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MFC
Tecido
Estômago
Doença
Carcinoma gástrico do ratinho
Sinónimos
Mouse Forestomach Carcinoma

Documentos

MFC

Cell line · Número do produto 300652

A linha celular do carcinoma do pré-estômago do rato (MFC) é uma ferramenta inestimável na investigação do cancro, nomeadamente no estudo da metástase tumoral. Esta linha celular foi...

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Personalização / Recomendações

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01Informações gerais

Descrição

A linha celular Mouse Forestomach Carcinoma (MFC) é uma ferramenta inestimável na investigação do cancro, particularmente no estudo das metástases tumorais. Esta linha celular foi estabelecida in vitro e foi subcultivada durante mais de 132 passagens. As células MFC são caracterizadas pela ausência de inibição de contacto e apresentam uma variedade de morfologias, incluindo formas redondas, poligonais e fusiformes. Ultra-estruturalmente, as células MFC apresentam microvilosidades abundantes nas suas superfícies e filopódios extensos no citoplasma. Os núcleos destas células têm uma forma irregular com um rácio núcleo-citoplasma aumentado. Além disso, estão presentes desmossomas, hemidesmossomas e um pequeno número de tonofibrilhas.

A linha celular MFC tem um tempo de duplicação da população de 24,7 horas, com um índice mitótico médio de 32,9%, atingindo um máximo de 62% com um intervalo modal de 70-76. A eficiência do homotransplante destas células é de 100%, indicando a sua elevada viabilidade e consistência em ambientes experimentais. Os tumores induzidos por células MFC são morfologicamente semelhantes ao carcinoma original do estômago de que derivam, sendo que 81,8% dos tumores induzidos metastizam espontaneamente para os pulmões. Esta elevada propensão para metástases pulmonares transmitidas pelo sangue torna a linha celular MFC particularmente útil para estudar os mecanismos de metástases tumorais e para testar tratamentos experimentais. A manutenção das caraterísticas metastáticas do tumor primário sublinha a importância desta linha celular na investigação em curso sobre o cancro.

Tecido
Estômago
Doença
Carcinoma gástrico do ratinho
Aplicações
Investigação sobre o cancro
Sinónimos
  • Mouse Forestomach Carcinoma

02Classificação

Organismo
Rato
Propriedades de crescimento
Aderente

03Identificadores

Referência
MFC (número de catálogo Cytion 300652)
Número de identificação fiscal do NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_5J48

04Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.