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Cellules A431
Tissu
Épidermoïde
Maladie
Carcinome épidermoïde
Synonymes
A-431, A431/P

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Cellules A431

Cell line · Référence du produit 300112

La lignée cellulaire A431, issue d'un carcinome épidermoïde solide chez une patiente âgée de 85 ans, est une lignée cellulaire tumorale humaine présentant une morphologie épithéliale...

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1

01Informations générales

Description

La lignée cellulaire A431, dérivée d'une tumeur solide de carcinome épidermoïde chez une patiente de 85 ans, est une lignée cellulaire tumorale humaine de morphologie épithéliale, se développant généralement en grappes. La lignée cellulaire A-431 est largement utilisée dans les études sur le cancer, la toxicité et l'immuno-oncologie, servant de contrôle positif pour l'expression du récepteur du facteur de croissance épidermique (EGF) en raison de sa forte densité de récepteurs.

La liaison de l'EGF à son récepteur (EGFR) à la surface des cellules A431 entraîne une phosphorylation rapide de la tyrosine des protéines membranaires, ce qui déclenche une cascade de voies de signalisation intracellulaires. Ces voies comprennent les voies MAPK/ERK et PI3K/AKT, qui jouent un rôle essentiel dans la régulation de la progression du cycle cellulaire, de la survie et de la prolifération.

L'EGFR stimule la prolifération cellulaire à de faibles concentrations, tandis qu'à des concentrations plus élevées, il inhibe la croissance et induit une différenciation terminale dans les cellules A431. Cette réponse dynamique à l'EGFR souligne l'utilité de la lignée cellulaire dans l'exploration des voies de signalisation cellulaire et du cycle cellulaire dans le contexte du cancer.

Les modèles de xénogreffes dérivées des cellules A-431 sont utilisés pour étudier le comportement des tumeurs dans un environnement vivant et pour évaluer les thérapies anticancéreuses. Ces modèles permettent d'évaluer comment les traitements tels que la supplémentation en EGF et les radiations affectent la croissance tumorale et mettent en évidence la sensibilité des cellules aux radiations.

En résumé, la lignée cellulaire A-431 est un modèle cellulaire inestimable de carcinome épidermoïde humain, qui permet de mieux comprendre la signalisation de l'EGFR, la biologie des tumeurs et le développement d'interventions thérapeutiques visant à lutter contre le carcinome épidermoïde et d'autres cancers apparentés.

Tissu
Épidermoïde
Maladie
Carcinome épidermoïde
Synonymes
  • A-431
  • A431/P

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Femme
Propriétés de croissance
Adepte
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
D'aspect épithélial, plat et polygonal
Tumorigène
Oui, chez les souris immunodéprimées
Caryotype
Six chromosomes marqueurs présentant des réarrangements : der(6), der(7), der(17), der(21), dic(13,14) et dic(14,18). Amplification de l'oncogène C-MYC en 8q24 dans deux chromosomes marqueurs : dup(8)(q24) et der(15)t(8,15)(q22,p11).

04Identifiants

Référence
A431 (numéro de catalogue Cytion 300112)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0037

05Expression et sensibilité

Récepteurs exprimés
Sites de liaison à l'EGF
Expression des protéines
P53 positif
Isoenzymes
G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 0, AK-1, 1, GLO-1, 2
Profil mutationnel
BRAF V600Ewt
Produits
HBp17

06Manipulation et culture

Milieu de culture
DMEM, w : 4.5 g/L Glucose, w : 4 mM L-Glutamine, w : 3.7 g/L NaHCO3, w : 1.0 mM Pyruvate de sodium (numéro d'article Cytion 820300a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Densité de semis
1 x 104 cellules/cm2 donnera lieu à une monocouche confluente en 4 jours.
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Récupération après le dégel
Après décongélation, ensemencer les cellules à raison de 5 x 104 cellules/cm2 et laisser les cellules se remettre du processus de congélation et adhérer pendant au moins 24 heures.
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Âge du donneur
85 ans