Przejdź do treści
Komórki A431
Chusteczka
Epidermoid
Choroba
Rak płaskonabłonkowy
Synonimy
A-431, A431/P

Dokumenty

Komórki A431

Cell line · Numer produktu 300112

Linia komórkowa A431, wyhodowana z guza przedstawiającego lity rak nabłonkowy u 85-letniej pacjentki, jest ludzką linią komórkową nowotworową o morfologii nabłonkowej...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa A431, pochodząca z litego guza raka naskórka u 85-letniej pacjentki, jest ludzką linią komórek nowotworowych o morfologii nabłonkowej, zwykle rosnącą w skupiskach. Linia komórkowa A-431 jest szeroko wykorzystywana w badaniach nad rakiem, toksycznością i immunoonkologią, służąc jako pozytywna kontrola ekspresji receptora naskórkowego czynnika wzrostu (EGF) ze względu na wysoką gęstość receptora.

Po związaniu EGF z jego receptorem (EGFR) na powierzchni komórek A431 dochodzi do szybkiej fosforylacji tyrozyny białek błonowych, wyzwalając kaskadę wewnątrzkomórkowych szlaków sygnałowych. Szlaki te obejmują szlaki MAPK/ERK i PI3K/AKT, które odgrywają kluczową rolę w regulacji progresji cyklu komórkowego, przeżycia i proliferacji.

EGFR stymuluje proliferację komórek w niskich stężeniach, podczas gdy w wyższych stężeniach hamuje wzrost i indukuje końcowe różnicowanie w komórkach A431. Ta dynamiczna odpowiedź na EGFR podkreśla użyteczność linii komórkowej w badaniu szlaków sygnalizacji komórkowej i cyklu komórkowego w kontekście raka.

Modele ksenoprzeszczepów pochodzące z komórek A-431 są wykorzystywane do badania zachowania nowotworu w żywym środowisku i oceny terapii przeciwnowotworowych. Modele te pomagają ocenić, w jaki sposób terapie, takie jak suplementacja EGF i promieniowanie, wpływają na wzrost guza i podkreślają wrażliwość komórek na promieniowanie.

Podsumowując, linia komórkowa A-431 służy jako nieoceniony model komórkowy ludzkiego raka naskórka, ułatwiając głębsze zrozumienie sygnalizacji EGFR, biologii nowotworów i rozwój interwencji terapeutycznych mających na celu zwalczanie raka naskórka i innych powiązanych nowotworów.

Chusteczka
Epidermoid
Choroba
Rak płaskonabłonkowy
Synonimy
  • A-431
  • A431/P

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Kobieta
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Nabłonkowe, płaskie, wielokątne
Nowotworotwórczy
Tak, u myszy z obniżoną odpornością
Karyotyp
Sześć chromosomów markerowych z rearanżacjami: der(6), der(7), der(17), der(21), dic(13,14) i dic(14,18). Amplifikacja onkogenu C-MYC w 8q24 w dwóch chromosomach markerowych: dup(8)(q24) i der(15)t(8,15)(q22,p11).

04Identyfikatory

Źródło
A431 (numer katalogowy Cytion 300112)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0037

05Ekspresja i podatność

Receptory ulegające ekspresji
Miejsca wiążące EGF
Ekspresja białek
P53 dodatni
Izoenzymy
G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 0, AK-1, 1, GLO-1, 2
Profil mutacji
BRAF V600Ewt
Produkty
HBp17

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM, w: 4,5 g/l glukozy, w: 4 mM L-glutaminy, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pirogronianu sodu (numer artykułu Cytion 820300a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
1 x 104 komórek/cm2 spowoduje powstanie zlewającej się monowarstwy w ciągu 4 dni.
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
Po rozmrożeniu umieść komórki na płytce w ilości 5 x 104 komórek/cm2 i pozostaw je na co najmniej 24 godziny, aby mogły się zregenerować po procesie zamrażania i przylgnąć do podłoża.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
85 lat