Μετάβαση στο περιεχόμενο
Κύτταρα A431
Ιστός
Επιδερμοειδές
Ασθένεια
Καρκίνωμα πλακωδών κυττάρων
Συνώνυμα
A-431, A431/P

Έγγραφα

Κύτταρα A431

Cell line · Αριθμός προϊόντος 300112

Η κυτταρική σειρά A431, η οποία προέρχεται από έναν όγκο στερεού επιδερμοειδούς καρκινώματος σε μια 85χρονη ασθενή, είναι μια ανθρώπινη καρκινική κυτταρική σειρά με επιθηλιακή μορφολογία...

€430.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής

Προσαρμογή / Προτάσεις

Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Η κυτταρική σειρά A431, που προέρχεται από συμπαγή όγκο επιδερμοειδούς καρκινώματος σε γυναίκα ασθενή 85 ετών, είναι μια ανθρώπινη κυτταρική σειρά όγκου με επιθηλιακή μορφολογία, που συνήθως αναπτύσσεται σε ομάδες. Η κυτταρική σειρά A-431 χρησιμοποιείται εκτενώς σε μελέτες καρκίνου, τοξικότητας και ανοσο-ογκολογίας, χρησιμεύοντας ως θετικός έλεγχος για την έκφραση του υποδοχέα του επιδερμικού αυξητικού παράγοντα (EGF) λόγω της υψηλής πυκνότητας των υποδοχέων της.

Μετά τη σύνδεση του EGF με τον υποδοχέα του (EGFR) στην επιφάνεια των κυττάρων A431, λαμβάνει χώρα μια ταχεία φωσφορυλίωση τυροσίνης των μεμβρανικών πρωτεϊνών, πυροδοτώντας έναν καταρράκτη ενδοκυτταρικών σηματοδοτικών μονοπατιών. Τα μονοπάτια αυτά περιλαμβάνουν τα μονοπάτια MAPK/ERK και PI3K/AKT, τα οποία είναι καθοριστικής σημασίας για τη ρύθμιση της εξέλιξης του κυτταρικού κύκλου, της επιβίωσης και του πολλαπλασιασμού.

Ο EGFR διεγείρει τον κυτταρικό πολλαπλασιασμό σε χαμηλές συγκεντρώσεις, ενώ σε υψηλότερες συγκεντρώσεις αναστέλλει την ανάπτυξη και επάγει την τελική διαφοροποίηση στα κύτταρα A431. Αυτή η δυναμική απόκριση στον EGFR υπογραμμίζει τη χρησιμότητα της κυτταρικής σειράς στη διερεύνηση των μονοπατιών κυτταρικής σηματοδότησης και του κυτταρικού κύκλου στο πλαίσιο του καρκίνου.

Τα μοντέλα ξενομοσχευμάτων που προέρχονται από κύτταρα A-431 χρησιμοποιούνται για τη μελέτη της συμπεριφοράς του όγκου σε ζωντανό περιβάλλον και την αξιολόγηση αντικαρκινικών θεραπειών. Τα μοντέλα αυτά βοηθούν στην αξιολόγηση του τρόπου με τον οποίο οι θεραπείες, όπως η χορήγηση EGF και η ακτινοβολία, επηρεάζουν την ανάπτυξη του όγκου και αναδεικνύουν την ευαισθησία των κυττάρων στην ακτινοβολία.

Συνοπτικά, η κυτταρική σειρά A-431 χρησιμεύει ως ένα ανεκτίμητο κυτταρικό μοντέλο ανθρώπινου επιδερμοειδούς καρκινώματος, διευκολύνοντας τη βαθύτερη κατανόηση της σηματοδότησης του EGFR, της βιολογίας του όγκου και την ανάπτυξη θεραπευτικών παρεμβάσεων με στόχο την καταπολέμηση του επιδερμοειδούς καρκινώματος και άλλων συναφών καρκίνων.

Ιστός
Επιδερμοειδές
Ασθένεια
Καρκίνωμα πλακωδών κυττάρων
Συνώνυμα
  • A-431
  • A431/P

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Άνθρωπος
Σεξ
Γυναίκα
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Επιθηλιοειδής, επίπεδη πολυγωνική
Ογκογόνος
Ναι, σε ανοσοκατασταλμένα ποντίκια
Καρυότυπος
Έξι χρωμοσώματα-δείκτες με αναδιατάξεις: der(6), der(7), der(17), der(21), dic(13,14) και dic(14,18). Ενίσχυση του ογκογονιδίου C-MYC στο 8q24 σε δύο χρωμοσώματα-δείκτες: dup(8)(q24) και der(15)t(8,15)(q22,p11).

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
A431 (αριθμός καταλόγου Cytion 300112)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9606
Κελλοσαύρος
CVCL_0037

05Έκφραση και ευαισθησία

Υποδοχείς που εκφράζονται
Θέσεις πρόσδεσης του EGF
Έκφραση πρωτεϊνών
P53 θετικό
Ισοένζυμα
G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 0, AK-1, 1, GLO-1, 2
Προφίλ μεταλλάξεων
BRAF V600Ewt
Προϊόντα
HBp17

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
DMEM, w: 4,5 g/L γλυκόζη, w: 4 mM L-γλουταμίνη, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM πυρουβικό νάτριο (αριθμός άρθρου Cytion 820300a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Πυκνότητα σποράς
1 x 104 κύτταρα/cm2 θα οδηγήσουν σε συγχωνευμένη μονοστρωματική κυτταρική καλλιέργεια εντός 4 ημερών.
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Ανάκαμψη μετά την απόψυξη
Μετά την απόψυξη, τοποθετήστε τα κύτταρα σε πλάκα με πυκνότητα 5 x 104 κύτταρα/cm2 και αφήστε τα κύτταρα να αναρρώσουν από τη διαδικασία κατάψυξης και να προσκολληθούν για τουλάχιστον 24 ώρες.
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Ηλικία δωρητή
85 χρόνια