osteoblastide paljunemiseks. Põhikeskkond on koostatud ilma kaltsiumi ja magneesiumita, et piirata mineraalide ladestumist rakkude paljunemise ajal. Mineraliseerumise esilekutsumiseks tuleb üle minna osteoblastide diferentseerumiskeskkonnale. Pakume keskkonda 500 ml baaskeskkonnana, eraldi või koos lisanditega, kas üksikute komponentidena või eelnevalt segatud lisandiseguna. Üksikute komponentide abil on võimalik üksikuid tegureid kohandada või välja jätta, samas kui lisandisegu lisatakse ühe sammuga. Kasutamiseks on vaja lisandeid ning mõlemat lisandivormi on saadaval ka eraldi. Pärast lisandite lisamist sisaldab valmis keskkond 10 % FCS-i (50 ml 500 ml baaskeskkonna kohta).

€300.00

ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

PBS

Fosfaadipuhverdatud soolalahus (PBS) on bioloogilistes ja keemilistes uuringutes laialdaselt kasutatav puhverlahus. Sellel on otsustav roll pH-tasakaalu ja osmolariaalsuse säilitamisel mitmesuguste katsemenetluste käigus, sealhulgas kudede töötlemisel ja rakukultuurides. Meie PBS-lahus on hoolikalt koostatud kõrge puhtusastmega koostisosadest, et tagada stabiilsus ja usaldusväärsus igas katses. Meie PBS-lahuse osmolariaalsus ja ioonide kontsentratsioonid sarnanevad väga inimkeha omadega, mistõttu on see isotooniline ja enamiku rakkude jaoks mittetoksiline. Meie PBS-lahuse koostis Meie PBS-lahus on pH-tasemega reguleeritud segu ülipuhastest fosfaadipuhvritest ja soolalahustest. 1X töökontsentratsioonil sisaldab see: • 8000 mg/l naatriumkloriidi (NaCl) • 200 mg/l kaaliumkloriidi (KCl) • 1150 mg/l veevaba kahealuselist naatriumfosfaati (Na₂HPO₄) • 200 mg/l veevaba ühealuselist kaaliumfosfaati (KH₂PO₄) See koostis tagab optimaalse pH-taseme ja ioonide tasakaalu, mis sobib laiale valikule bioloogilistele rakendustele. Meie PBS-lahuse rakendused Meie PBS-lahus sobib ideaalselt mitmesugusteks rakendusteks bioloogilistes uuringutes. Tänu isotoonilistele ja mittetoksilistele omadustele sobib see ainete lahjendamiseks ja rakukonteinerite loputamiseks. EDTA-d sisaldavad PBS-lahused on tõhusad kinnitunud ja kokku kleepunud rakkude lahtihõõrumiseks. Siiski ei tohi PBS-lahusesse lisada kahevalentseid metalle, nagu tsink, kuna see võib põhjustada sadestumist. Sellistel juhtudel soovitatakse kasutada Goodi puhvreid. Lisaks on meie PBS-lahus sobiv alternatiiv viirusetranspordikeskkonna asemel RNA-viiruste, sealhulgas SARS-CoV-2, transportimiseks ja säilitamiseks. Kvaliteedikontroll • Steriilselt filtreeritud Säilitamine ja kõlblikkusaeg • Hoida temperatuuril +2 °C kuni +25 °C, valguse eest kaitstult. • Pärast avamist hoida temperatuuril 2 °C kuni 25 °C ja kasutada 24 kuu jooksul. Transporditingimused • Ümbritseva õhu temperatuur Hooldus • Hoida külmikus temperatuuril +2 °C kuni +8 °C pimedas kohas. Vältida külmutamist ja sagedast soojendamist temperatuurini +37 °C, kuna see halvendab toote kvaliteeti. • Ärge kuumutage keskkonda üle 37 °C ega kasutage kontrollimatuid soojusallikaid, nagu näiteks mikrolaineahju. • Kui kasutatakse vaid osa kasvukeskkonnast, võtke välja vajalik kogus ja soojendage see enne kasutamist toatemperatuurini. Koostis Kategooria Komponendid Kontsentratsioon (mg/l) Soolad Kaaliumkloriid 200 Veevaba ühealuseline kaaliumfosfaat 200 Naatriumkloriid 8000 Kahealune veevaba naatriumfosfaat 1150

