Ga naar de inhoud
A431 Cellen
Weefsel
Epidermoïd
Ziekte
Plaveiselcelcarcinoom
Synoniemen
A-431, A431/P

Documenten

A431 Cellen

Cell line · Productnummer 300112

De A431-cellijn, afkomstig van een solide epidermoïde carcinoom bij een 85-jarige vrouwelijke patiënt, is een menselijke tumorcellijn met een epitheliale morfologie...

€430.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De A431 cellijn, afgeleid van een solide epidermoïd carcinoom tumor in een 85-jarige vrouwelijke patiënt, is een menselijke tumor cellijn met een epitheliale morfologie, meestal groeiend in clusters. De A-431 cellijn wordt veel gebruikt in kanker-, toxiciteits- en immuno-oncologiestudies en dient als positieve controle voor epidermale groeifactor (EGF) receptorexpressie vanwege de hoge receptordichtheid.

Bij binding van EGF aan zijn receptor (EGFR) op het oppervlak van A431-cellen treedt een snelle tyrosinefosforylering van membraaneiwitten op, die een cascade van intracellulaire signaalroutes in gang zet. Deze signaalwegen omvatten de MAPK/ERK en PI3K/AKT signaalwegen, die centraal staan in het reguleren van celcyclusprogressie, overleving en proliferatie.

EGFR stimuleert de celproliferatie bij lage concentraties, terwijl het bij hogere concentraties de groei remt en terminale differentiatie induceert in A431 cellen. Deze dynamische respons op EGFR onderstreept het nut van de cellijn voor het onderzoeken van celsignaalroutes en de celcyclus in de context van kanker.

Van A-431 cellen afgeleide xenograft-modellen worden gebruikt voor het bestuderen van tumorgedrag in een levende omgeving en voor het evalueren van antikankertherapieën. Deze modellen helpen beoordelen hoe behandelingen zoals EGF-suppletie en bestraling de tumorgroei beïnvloeden en benadrukken de gevoeligheid van de cellen voor bestraling.

Samengevat dient de A-431 cellijn als een waardevol humaan epidermoïd carcinoom celmodel, dat een beter begrip van EGFR signalering, tumorbiologie en de ontwikkeling van therapeutische interventies gericht op het bestrijden van epidermoïd carcinoom en andere gerelateerde kankers mogelijk maakt.

Weefsel
Epidermoïd
Ziekte
Plaveiselcelcarcinoom
Synoniemen
  • A-431
  • A431/P

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig, plat veelhoekig
Tumorverwekkend
Ja, in immuunonderdrukte muizen
Karyotype
Zes markerchromosomen met herschikkingen: der(6), der(7), der(17), der(21), dic(13,14), en dic(14,18). Amplificatie van het C-MYC oncogen op 8q24 in twee merkerchromosomen: dup(8)(q24) en der(15)t(8,15)(q22,p11).

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
A431 (Cytion catalogusnummer 300112)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0037

05Expressie en vatbaarheid

Tot expressie gebrachte receptoren
EGF-bindende sites
Eiwit-expressie
P53-positief
Iso-enzymen
G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 0, AK-1, 1, GLO-1, 2
Mutatieprofiel
BRAF V600Ewt
Producten
HBp17

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat (Cytion artikelnummer 820300a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
1 x 104 cellen/cm2 resulteert binnen 4 dagen in een confluente monolaag.
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Herstel na ontdooiing
Na ontdooien, de cellen op een plaat aanbrengen met een dichtheid van 5 x 104 cellen/cm2 en de cellen minstens 24 uur laten herstellen van het invriesproces en zich hechten.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
85 jaar