Mine otse sisu juurde
MFC
Kude
Maha
Haigus
Hiirte mao kartsinoom
Sünonüümid
Mouse Forestomach Carcinoma

Dokumendid

MFC

Cell line · Toote number 300652

Hiire eesmao kartsinoomi (MFC) rakuliin on väärtuslik vahend vähiuuringutes, eriti kasvajate metastaaside uurimisel. See rakuliin oli...

€800.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

Hiirte metsamaha kartsinoomi (MFC) rakuliin on vähiuuringutes, eriti kasvajate metastaaside uurimisel, hindamatu väärtusega vahend. See rakuliin on loodud in vitro ja seda on kasvatatud üle 132 raku läbimise. MFC rakke iseloomustab kontaktide pärssimise puudumine ja nende morfoloogia on mitmekesine, sealhulgas ümmargune, hulknurkne ja spindlikujuline. Ultrastruktuurselt on MFC rakkudel pinnal rohkesti mikrovilli ja tsütoplasmas ulatuslikud filopoodid. Nende rakkude tuumad on ebakorrapärase kujuga ja suurenenud tuumade ja tsütoplasma suhtega. Lisaks on olemas desmosoomid, hemidesmosoomid ja väike arv toonofibrille.

MFC rakuliini populatsiooni kahekordistumise aeg on 24,7 tundi, keskmine mitootiline indeks on 32,9%, ulatudes maksimaalselt 62%-ni, modaalse vahemiku 70-76 juures. Nende rakkude homotransplantatsiooni tõhusus on 100%, mis näitab nende kõrget elujõulisust ja järjepidevust katsetes. MFC rakkudega indutseeritud kasvajad on morfoloogiliselt sarnased algse metsamaha kartsinoomiga, millest nad on saadud, kusjuures 81,8% indutseeritud kasvajatest moodustasid spontaanselt metastaase kopsudesse. Selline suur kalduvus vere kaudu kopsumetastaaside tekkimiseks muudab MFC rakuliini eriti kasulikuks kasvajate metastaaside tekkemehhanismide uurimiseks ja eksperimentaalse ravi katsetamiseks. Esmase kasvaja metastaatiliste omaduste säilitamine rõhutab selle rakuliini olulisust käimasolevates vähiuuringutes.

Kude
Maha
Haigus
Hiirte mao kartsinoom
Rakendused
Vähiuuringud
Sünonüümid
  • Mouse Forestomach Carcinoma

02Klassifikatsioon

Organism
Hiir
Kasvuvõime
Järgija

03Tunnused

Viide
MFC (Cytioni katalooginumber 300652)
NCBI maksukood
10090
Cellosaurus
CVCL_5J48

04Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.