€20.00

ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

RPMI 1640, sisaldab: 2,0 mM stabiilset glutamiini, sisaldab: 2,0 g/l NaHCO₃

RPMI 1640 keskkond, tuntud ka kui RPMI keskkond, on väga mitmekülgne rakukultuurikeskkond, mida kasutatakse laialdaselt bioloogilistes uuringutes erinevate imetajate rakkude kasvatamiseks. Selle keskkonna töötasid 1966. aastal välja George E. Moore, Robert E. Gerner ja H. Addison Franklin kuulsas Roswell Parki terviklikus vähikeskuses ning see sai oma nime Roswell Parki mälestusinstituudi (RPMI) järgi. Esialgu oli RPMI 1640 keskkond mõeldud inimese leukeemiarakkude kasvatamiseks nii suspensiooni- kui ka monokihikultuurides, kuid teadlaste ja kommertstarnijate poolt tehtud muudatuste tulemusel on see arenenud nii, et sobib nüüd mitmesuguste imetajate rakkude kasvatamiseks. See sobib eriti hästi selliste rakuliinidega nagu HeLa, Jurkat, MCF-7, PC12, PBMC, astrotsüüdid ja kartsinoomid. RPMI 1640 keskkond eristub teistest rakukultuurikeskkondadest oma unikaalse koostise tõttu. See sisaldab märkimisväärset kogust fosfaati, aminohappeid ja vitamiine. Eelkõige sisaldab see biotiini, B12-vitamiini ja PABA-d, mida ei leidu Eagle'i minimaalses essentsiaalses keskkonnas ega Dulbecco modifitseeritud Eagle'i keskkonnas. Lisaks on RPMI 1640 keskkonnas märkimisväärselt kõrgemad inositooli ja koliini kontsentratsioonid. Siiski ei sisalda see valke, lipiide ega kasvufaktoreid. Seetõttu on rakkude kasvu optimaalsete tingimuste tagamiseks tavaliselt vaja lisada 10% loote veise seerumit (FBS). RPMI 1640 keskkonna puhverdamissüsteem põhineb naatriumvesinikkarbonaadil ja nõuab 5–10% CO₂ sisaldusega keskkonda, et säilitada füsioloogiliselt sobiv pH. Redutseerija glutatiooni lisamine eristab seda keskkonda veelgi teistest. Kvaliteedikontroll • Steriilselt filtreeritud Säilitamine ja kõlblikkusaeg • Säilitada temperatuuril +2 °C kuni +8 °C, valguse eest kaitstult. • Pärast avamist hoida temperatuuril 4 °C ja kasutada 6–8 nädala jooksul. Transporditingimused • Ümbritseva õhu temperatuur Hooldus • Hoida külmikus temperatuuril +2 °C kuni +8 °C pimedas kohas. Vältida külmutamist ja sagedast soojendamist temperatuurini +37 °C, kuna see halvendab toote kvaliteeti. • Ärge kuumutage keskkonda üle 37 °C ega kasutage kontrollimatuid soojusallikaid, nagu näiteks mikrolaineahju. • Kui kasutatakse vaid osa keskkonnast, võtke välja vajalik kogus ja soojendage see enne kasutamist toatemperatuurini. Koostis Kategooria Komponendid Kontsentratsioon (mg/l) Aminohapped Glütsiin 10,00 L-alüül-L-glutamiin 434,40 L-arginiin 200,00 L-asparagiinH2O 56,82 L-asparagiinhape 20,00 L-tsüstiin 2HCl 65,20 L-glutamiinhape 20,00 L-histidiin HClH₂O 20,27 L-hüdroksü-L-proliin 20,00 L-isoleutsiin 50,00 L-leutsiin 50,00 L-lüsiin HCl 40,00 L-metioniin 15,00 L-fenüülalaniin 15,00 L-proliin 20,00 L-seriin 30,00 L-treoniin 20,00 L-trüptofaan 5,00 L-türosiin 2Na2H₂O 28,83 L-valiin 20,00 Vitamiinid p-aminobensoehape 1,00 D-biotiin 0,20 Koliinkloriid 3,00 D-kaltsiumpantotenaat 0,25 Foolhape 1,00 müo-inositool 35,00 Nikotiinamiid 1,00 Püridoksiin-HCl 1,00 Riboflaviin 0,20 Tiamiin-HCl 1,00 B12-vitamiin 0,005 Anorgaanilised soolad Ca(NO₃)₂4H₂O 100,00 KCl 400,00 MgSO₄7H₂O 100,00 NaCl 6000,00 NaHCO₃ 2000,00 Na₂HPO₄ 800,00 Muud koostisosad D-glükoos 2000,00 Redutseeritud L-glutatioon 1,00 Fenoolpunase naatriumsool 5,30

€25.00

ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Cytion Skeletal muscle cell growth medium, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes and vials, REF 850082

