Prejsť na obsah
Bunky A431
Tkanivo
Epidermoid
Choroba
Spinocelulárny karcinóm
Synonymá
A-431, A431/P

Dokumenty

Bunky A431

Cell line · Číslo výrobku 300112

Bunka A431, získaná z nádoru v podobe solídneho epidermoidného karcinómu u 85-ročnej pacientky, je ľudská nádorová bunková línia s epiteliálnou morfo...

€430.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunková línia A431, odvodená zo solídneho nádoru epidermoidného karcinómu u 85-ročnej pacientky, je ľudská nádorová bunková línia s epitelovou morfológiou, ktorá zvyčajne rastie v zhlukoch. Bunková línia A-431 sa vo veľkej miere využíva v štúdiách rakoviny, toxicity a imunoonkologických štúdiách a slúži ako pozitívna kontrola expresie receptora epidermálneho rastového faktora (EGF) vďaka vysokej hustote receptorov.

Po naviazaní EGF na jeho receptor (EGFR) na povrchu buniek A431 dochádza k rýchlej tyrozínovej fosforylácii membránových proteínov, ktorá spúšťa kaskádu vnútrobunkových signálnych dráh. Tieto dráhy zahŕňajú dráhy MAPK/ERK a PI3K/AKT, ktoré sú kľúčové pri regulácii progresie bunkového cyklu, prežívania a proliferácie.

EGFR pri nízkych koncentráciách stimuluje proliferáciu buniek, zatiaľ čo pri vyšších koncentráciách inhibuje rast a indukuje terminálnu diferenciáciu buniek A431. Táto dynamická reakcia na EGFR zdôrazňuje užitočnosť bunkovej línie pri skúmaní bunkových signálnych dráh a bunkového cyklu v kontexte rakoviny.

Xenotransplantačné modely odvodené od buniek A-431 sa používajú na štúdium správania nádorov v živom prostredí a na hodnotenie protinádorových terapií. Tieto modely pomáhajú posúdiť, ako liečba, ako je napríklad suplementácia EGF a ožarovanie, ovplyvňuje rast nádoru a zdôrazňuje citlivosť buniek na ožarovanie.

Celkovo možno konštatovať, že bunková línia A-431 slúži ako neoceniteľný bunkový model ľudského epidermoidného karcinómu, ktorý uľahčuje hlbšie pochopenie signalizácie EGFR, biológie nádorov a vývoj terapeutických zásahov zameraných na boj proti epidermoidnému karcinómu a iným príbuzným druhom rakoviny.

Tkanivo
Epidermoid
Choroba
Spinocelulárny karcinóm
Synonymá
  • A-431
  • A431/P

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Žena
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelový, plochý polygonálny
Tumorigenický
Áno, u imunosuprimovaných myší
Karyotyp
Šesť markerových chromozómov s prestavbami: der(6), der(7), der(17), der(21), dic(13,14) a dic(14,18). Amplifikácia onkogénu C-MYC na 8q24 v dvoch markerových chromozómoch: dup(8)(q24) a der(15)t(8,15)(q22,p11).

04Identifikátory

Citácia
A431 (katalógové číslo Cytion 300112)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0037

05Prejav a náchylnosť

Exprimované receptory
Miesta viažuce EGF
Expresia proteínov
P53 pozitívny
Izoenzýmy
G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 0, AK-1, 1, GLO-1, 2
Mutčný profil
BRAF V600Ewt
Produkty
HBp17

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutamínu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 x 104 buniek/cm2 bude mať za následok konfluentnú monovrstvu do 4 dní.
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Zotavenie po rozmrazení
Po rozmrazení naneste bunky v koncentrácii 5 x 104 buniek/cm2 a nechajte bunky zotaviť sa z procesu zmrazenia a prilnúť aspoň 24 hodín.
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
85 rokov