Skip to content
Tế bào A431
Tissue
Biểu bì
Disease
Ung thư biểu mô vảy
Synonyms
A-431, A431/P

Documents

Tế bào A431

Cell line · Product number 300112

The A431 cell line, derived from a solid epidermoid carcinoma tumor in an 85-year-old female patient, is a human tumor cell line with an epithelial morpho...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

Dòng tế bào A431, được phân lập từ khối u biểu mô vảy rắn ở một bệnh nhân nữ 85 tuổi, là một dòng tế bào ung thư người có hình thái biểu mô, thường phát triển thành các cụm. Dòng tế bào A-431 được sử dụng rộng rãi trong các nghiên cứu về ung thư, độc tính và miễn dịch ung thư, đóng vai trò là đối chứng dương tính cho biểu hiện thụ thể yếu tố tăng trưởng biểu bì (EGF) do mật độ thụ thể cao.

Khi EGF gắn vào thụ thể của nó (EGFR) trên bề mặt tế bào A431, quá trình phosphoryl hóa tyrosine của các protein màng diễn ra nhanh chóng, kích hoạt một chuỗi các con đường tín hiệu nội bào. Các con đường này bao gồm con đường MAPK/ERK và PI3K/AKT, đóng vai trò quan trọng trong việc điều chỉnh tiến trình chu kỳ tế bào, sự sống còn và sự phát triển của tế bào.

EGFR kích thích sự tăng sinh tế bào ở nồng độ thấp, trong khi ở nồng độ cao hơn, nó ức chế sự tăng trưởng và gây ra sự biệt hóa cuối cùng trong tế bào A431. Phản ứng động này đối với EGFR nhấn mạnh tính hữu ích của dòng tế bào trong việc nghiên cứu các con đường tín hiệu tế bào và chu kỳ tế bào trong bối cảnh ung thư.

Các mô hình xenograft được tạo ra từ tế bào A-431 được sử dụng để nghiên cứu hành vi khối u trong môi trường sống và đánh giá các liệu pháp chống ung thư. Các mô hình này giúp đánh giá tác động của các liệu pháp như bổ sung EGF và xạ trị đối với sự phát triển khối u, đồng thời làm nổi bật độ nhạy cảm của tế bào đối với xạ trị.

Tóm lại, dòng tế bào A-431 đóng vai trò là mô hình tế bào ung thư biểu mô da người vô giá, góp phần hiểu sâu hơn về tín hiệu EGFR, sinh học khối u và phát triển các can thiệp điều trị nhằm chống lại ung thư biểu mô da và các loại ung thư liên quan khác.

Tissue
Biểu bì
Disease
Ung thư biểu mô vảy
Synonyms
  • A-431
  • A431/P

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Tế bào biểu mô dạng, phẳng, đa giác
Tumourigenic
Đúng, ở chuột bị ức chế miễn dịch
Karyotype
Sáu nhiễm sắc thể đánh dấu có sự sắp xếp lại: der(6), der(7), der(17), der(21), dic(13,14) và dic(14,18). Sự khuếch đại của gen ung thư C-MYC tại vị trí 8q24 trên hai nhiễm sắc thể đánh dấu: dup(8)(q24) và der(15)t(8,15)(q22,p11).

04Identifiers

Citation
A431 (Số catalog Cytion 300112)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0037

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
Các vị trí liên kết với EGF
Protein expression
P53 dương tính
Isoenzymes
G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 0, AK-1, 1, GLO-1, 2
Mutational profile
BRAF V600Ewt
Products
HBp17

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, chứa: 4,5 g/L glucose, chứa: 4 mM L-glutamine, chứa: 3,7 g/L NaHCO₃, chứa: 1,0 mM natri pyruvate (số hiệu sản phẩm Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung 10% huyết thanh bò phôi (FBS) vào môi trường nuôi cấy
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
Seeding density
1 x 10⁴ tế bào/cm² sẽ tạo thành một lớp đơn liên tục trong vòng 4 ngày.
Fluid renewal
2 đến 3 lần mỗi tuần
Post-thaw recovery
Sau khi rã đông, cấy tế bào với mật độ 5 x 10⁴ tế bào/cm² và để tế bào phục hồi sau quá trình đông lạnh và bám dính ít nhất 24 giờ.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

08Donor

Donor age
85 năm