Skeletilihasrakkude kasvatuskeskkond

Skeletilihasrakkude kasvatuskeskkond soodustab inimese skeletilihasrakkude paljunemist ja hoiab ära enneaegse ühinemise, mistõttu on võimalik rakke enne diferentseerumist paljundada. Täielik keskkond sisaldab loote vasikaserumit, L-glutamiini, fetuiini, EGF-i, bFGF-i, inimese rekombinantse insuliini ja deksametasooni. Müotubusteks ühinemiseks tuleb üle minna skeletilihasrakkude diferentseerumiskeskkonnale. Pakume keskkonda 500 ml baaskeskkonnana, kas eraldi või koos lisanditega, kas üksikute komponentidena või eelnevalt segatud lisandiseguna. Eraldi komponentide kasutamine võimaldab üksikuid tegureid kohandada või välja jätta, samas kui lisandisegu lisatakse ühe sammuga. Kasutamiseks on vaja lisandeid ning mõlemat lisandivormi on saadaval ka eraldi. Pärast lisandite lisamist sisaldab täielik kasvukeskkond 5 % FCS-i (25 ml 500 ml baaskeskkonna kohta).

€210.00

ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Cytion Smooth muscle cell growth medium, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes and vials, REF 850075

Silelihasrakkude kasvatuskeskkond

Sile lihasrakkude kasvatuskeskkonda kasutatakse veresoonte ja muust koest, näiteks aordist, pärg- ja kopsuarteritest, bronhistest, hingetorust ja põiest pärinevate inimese sile lihasrakkude kultiveerimiseks. Täielik kasvukeskkond sisaldab loote vasikaserumit, L-glutamiini, EGF-i, bFGF-i ja inimese rekombinantse insuliini. Pakume keskkonda 500 ml baaskeskkonnana, eraldi või koos lisanditega, kas üksikute komponentidena või eelnevalt segatud lisandiseguna. Üksikud komponendid võimaldavad üksikuid tegureid kohandada või välja jätta, samas kui lisandisegu lisatakse ühe sammuga. Põhikeskkond on saadaval ka fenoolpunavaba versioonina samades pakendites, mis välistab häired fluorestsents- ja kolorimeetrilistes mõõtmistulemustes ning fenoolpunase nõrga östrogeenilaadse toime. Kasutamiseks on vaja lisandeid ning mõlemad lisandivormid on saadaval ka eraldi. Pärast lisandite lisamist sisaldab täielik kasvukeskkond 5 % FCS-i (25 ml 500 ml baaskeskkonna kohta).

€240.00

ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Sodium Pyruvate Solution (100 mM)

Volume: 100 ml Storage: +2°C to +8°C Sterility: Sterile-filtered Sodium Pyruvate Solution (100 mM) is a sterile, ready-to-use supplement designed to provide an additional, easily accessible energy source for cell culture media. Sodium pyruvate plays a key role in cellular energy metabolism and supports the growth of metabolically active and rapidly proliferating cells, such as tumor cells. Supplementation can enhance cell viability and help maintain metabolic stability in culture systems. Application and Benefits This solution is widely used in routine cell culture to enrich media with pyruvate and promote optimal growth conditions. It supports ATP production, may help reduce oxidative stress, and contributes to improved metabolic performance of cultured cells. Manufactured in cell culture–grade water and sterile-filtered, the product ensures consistent quality and reproducibility in research workflows. Usage and Compatibility The recommended final concentration for most cell culture applications is 1 mM sodium pyruvate, achieved by diluting the 100 mM stock solution 1:100 into complete culture medium. The solution is compatible with a wide range of basal media and mammalian cell lines. Store at +2°C to +8°C and protect from contamination to maintain product stability. For research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures. Not for use in humans or animals.

€18.00

ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Stable Glutamin (200mM), L-Alanyl-L-Glutamine Solution

Volume: 100 ml Storage: ≤ –15°C Sterility: Sterile-filtered Stable Glutamine Solution (L-Alanyl-L-Glutamine, 200 mM) is a highly stable dipeptide form of L-glutamine designed as a direct replacement for conventional L-glutamine in cell culture media. L-glutamine is an essential amino acid and a major energy source for cultured cells, playing a critical role in cell growth, metabolism, and protein synthesis. Application and Benefits In standard liquid media, L-glutamine degrades relatively quickly at 37°C, leading to the formation of toxic byproducts such as ammonium ions that can negatively affect cell viability and experimental outcomes. Stable glutamine overcomes this limitation by providing a non-degrading dipeptide form that remains intact in culture conditions. Cells enzymatically cleave the dipeptide bond to release L-glutamine as needed, ensuring a continuous fresh supply while preventing the accumulation of harmful waste products. This makes the solution particularly advantageous for long-term cell cultures and high-density growth systems. Formulation and Usage The L-Alanyl-L-Glutamine solution is prepared in cell culture–grade water at a concentration of 200 mM and is sterile-filtered for contamination-sensitive applications. It can be diluted directly into complete media according to experimental requirements. Store at ≤ –15°C and avoid repeated freeze-thaw cycles to maintain product stability. For research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures. Not for use in humans or animals.

