Siirry sisältöön
MFC
Kudos
Vatsa
Sairaus
Hiiren mahasyöpä
Synonyymit
Mouse Forestomach Carcinoma

Asiakirjat

MFC

Cell line · Tuotenumero 300652

Hiiren etumahan karsinooman (MFC) solulinja on korvaamaton työkalu syöpätutkimuksessa, erityisesti kasvaimen etäpesäkkeiden tutkimuksessa. Tämä solulinja oli...

€800.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

Mouse Forestomach Carcinoma (MFC) -solulinja on korvaamaton väline syöpätutkimuksessa, erityisesti kasvainten etäpesäkkeiden tutkimuksessa. Tämä solulinja on perustettu in vitro, ja sitä on viljelty yli 132 kertaa. MFC-soluille on ominaista se, että ne eivät estä kosketusta, ja niillä on erilaisia morfologioita, kuten pyöreitä, monikulmaisia ja karamaisia muotoja. Ultrastruktuurisesti MFC-soluissa on runsaasti mikrovilloja niiden pinnalla ja laajoja filopodioita sytoplasmassa. Näiden solujen tumat ovat epäsäännöllisen muotoisia ja niissä on lisääntynyt tuma-sytoplasmasuhde. Lisäksi niissä on desmosomeja, hemidesmosomeja ja pieni määrä tonofibrillejä.

MFC-solulinjan populaation kaksinkertaistumisaika on 24,7 tuntia, ja sen keskimääräinen mitoosi-indeksi on 32,9 %, ja se voi olla enimmillään 62 %, kun modaalinen vaihteluväli on 70-76 %. Näiden solujen homotransplantaatiotehokkuus on 100 prosenttia, mikä osoittaa niiden suurta elinkelpoisuutta ja johdonmukaisuutta kokeellisissa olosuhteissa. MFC-solujen indusoimat kasvaimet ovat morfologialtaan samanlaisia kuin alkuperäinen metsämahan karsinooma, josta ne on johdettu, ja 81,8 prosenttia indusoiduista kasvaimista sai spontaanisti etäpesäkkeitä keuhkoihin. Tämä suuri taipumus veren kautta tapahtuvaan keuhkometastaasiin tekee MFC-solulinjasta erityisen hyödyllisen kasvainmetastaasin mekanismien tutkimiseen ja kokeellisten hoitojen testaamiseen. Primäärikasvaimen metastaattisten ominaisuuksien säilyminen korostaa tämän solulinjan merkitystä meneillään olevassa syöpätutkimuksessa.

Kudos
Vatsa
Sairaus
Hiiren mahasyöpä
Sovellukset
Syöpätutkimus
Synonyymit
  • Mouse Forestomach Carcinoma

02Luokittelu

Organismi
Hiiri
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt

03Tunnisteet

Lähdeviite
MFC (Cytionin luettelonumero 300652)
NCBI-verotunnus
10090
Cellosaurus
CVCL_5J48

04Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.