תאים A431
Cell line · Product number 300112
The A431 cell line, derived from a solid epidermoid carcinoma tumor in an 85-year-old female patient, is a human tumor cell line with an epithelial morpho...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
קו התאים A431, שמקורו בגידול קרצינומה אפידרמואידית מוצק בחולה בת 85, הוא קו תאים סרטניים אנושיים בעלי מורפולוגיה אפיתלית, הגדלים בדרך כלל באשכולות. קו התאים A-431 נמצא בשימוש נרחב במחקרים בתחום הסרטן, הרעילות והאימונו-אונקולוגיה, ומשמש כבקרה חיובית לביטוי קולטן גורם הגדילה האפידרמלי (EGF) בשל צפיפות הקולטנים הגבוהה שלו.
עם קישור ה-EGF לקולטן שלו (EGFR) על פני תאי A431, מתרחשת זרחון מהיר של חלבוני הממברנה, המפעיל שרשרת של מסלולי איתות תאיים. מסלולים אלה כוללים את מסלולי MAPK/ERK ו-PI3K/AKT, המהווים מרכיב מרכזי בוויסות התקדמות מחזור התא, הישרדותו והתפשטותו.
EGFR מגרה התרבות תאים בריכוזים נמוכים, ואילו בריכוזים גבוהים יותר הוא מעכב את הצמיחה ומעורר התמיינות סופית בתאי A431. תגובה דינמית זו ל-EGFR מדגישה את התועלת של קו התאים בחקר מסלולי האיתות התאיים ומחזור התא בהקשר של סרטן.
מודלים של שתלים זרים שמקורם בתאי A-431 משמשים לחקר התנהגות הגידול בסביבה חיה ולהערכת טיפולים נגד סרטן. מודלים אלה מסייעים בהערכת השפעתם של טיפולים כגון תוספת EGF והקרנות על צמיחת הגידול ומדגישים את רגישות התאים לקרינה.
לסיכום, קו התאים A-431 משמש כמודל תאים קרצינומה אפידרמואידית אנושית בעל ערך רב, המאפשר הבנה מעמיקה יותר של איתות EGFR, ביולוגיה של גידולים ופיתוח התערבויות טיפוליות שמטרתן להילחם בקרצינומה אפידרמואידית וסוגים אחרים של סרטן קשורים.
- Tissue
- אפידרמואיד
- Disease
- קרצינומה של תאי קשקש
- Synonyms
- A-431
- A431/P
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- דמוי אפיתל, פוליגונלי שטוח
- Tumourigenic
- כן, בעכברים עם דיכוי חיסוני
- Karyotype
- שישה כרומוזומים סמנים עם שינויים: der(6), der(7), der(17), der(21), dic(13,14) ו-dic(14,18). הגברה של האונקוגן C-MYC ב-8q24 בשני כרומוזומים סמנים: dup(8)(q24) ו-der(15)t(8,15)(q22,p11).
04Identifiers
- Citation
- A431 (מספר קטלוגי Cytion 300112)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0037
05Expression and susceptibility
- Receptors expressed
- אתרי קישור EGF
- Protein expression
- P53 חיובי
- Isoenzymes
- G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 0, AK-1, 1, GLO-1, 2
- Mutational profile
- BRAF V600Ewt
- Products
- HBp17
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתווך 10% FBS
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Seeding density
- 1 x 104 תאים/סמ"ר יניבו שכבה חד-תאית מלוכדת תוך 4 ימים.
- Fluid renewal
- 2 עד 3 פעמים בשבוע
- Post-thaw recovery
- לאחר ההפשרה, צלחת את התאים ב-5 x 104 תאים/סמ"ר והניח לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה ולהידבק למשך 24 שעות לפחות.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Donor age
- 85 שנים
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes
.jpg)