€52.00

ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Rakukultuurikeskkonnad: ülevaade

Eluteaduste valdkonnas on üks olulisemaid meetodeid rakukultuur. Mõiste „rakukultuur” tähendab rakkude, kudede või organite eemaldamist loomalt või taimelt ning nende rakkude, kudede või organite järgnevat siirdamist kunstlikku keskkonda, mis soodustab nende ellujäämist ja/või kasvu. Rakkude optimaalse arengu põhilised keskkonnatingimused on reguleeritud temperatuur, substraat rakkude kinnitumiseks, sobiv kasvukeskkond ning inkubaator, mis hoiab optimaalset pH-taset ja osmolalisust. Rakud vajavad neid tingimusi, et kasvada oma täieliku potentsiaali ulatuses.

Sobiva kasvukeskkonna valik in vitro kasvatamiseks on rakukultuuri protsessis kõige kriitilisem ja olulisem etapp. Kasvukeskkond, mida nimetatakse ka kultuurikeskkonnaks, on vedelik või geel, mis on koostatud soodustama organismide arengut mikroskoopilisel, rakulisel või taimelaadsel tasandil. Rakukultuuri kasvatamiseks kasutatav keskkond sisaldab sageli piisavat energiavarustust ja aineid, mis reguleerivad rakutsüklit. Kultuurikeskkonna peamised koostisosad on aminohapped, vitamiinid, anorgaanilised soolad, glükoos ja seerum. Seerum lisatakse keskkonnale, kuna see toimib kasvufaktorite, hormoonide ja kinnitumisfaktorite allikana. Lisaks toitainete pakkumisele aitab keskkond kaasa ka pH-taseme ja osmolalisuse säilitamisele.

Rakukultuuris kasutatavad keskkonna tüübid

Nii inim- kui ka loomarakke on võimalik kasvatada kas kunstlikus või sünteetilises keskkonnas või täiesti looduslikus keskkonnas, mida on täiendatud looduslike elementidega. Järgnevalt anname ülevaate erinevatest praegu kättesaadavatest keskkonnatüüpidest.

Looduslikud kasvukeskkonnad

Looduslikes kasvukeskkondades leidub ainult looduslikus olekus esinevaid bioloogilisi vedelikke. Looduslikud kasvukeskkonnad on väga kasulikud ja lihtsad mitmesuguste loomarakutüüpide kasvatamiseks. Looduslikke kasvukeskkondi moodustavate täpsete komponentide puudulik mõistmine on peamine tegur, mis mõjutab looduslike kasvukeskkonna kasutamisel saadud tulemuste madalat korratavust.

Kunstlikud kasvukeskkonnad

Kunstlike või sünteetiliste kasvukeskkonna valmistamisel lisatakse toitaineid (nii orgaanilisi kui ka anorgaanilisi), seerumvalke, süsivesikuid, kofaktoreid, vitamiine ja sooli, samuti O₂ ja CO₂ gaasifaase [1].

On välja töötatud mitmesuguseid kunstlikke kasvukeskkondi, et täita ühte või mitut järgmistest funktsioonidest: 1) Vahetu ellujäämine (tasakaalustatud soolalahus täpse pH-väärtuse ja osmootse rõhuga). 2) Pikendatud ellujäämine (tasakaalustatud soolalahus, millele on lisatud erinevaid orgaaniliste kemikaalide ja/või seerumi koostisi). 3) Piiramatu areng. 4) Spetsiifilised funktsioonid.

Kunstlikud kasvukeskkonnad jagunevad neljaks erinevaks klassiks:

Seerumit sisaldavad keskkonnad

Loomarakkude kasvatamiseks kasutatavates keskkondades leiduvaim lisand on veise loote seerum. Seda lisatakse kultuurikeskkonnale odava lisandina, et saavutada parimad võimalikud kasvutingimused. Lisaks sellele, et seerum toimib ebastabiilsete või vees lahustumatute toitainete, hormoonide ja kasvufaktorite, proteaasi inhibiitorite ning muude ainete transportijana või kelaatorina, seob ja neutraliseerib see ka kahjulikke molekule.

