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MFC
Tessuto
Stomaco
Malattia
Carcinoma gastrico di topo
Sinonimi
Mouse Forestomach Carcinoma

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MFC

Cell line · Codice prodotto 300652

La linea cellulare MFC (Mouse Forestomach Carcinoma) è uno strumento prezioso nella ricerca sul cancro, in particolare nello studio delle metastasi tumorali. Questa linea cellulare è stata...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare di carcinoma forestale di topo (MFC) è uno strumento prezioso per la ricerca sul cancro, in particolare per lo studio delle metastasi tumorali. Questa linea cellulare è stata creata in vitro ed è stata subcoltivata per oltre 132 passaggi. Le cellule MFC sono caratterizzate dalla mancanza di inibizione del contatto e mostrano una varietà di morfologie, tra cui forme rotonde, poligonali e a fuso. Dal punto di vista ultrastrutturale, le cellule MFC presentano abbondanti microvilli sulla superficie ed estesi filopodi nel citoplasma. I nuclei di queste cellule hanno una forma irregolare con un rapporto nucleo-citoplasma aumentato. Inoltre, sono presenti desmosomi, emidesmosomi e un piccolo numero di tonofibrille.

La linea cellulare MFC ha un tempo di raddoppiamento della popolazione di 24,7 ore, con un indice mitotico medio del 32,9%, che raggiunge un massimo del 62% con un intervallo modale di 70-76. L'efficienza dell'omotrapianto di queste cellule è del 100%, il che indica la loro elevata vitalità e consistenza in ambito sperimentale. I tumori indotti dalle cellule MFC sono morfologicamente simili al carcinoma forestale originale da cui sono stati derivati, con l'81,8% dei tumori indotti che metastatizzano spontaneamente ai polmoni. Questa elevata propensione alla metastatizzazione polmonare per via ematica rende la linea cellulare MFC particolarmente utile per studiare i meccanismi della metastatizzazione tumorale e per testare trattamenti sperimentali. Il mantenimento delle caratteristiche metastatiche del tumore primario sottolinea la rilevanza di questa linea cellulare nella ricerca oncologica in corso.

Tessuto
Stomaco
Malattia
Carcinoma gastrico di topo
Applicazioni
Ricerca sul cancro
Sinonimi
  • Mouse Forestomach Carcinoma

02Classificazione

Organismo
Mouse
Proprietà di crescita
Aderente

03Identificatori

Riferimento bibliografico
MFC (numero di catalogo Cytion 300652)
Codice fiscale NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_5J48

04Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.