Skip to content
תאים A431
Tissue
אפידרמואיד
Disease
קרצינומה של תאי קשקש
Synonyms
A-431, A431/P

Documents

תאים A431

Cell line · Product number 300112

The A431 cell line, derived from a solid epidermoid carcinoma tumor in an 85-year-old female patient, is a human tumor cell line with an epithelial morpho...

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

קו התאים A431, שמקורו בגידול קרצינומה אפידרמואידית מוצק בחולה בת 85, הוא קו תאים סרטניים אנושיים בעלי מורפולוגיה אפיתלית, הגדלים בדרך כלל באשכולות. קו התאים A-431 נמצא בשימוש נרחב במחקרים בתחום הסרטן, הרעילות והאימונו-אונקולוגיה, ומשמש כבקרה חיובית לביטוי קולטן גורם הגדילה האפידרמלי (EGF) בשל צפיפות הקולטנים הגבוהה שלו.

עם קישור ה-EGF לקולטן שלו (EGFR) על פני תאי A431, מתרחשת זרחון מהיר של חלבוני הממברנה, המפעיל שרשרת של מסלולי איתות תאיים. מסלולים אלה כוללים את מסלולי MAPK/ERK ו-PI3K/AKT, המהווים מרכיב מרכזי בוויסות התקדמות מחזור התא, הישרדותו והתפשטותו.

EGFR מגרה התרבות תאים בריכוזים נמוכים, ואילו בריכוזים גבוהים יותר הוא מעכב את הצמיחה ומעורר התמיינות סופית בתאי A431. תגובה דינמית זו ל-EGFR מדגישה את התועלת של קו התאים בחקר מסלולי האיתות התאיים ומחזור התא בהקשר של סרטן.

מודלים של שתלים זרים שמקורם בתאי A-431 משמשים לחקר התנהגות הגידול בסביבה חיה ולהערכת טיפולים נגד סרטן. מודלים אלה מסייעים בהערכת השפעתם של טיפולים כגון תוספת EGF והקרנות על צמיחת הגידול ומדגישים את רגישות התאים לקרינה.

לסיכום, קו התאים A-431 משמש כמודל תאים קרצינומה אפידרמואידית אנושית בעל ערך רב, המאפשר הבנה מעמיקה יותר של איתות EGFR, ביולוגיה של גידולים ופיתוח התערבויות טיפוליות שמטרתן להילחם בקרצינומה אפידרמואידית וסוגים אחרים של סרטן קשורים.

Tissue
אפידרמואיד
Disease
קרצינומה של תאי קשקש
Synonyms
  • A-431
  • A431/P

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי אפיתל, פוליגונלי שטוח
Tumourigenic
כן, בעכברים עם דיכוי חיסוני
Karyotype
שישה כרומוזומים סמנים עם שינויים: der(6), der(7), der(17), der(21), dic(13,14) ו-dic(14,18). הגברה של האונקוגן C-MYC ב-8q24 בשני כרומוזומים סמנים: dup(8)(q24) ו-der(15)t(8,15)(q22,p11).

04Identifiers

Citation
A431 (מספר קטלוגי Cytion 300112)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0037

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
אתרי קישור EGF
Protein expression
P53 חיובי
Isoenzymes
G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 0, AK-1, 1, GLO-1, 2
Mutational profile
BRAF V600Ewt
Products
HBp17

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Seeding density
1 x 104 תאים/סמ"ר יניבו שכבה חד-תאית מלוכדת תוך 4 ימים.
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Post-thaw recovery
לאחר ההפשרה, צלחת את התאים ב-5 x 104 תאים/סמ"ר והניח לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה ולהידבק למשך 24 שעות לפחות.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
85 שנים