Seerumivaba kasvukeskkond

Seerumi olemasolul keskkonnas on mitmeid puudusi ning see võib põhjustada suuri tõlgendusvigu immunoloogilistes uuringutes [2, 3]. On loodud mitmesuguseid seerumivabasid keskkondi [4, 5]. Need kasvukeskkonnad on üldjuhul spetsiaalselt koostatud ühe rakutüübi kultiveerimiseks, näiteks Thermo Fisher Scientificu tooted „Knockout Serum Replacement“ ja „Knockout DMEM“ ning Stem Cell Technologiesi mTESR-kasvukeskkond [6] tüvirakkude jaoks [7].

Lisaks sisaldavad need keskkonnad kindlaksmääratud koguseid puhastatud kasvufaktoreid, lipoproteiine ja muid valke, mida muidu tavaliselt annab seerum [8]. Neid keskkondi nimetatakse sageli „määratletud kultuurikeskkondadeks”, kuna nende koostisosad on hästi teada.

Keemiliselt määratletud kasvukeskkonnad

Need keskkonnad sisaldavad ülipuhasteid anorgaanilisi ja orgaanilisi komponente, mida ei ole saastanud mingisugune saaste. Need võivad sisaldada ka puhtaid valkude lisandeid, näiteks kasvufaktoreid.

 Bakterite või pärmi geneetiline modifitseerimine koos teatud rasvhapete, vitamiinide, kolesterooli ja aminohapete lisamisega viib nende koostisosade tootmiseni [9].

Valguvabad kasvukeskkonnad

Valguvabad kasvukeskkonnad on sellised, mis ei sisalda üldse valku, vaid ainult valguväliseid elemente. Võrreldes seerumilisandiga kasvukeskkondadega soodustab valguvaba keskkonna kasutamine suuremat rakkude paljunemist ja valgu ekspressiooni ning hõlbustab järgnevas protsessis tekkinud toote puhastamist [10–12]. Valgu ei sisaldu sellistes koostistes nagu MEM ja RPMI-1640. Vajaduse korral võib siiski manustada valgu lisandit.

Kasvatuskeskkond ja selle põhikomponendid

Kaubanduslikku kultuurikeskkonna saab osta pulbri või vedeliku kujul ning see sisaldab sageli mitmesuguseid toitaineid, nagu aminohapped, glükoos, soolad, vitamiinid ja muud toidulisandid. 

Nende komponentide vajadus on iga rakuliini puhul erinev ning need erinevused on põhjuseks, miks on olemas nii palju erinevaid kasvukeskkonna koostisi. Igal komponendil on oma kindel funktsioon, mida kirjeldatakse järgmistes lõikudes:

Puhversüsteemid

Optimaalsete kasvutingimuste säilitamiseks tuleb reguleerida pH-väärtust, mida tehakse sageli ühe kahest puhverdamissüsteemist:

Looduslik puhverdamissüsteem

CO₂/H₂CO₃ suhe atmosfääris on võrdne sellega, mis on kasvukeskkonnas, luues loodusliku puhvermehhanismi. Selle loodusliku puhvermehhanismi säilitamiseks tuleb kultuure hoida õhukeskkonnas, kus CO₂ sisaldus on 5–10%, mida saavutatakse sageli CO₂-inkubaatori abil. Loodusliku puhvri kasutamise üks suurimaid eeliseid on selle odavus ja ohutus.

HEPES

Zwitterioonil HEPES põhinev keemiline puhverdamine omab suuremat puhverdamisvõimet pH-vahemikus 7,2–7,4 ega vaja reguleeritud gaasikeskkonda. Teatavate rakutüüpide puhul võib suurem HEPES-i annus olla kahjulik. HEPES-i sisaldavad kasvukeskkonnad on samuti palju tundlikumad fluorestsentsvalguse fototoksilise mõju suhtes [13].

Fenoolpunane

pH-indikaator fenoolpunane on sageli lisatud kaubanduslikult kättesaadavatesse kultuurikeskkondadesse, võimaldades pH-väärtuse pidevat jälgimist. Rakude paljunemisel põhjustavad nende poolt toodetud metaboliidid pH-väärtuse muutust ja seega ka keskkonna värvimuutust. Fenoolpunasel on keskkonna värvile kahepoolne mõju: happelise pH juures muutub see kollaseks ja aluselise pH juures lillaks. pH 7,4, mis on rakukultuuri jaoks optimaalne väärtus, muudab keskkonna fluorestsentspunaseks.

Kuid fenoolpunasel on mõned puudused: esiteks suudab fenoolpunane imiteerida mitmete steroidhormoonide, eelkõige östrogeeni toimet [14]. Seetõttu soovitatakse östrogeenitundlike rakkude, nagu rinnakoe, uurimisel kasutada fenoolpunast mittesisaldavat kasvatuskeskkonda. Mitmes seerumivabas koostises häirib fenoolpunase olemasolu naatrium-kaaliumi tasakaalu. Selle mõju võib neutraliseerida, lisades keskkonnale seerumit või veise hüpofüüsi hormooni [15]. Kolmandaks takistab fenoolpunase olemasolu tuvastamist voolutsütomeetrilistes katsetes.

Anorgaanilised soolad

Anorgaanilisi sooli, nagu naatrium-, kaalium- ja kaltsiumioone, sisaldavad kasvukeskkonnad aitavad säilitada osmootilist tasakaalu ja reguleerida membraanipotentsiaali.

Aminohapped

Kuna aminohapped on valkude põhikomponendid, on need oluline osa igast kunagi välja töötatud rakukasvatuskeskkonnast. Kuna rakud ei suuda teatud aminohappeid ise toota, on oluline, et kultuurikeskkonnas oleksid olemas asendamatud aminohapped. Need on vajalikud rakkude paljunemiseks ning nende kontsentratsioon määrab ära maksimaalse saavutatava rakutiheduse. Eriti oluline on asendamatu aminohape L-glutamiin.

L-glutamiin toimib ainevahetuse teisese energiaallikana ja annab lämmastikku NAD-i, NADPH-i ja nukleotiidide tootmiseks. Kuna L-glutamiin on ebastabiilne aminohape, mis aja jooksul muutub vormiks, mida rakud ei suuda ära kasutada, tuleb seda kasvukeskkonnale lisada.

Lisaks võib kasvukeskkonnale lisada mitteolulisi aminohappeid, et asendada kasvu käigus ära kasutatud aminohappeid. Rakke kasvu kiirendatakse ja nende elujõulisust suurendatakse, kui kasvukeskkonnale lisatakse mitteolulisi aminohappeid.

Süsivesikud

Suhkrute kujul esinevad süsivesikud on peamine energiaallikas. Paljudes kasvukeskkondades sisaldub lisaks levinumatele suhkrutele – glükoosile ja galaktoosile – ka maltoosi ja fruktoosi.

Valgud ja peptiidid

Albumiin, transferriin ja fibronektiin on kõige sagedamini kasutatavad valgud ja peptiidid. Need on eriti olulised keskkondades, mis ei sisalda seerumit. Albumiin, transferriin, aprotiniin, fetuiin ja fibronektiin on mõned valgud, mida võib leida seerumist, mis on rikkalik valguallikas.

Albumiin on veres leiduva peamine valk, mille ülesanne on siduda ja transportida erinevaid aineid, sealhulgas vett, sooli, vabu rasvhappeid, hormoone ja vitamiine, erinevate organite ja rakkude vahel. Albumiini võime seonduda kemikaalidega teeb sellest tõhusa vahendi kahjulike ühendite eemaldamiseks rakukultuuri kasvukeskkonnast.

Aprotiniin on rakukultuuri süsteemides kasutatav kaitseaine, kuna see on stabiilne nii neutraalses kui ka happelises pH-keskkonnas ning vastupidav kõrgetele temperatuuridele ja proteolüütiliste ensüümide poolt põhjustatavale lagunemisele. See suudab pärssida mitmeid seriinproteaase, sealhulgas muu hulgas trüpsiini.

Fetuin on glükoproteiin, mida võib loomade loote ja vastsündinute seerumis leida suuremas koguses võrreldes täiskasvanute seerumiga. Lisaks sellele toimib see seriinproteaasi inhibiitorina. Valgu fibronektiin on rakkude adhesiiooni protsessis oluline komponent. Transferriin on valk, mis transportib rauda ja vastutab raua toimetamise eest rakumembraanidesse.

Rasvhapped ja lipiidid

Need mängivad olulist rolli seerumivabas keskkonnas, kui seerum puudub.

Vitamiinid

Rakkude arenguks ja paljunemiseks on vaja arvukaid vitamiine. Rakud ei suuda vitamiine piisavas koguses toota ning seetõttu on need koekultuuris toidulisanditena hädavajalikud.

Rakukultuuris on seerum vitamiinide peamine allikas; samas lisatakse kasvukeskkondadele ka erinevaid vitamiine, et need sobiksid konkreetse rakutüübiga. Kasvu stimuleerimiseks kasutatakse kõige sagedamini B-grupi vitamiine.

Mikroelemendid

Keemilisi elemente, nagu vask, tsink, seleen ja trikarboksüülhappe vaheühendid, nimetatakse mikroelementideks. Mikroelemente lisatakse sageli seerumivabadele kasvukeskkondadele, et asendada neid, mis tavaliselt seerumis esinevad. Need elemendid on olulised keemilised komponendid, mis on vajalikud tervete rakkude arenguks. Paljud biokeemilised reaktsioonid, näiteks ensüümide aktiivsus, sõltuvad teatud mikrotoitainetest.

Kasvukeskkonna lisandid

Teatavatele rakuliinidele soovitatav täielik kasvukeskkond vajab lisakomponente, mida baaskeskkonnas ja seerumis ei ole. Need toidulisandid toetavad rakkude kasvu ja nõuetekohast ainevahetust.

Kuigi hormoonid, kasvufaktorid ja signaalmolekulid on teatud rakuliinide nõuetekohaseks paljunemiseks hädavajalikud, tuleks alati järgida järgmisi ettevaatusabinõusid: kuna lisandite lisamine võib muuta täieliku kasvukeskkonna osmolalisust, mis võib pärssida rakkude arengut, on alati soovitatav kontrollida osmolalisust pärast lisandite lisamist. Enamiku rakuliinide puhul on optimaalne osmolalisus vahemikus 260–320 mOSM/kg.

Antibiootikumid

Antibiootikume kasutatakse sageli bakteriaalsete ja seenhaiguste tekitajate arengu pärssimiseks [16], kuigi need ei ole rakkude kasvu jaoks hädavajalikud. Kuna antibiootikumid võivad varjata mükoplasma ja resistentsete bakterite põhjustatud saastumist, ei soovitata nende rutiinset kasutamist rakukultuurides [17, 18].

Lisaks võivad antibiootikumid häirida ülitundlike rakkude ainevahetust. Sageli kasutatakse MilliporeSigma ja Life Technologiesi toodetud penitsilliini-streptomütsiini kombinatsioone. Plasmocini on kasutatud glioomi rakuliinide TS603, TS516 ja BT260 kultiveerimisel [19] ning see on osutunud efektiivseks mükoplasma saastumise kõrvaldamisel (20).

Seerum

Seerumis leidub albumiine, kasvufaktoreid ja kasvuinhibiitoreid. Seerum on üks rakukultuurikeskkonna olulisemaid komponente, kuna see varustab rakke aminohapete, valkude, vitamiinide (eriti rasvlahustuvate vitamiinidega nagu A, D, E ja K), süsivesikute, lipiidide, hormoonide, kasvufaktorite, mineraalide ja mikroelementidega.

Kultiveeritud rakkude arengu soodustamiseks kasutatakse sageli veiste loote- ja vasikaserumit. Loote seerum on rikkalik kasvufaktorite allikas ning sobib rakkude kloonimiseks ja tundlike rakkude arendamiseks. Vasikaserumit kasutatakse kontaktinhibitsiooni katsetes, kuna selle kasvut soodustav toime on vähenenud. Tavalised kasvukeskkonnad sisaldavad sageli 2–10% seerumit. Seerumi lisamine kultuurikeskkonnale teenib järgmisi eesmärke [21]:

  • Seerum varustab rakke oluliste toitainetega (nii lahuses kui ka valkudega seotuna).

  • Seerumis sisalduvad mitmed kasvufaktorid ja hormoonid, mis osalevad kasvu soodustamises ja spetsiifilises rakutegevuses.

  • See pakub palju seonduvaid valke, nagu albumiin ja transferriin, mis transportivad teisi kemikaale rakku. Näiteks toimetab albumiin rakkudesse rasvu, vitamiine, hormoone jne.

  • Samuti pakub see valke, nagu fibronektiin, mis suurendavad rakkude adhesiooni substraadile. Lisaks toodab see levimiselemente, mis aitavad kaasa rakkude laienemisele enne jagunemist.

  • See toodab proteaasi inhibiitoreid, mis takistavad proteolüüsi rakkudes.

  • See sisaldab ka mineraalaineid, nagu Na+, K+, Zn2+ ja Fe2+.

  • See suurendab kasvatuskeskkonda viskoossust, kaitstes seega rakke mehaaniliste vigastuste eest suspensioonikultuuri segamise ajal.

  • See toimib ka puhvrina.

Viited

[1] Morgan J, Morton H, Parker R. Loomarakkude toitumine koekultuuris; esialgsed uuringud sünteetilise keskkonna kohta. Proc Soc Exp Biol Med. 1950;73:1–8

[2] Kerbel R, Blakeslee D. Loote vasikaserumi komponendi kiire adsorptsioon kultuuris olevate imetajarakkude poolt. Potentsiaalne artefaktide allikas rakuspetsiifiliste antigeenide vastaseerumite uuringutes. Immunology. 1976;31:881-91

[3] Sula K, Draber P, Nouza K. Seerumi lisamine rakususpensioonide valmistamiseks kasutatavasse keskkonnasse kui võimalik artefaktide allikas rakkude vahendatud reaktsioonide uurimisel põlvelümfisõlme testi abil. J Immunogenet. 1980;7:483–9

[4] Mariani E, Mariani A, Monaco M, Lalli E, Vitale M, Facchini A. Kaubanduslikud seerumivabad kasvukeskkonnad: hübriidoma kasvatamine ja monoklonaalsete antikehade tootmine. J Immunol Methods. 1991;145:175–83

[5] Barnes D, Sato G. Meetodid kultiveeritud rakkude kasvatamiseks seerumivabas keskkonnas. Anal Biochem. 1980;102:255–70

[6] Yu H, Lu S, Gasior K, Singh D, Vazquez Sanchez S, Tapia O jt. HSP70 juhib RNA-vaba TDP-43-d anisotroopsetesse tuuma-sisestesse vedelatesse sfäärilistesse kestadesse. Science. 2021;371:

[7] Meharena H, Marco A, Dileep V, Lockshin E, Akatsu G, Mullahoo J jt. Downi sündroomist tingitud vananemine häirib närvirakkude eellaste tuuma arhitektuuri. Cell Stem Cell. 2022;29:116–130.e7

[8] Iscove N, Melchers F. Seerumi täielik asendamine albumiini, transferriini ja soja lipiididega lipopolüsahhariidile reageerivate B-lümfotsüütide kultuurides. J Exp Med. 1978;147:923–33

[9] Stoll T, Muhlethaler K, von Stockar U, Marison I. Hübriidoma kasvu ja monoklonaalsete antikehade tootmise jaoks mõeldud keemiliselt määratletud valguvaba keskkonna süstemaatiline täiustamine. J Biotechnol. 1996;45:111–23

[10] Darfler F. Valguvaba kasvukeskkond hübriidomide ja muude immuunsüsteemi rakkude kasvatamiseks. In Vitro Cell Dev Biol. 1990;26:769–78

[11] Barnes D, Sato G. Seerumivaba rakukultuur: ühtne lähenemisviis. Cell. 1980;22:649–55

[12] Hamilton W, Ham R. Hiina hamstri rakuliinide klooniline kasvatamine valguvabas keskkonnas. In Vitro. 1977;13:537–47

[13] Zigler J, Lepe Zuniga J, Vistica B, Gery I. Valgusele eksponeeritud HEPES-i sisaldava kultuurikeskkonna tsütotoksiliste mõjude analüüs. In Vitro Cell Dev Biol. 1985;21:282–7

[14] Berthois Y, Katzenellenbogen J, Katzenellenbogen B. Fenoolpunane kudekultuurikeskkonnas on nõrk östrogeen: mõju östrogeenile reageerivate rakkude uurimisele kultuuris. Proc Natl Acad Sci U S A. 1986;83:2496–500

[15] Karmiol S. Seerumivabade keskkondade arendamine. In: Master JRW, toim. Animal Cell culture, 3. trükk. Oxford: Oxford University Press; 2000.

[16] Perlman D. Antibiootikumide kasutamine rakukultuurikeskkondades. Methods Enzymol. 1979;58:110–6

[17] McGarrity G. Rakukultuuride mükoplasmainfektsiooni levik ja kontroll. In Vitro. 1976;12:643–8

[18] Masters J, Stacey G. Kasvukeskkonna vahetamine ja rakuliinide passaažimine. „Nat Protoc”. 2007;2:2276–84

[19] Chakraborty A, Laukka T, Myllykoski M, Ringel A, Booker M, Tolstorukov M jt. Histooni demetülaas KDM6A tajub otseselt hapnikku, et reguleerida kromatiini ja raku saatust. Science. 2019;363:1217–1222

[20] Molla Kazemiha V, Azari S, Amanzadeh A, Bonakdar S, Shojaei Moghadam M, Habibi Anbouhi M jt. Plasmocin™i tõhusus mitmesugustel mollicutega nakatunud imetajate rakuliinidel võrreldes rakukultuuris tavaliselt kasutatavate antibiootikumidega: kohalik kogemus. Cytotechnology. 2011;63:609–20

[21] Kragh Hansen U. Ligandi seondumise molekulaarsed aspektid seerumalbumiiniga. Pharmacol Rev. 1981;33:17–53